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代谢组学在辅助生殖技术胚胎优选中的应用
建立一种无创、可靠、准确的胚胎优选方案,进行选择性单胚胎移植,是改善辅助生殖结局的重要手段.低分子量代谢物是卵母细胞和胚胎发育中各种生理调节过程的终产物,提示可以通过测量卵泡液或胚胎培养液中的代谢产物来评估卵子和胚胎的发育质量,进行胚胎优选.目前代谢组学技术在胚胎优选中已有一些应用,但整体仍处于起步阶段.本文将对代谢组学技术在胚胎优选中的应用进行综述.
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体外培养与胚胎移植的策略选择
人类辅助生殖技术（ART）是目前解决不孕症为有效的治疗方式之一。在ART治疗过程中，体外培养条件以及胚胎移植的策略是直接影响其临床活产率和单胎妊娠率的关键因素。体外培养条件主要包括温度、pH值、氧浓度、培养液的成分以及培养过程中不同阶段是否应该更换培养液等。胚胎移植的策略则包含胚胎移植数量的选择、卵裂期与囊胚期移植的选择以及优质囊胚指标的选择等。结合近期国外研究成果对体外培养条件以及胚胎移植的策略中仍然存在争议的一些问题进行了探讨和综述。
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拉曼光谱检测在辅助生殖领域的研究进展
辅助生殖技术(ART)的体外受精/胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)需要实验室条件下处理两种配子、体外受精、体外培养形成胚胎或囊胚并挑选质量好的胚胎进行移植,使母亲妊娠,是目前解决不孕不育有效的手段.因此,客观评估配子及植入前胚胎的质量显得非常重要.拉曼光谱不受被测物形态限制,无需样本制备或标记等复杂操作,属于无损伤检测.由于其具有检测迅速、耗时短、敏感度高及分析准确等特点,因此近年被广泛应用于快速检测蛋白质、核酸和脂类等生物大分子损伤.拉曼光谱技术主要有表面增强拉曼光谱技术、共焦显微拉曼光谱技术和傅里叶变换拉曼光谱技术3种.本文概述拉曼光谱的特点及上述3种主要拉曼光谱技术在生物样品分析方面的应用,探讨拉曼光谱技术应用于对精液、卵子和植入前胚胎质量检测的可能性,在辅助生殖领域具有潜在的应用前景.
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卵裂期胚胎不同解冻时间点对其囊胚培养及妊娠结局的影响
目的:探讨卵裂期冻融胚胎不同解冻时间点对囊胚培养后移植妊娠结局的影响.方法:回顾性分析2013-2016年在江门市中心医院行冻融胚胎囊胚培养477例患者共520周期的资料.依据胚胎复苏时间不同分为D2组(D2 15:00-16:00胚胎复苏)、D3组(D3 8:00-9:00胚胎复苏),2组均于D5、D6 8:00-9:00观察囊胚形成.D5:D2、D3组培养时间分别为65 h、48 h;D6:D2、D3组培养时间分别为89 h、72 h.结果:2组的囊胚形成率(48.10％ vs.46.59％)、优质囊胚率(39.70％ vs.34.22％)、临床妊娠率(70.08％ vs.69.48％)、生化妊娠率(7.48％ vs.7.98％)、胚胎种植率(55.93％vs.58.06％),差异均无统计学意义(均P＞0.05).优胚与非优胚在48 h、65 h囊胚形成率分别为30.37％ vs.13.28％、62.64％ vs.40.14％,差异有统计学意义(均P＜0.05).优胚与非优胚在72 h、89 h囊胚形成率分别为32.32％ vs.27.59％、2.17％ vs.2.06％,差异无统计学意义(均P＞0.05).不同培养时间移植周期的临床妊娠率、胚胎种植率:48 h组＞65 h组＞72 h组＞89 h组,而生化妊娠率:89 h组＞48 h组＞65 h组＞72 h组,但各组间比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论:冻融胚胎囊胚培养可以根据工作需要选择在D2 15:00-16:00或D3 8:0009:00进行胚胎解冻复苏;在D2 15:00-16:00解冻复苏,多数在D5即可形成囊胚进行移植;在D3 8:0-9:00解冻复苏,优胚在D5或D6均有形成囊胚可能,而非优胚需要培养较长的时间在D6形成囊胚.
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降低体外受精-胚胎移植多胎妊娠的策略及效果分析
目的:研究选择性囊胚培养与单囊胚移植(eBC-SBT)降低多胎率的作用.方法:对2009年1月-2010年12月收治行体外受精胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)助孕,评估预后较好且高危双胎妊娠风险患者进行一对一知情告知,根据患者的意愿分为单囊胚移植组和卵裂胚移植组,分析2组间的种植率、临床妊娠率、多胎率及单卵双胎率等指标,同时对干预前、干预后总体的种植率、临床妊娠率、多胎率进行研究.结果:①囊胚移植组与卵裂胚移植组间患者年龄、胚胎冷冻率差异无统计学意义(P＞0.05),但单囊胚移植较双卵裂期胚胎移植(ET)的种植率更高(52.4％ vs.43.4％,P＜0.05),尽管临床妊娠率有所降低(52.4％ vs.60.1％,P＞0.05),但前者的多胎率明显降低(3.3％ vs.44.2％,P＜0.05),早产率、低体质量儿出生率降低(P＜0.01),足月单胎活产率提高(P＜0.01).②干预前、干预后2组间患者的平均年龄、获卵数和冷冻率差异均无统计学意义(P＞0.05),干预后移植胚胎数显著下降.胚胎种植率(26.2％ vs.34.6％,P＜0.01)、总体临床妊娠率(42.4％ vs.47.1％,P＜0.05)及活胎分娩率(30.6％ vs.38.0％,P＜0.01)提高,而多胎妊娠率(30.9％vs.17.3％,P＜0.01)和低体质量儿出生率(30.7％ vs.24.0％,P＜0.05)显著降低.结论:选择性囊胚培养与单囊胚移植能在有效维持总体临床妊娠率的前提下显著降低IVF-ET的多胎率,改善妊娠结局.
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利用人体外成熟卵母细胞获得孤雌活化胚胎的研究
目的:了解人体外成熟卵母细胞经电脉冲联合6-甲基氨基嘌呤(6-dimethylamiuoputine,6-DMAP)作用后的发育潜能.方法:以未见第1极体(polar body,PB)排出的不成熟人卵母细胞作为研究对象,经过体外培养成熟,采用电脉冲联合6-DMAP进行孤雌激活处理,观察其活化效率和胚胎早期的体外发育效率.结果:电脉冲联合6-DMAP孤雌激活人体外成熟卵母细胞,处理组活化率为32.20%,对照组活化率为12.07%,处理组活化率明显高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:电脉冲联合6-DMAP能有效激活人体外成熟卵母细胞,但活化胚胎的早期发育能力显著下降.
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卵透明带结合法筛选精子在男性不育症卵胞浆内单精子注射治疗中的应用
目的：探讨采用卵透明带上的精子行卵胞浆内单精子注射（ICSI）的治疗结局。方法选择因单纯男方少、弱、畸精症而不育并符合ICSI治疗指征的患者82例，依据ICSI病历号末位的奇数、偶数分成传统ICSI对照组和利用卵透明带上的精子行ICSI的观察组，比较两组正常受精率、卵裂率、优胚率、种植率、临床妊娠率和早期流产率。结果两组女方年龄、不育年限、成熟卵（MII）率、正常受精率、卵裂率的差异均无统计学意义（均 P ＞0．05）；观察组种植率、临床妊娠率（46．6％、63．3％）均明显高于对照组（38．5％、53.6％），但差异均无统计学意义（均P＞0．05）；观察组可利用胚胎率、优质胚胎率（73．9％、51．0％）显著高于对照组（65.8％、38．6％），差异均有统计学意义（χ2＝5．84、11．6，均P＜0．05）。结论应用自体卵透明带上的精子进行ICSI，能有效提高ICSI胚胎质量。
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胚胎集合培养研究进展
体外受精-胚胎移植(IVF-ET)是常用的治疗不孕症的辅助生殖技术.世界范围内每年所开展的 IVF-ET周期总数大于 1000000[1].作为 IVF 周期的主要环节,胚胎培养与 IVF 结局密切相关.胚胎学家期望通过改良胚胎培养体系来提高胚胎质量,从而改善 IVF 结局.除改良胚胎培养液配方,调整培养体系的氧浓度,改善实验室和培养箱内空气质量及应用封闭培养体系外,越来越多的胚胎学家开始重视集合培养和胚胎密度对胚胎发育的影响.集合培养是将多个胚胎置于 1 个液滴内培养;而单胚胎培养指 1 个胚胎置于 1 个液滴内培养.胚胎密度指培养液体积与培养于其中的胚胎数目之比.近年来,关于动物和人胚胎集合培养的研究陆续发表,本文就此进行综述.
