首页 > 文献资料
-
急性髓系白血病CD44v6的表达和ERK磷酸化水平的关系
目的 探讨CD44v6和p-ERK1/2在AML中的表达及临床意义.方法 应用流式细胞仪检测22名健康对照者及152例AML患者骨髓原始细胞上CD44v6及p-ERK1/2的表达.对其中129例AML患者进行了跟踪随访,分析CD+44v6和CD-44v6对AML患者的复发率以及生存时间是否存在影响.结果 22名健康对照者中,各有1例(4.5%)CD44v6和p-ERK1/2阳性.152例AML患者中,55例(36.2%)CD44v6阳性,97例(64.5%)p-ERK1/2阳性.AML患者组骨髓原始细胞p-ERK1/2的MFI为14(7～58),高于健康对照组的8(6～10),差异有统计学意义(U=4.2,P＜0.01).CD+44v6 AML患者p-ERK1/2的MFI为28(15～61),高于CD-44v6 AML患者的18(6～37),差异有统计学意义(U=6.7,P＜0.01).CD44v6的MFI与p-ERK1/2的MFI呈显著性正相关(ra=0.7,P＜0.01).对129例AML患者进行了4～65个月的随访,其中CD-44v6患者的复发率为32.1%(26/81),低于CD+44v6患者的复发率81.3%(39/48),差异有统计学意义(x2=29.1,P＜0.01).生存分析表明,CD+44v6AML患者平均生存时间为(28.5±1.8)个月,CD-44v6AML患者平均生存时间为(51.2±2.0)个月,差异有统计学意义(x2=48.2,P＜0.01).结论 CD44v6阳性的AML患者生存时间明显缩短、预后差.CD44v6可能通过上调p-ERK1/2水平促进白血病细胞增殖.
-
Ser3位点的Cofilin1磷酸化与老年女性卵巢癌患者紫杉醇耐药的相关性研究
目的 研究cofilin1的Ser3位点磷酸化与卵巢癌紫杉醇耐药的相关性,并在临床标本中研究磷酸化cofilin对卵巢癌患者生存的预后价值. 方法 采用分子生物学技术构建野生型cofilin1过表达(WT)、抑制Ser3位点磷酸化活性的cofilin1过表达(S3L)和cofilin1降调(SiRNA-C)质粒,分别转染SKOV3和SK-TR30细胞,比较细胞瞬转后生物学特性和耐药性的改变;收集临床病理证实的且术后接受紫杉醇+顺铂(TC)化疗的51例初治老年女性卵巢癌患者,其中化疗敏感组30例、耐药组21例,采用免疫组织化学方法检测化疗敏感和耐药组病理切片中cofilin1和磷酸化cofilin两种蛋白的表达差异,以及对卵巢癌患者的预后价值. 结果 过表达cofilin1的SKOV3细胞,与对照组细胞比较,G0/G1期细胞显著增多(P=0.034),S期细胞显著减少(P=0.031),细胞凋亡率明显降低(P=0.020);但当Ser3位点磷酸化活性被抑制后,以上生物学特性消失.当SK-TR30细胞cofilin1表达下调时,G0/G1期细胞减少(P=0.020).cofilin1在化疗敏感组和耐药组卵巢癌组织病理切片中的阳性表达率为56.7％ (17/30)与57.1％(12/21),差异无统计学意义(x2=0.332,P=0.943);磷酸化cofilin则分别为53.3％(16/30)与85.7％(18/21),差异有统计学意义(x2=5.829,P=0.016).同时,磷酸化cofilin高表达的患者,尤其是对化疗敏感的患者,与低表达组比较,无进展生存时间(PFS)显著缩短(x2=21.440,P＜0.01,95％CI:0.068～0.883). 结论 Ser3位点的cofilin1的磷酸化与卵巢癌紫杉醇耐药相关,但相关调控机制有待于进一步研究.
-
小鼠肝脏磷酸化蛋白质组鉴定及磷酸化修饰激酶的分析
目的：构建小鼠肝脏磷酸化蛋白质组并对磷酸化激酶进行分析，为完善小鼠激酶磷酸化调控网络提供有价值的信息。方法对正常小鼠肝组织总蛋白提取液进行FASP酶切，用TiO2富集磷酸化肽段，为降低样本的复杂度，对富集到的磷酸化肽段进行反相色谱分离后，质谱鉴定样本中的磷酸化蛋白质组，对鉴定到的磷酸化修饰的激酶进行分析，提供新鉴定到磷酸化修饰位点的信息。结果与结论成功构建了高效的鉴定小鼠肝磷酸化蛋白质组的方法，共鉴定到1533个磷酸化蛋白质，从中确认5386个磷酸化位点和4553个磷酸化肽段，其中包含116磷酸化修饰的激酶，并于发生磷酸化修饰的激酶中成功鉴定到126个新的磷酸化修饰位点，为完善小鼠肝磷酸化信号调控网络提供了有价值的信息。
-
窄谱中波紫外线对角质形成细胞角蛋白17表达的影响
目的 探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对角质形成细胞角蛋白17(K17)表达的影响.方法 不同剂量NB-UVB照射角质形成细胞后,培养6、12、24h,分别用CCK8法检测细胞增殖情况,实时PCR、Western印迹检测K17 mRNA和蛋白表达以及Erk 1/2、磷酸化Erk 1/2的表达水平.结果 低剂量(50、100 mJ/cm2)NB-UVB照射可刺激角质形成细胞增殖和K17表达,而较高剂量(200、400 mJ/cm2)NB-UVB照射则抑制细胞增殖和K17表达,其差异有统计学意义(P＜0.05或0.01).通过对NB-UVB照射后相关信号通路进行筛查,发现100 mJ/em2 NB-UVB照射可以上调角质形成细胞Erk1/2的磷酸化水平,而400 mJ/cm2 NB-UVB照射后Erk1/2的磷酸化水平明显下降,阻断这一信号通路可以抑制低剂量NB-UVB对K17的上调.结论 NB-UVB对K17表达的影响受Erk1/2通路的调控.
-
全静脉搭桥与全动脉搭桥对行CABG术后心肌损伤及远期疗效的影响
目的 研究全静脉搭桥与全动脉搭桥对行冠状动脉旁路移植术(CABG)的远期疗效及对心肌损伤的影响.方法 选取2011年1月至2015年12月在聊城市第二人民医院行CABG的冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者98例为研究对象,以乳内动脉为桥血管的患者为全动脉组(50例),以大隐静脉为桥血管的患者为全静脉组(48例).比较手术临床指标、术后住院时间、术后并发症、移植血管数量;评价两组远期血管畅通率,分别测定升主动脉阻断时、升主动脉开放后30 min,2、4、24 h血清糖原磷酸化酶同工酶脑型(GPBB)水平.结果 全动脉组平均移植血管数量显著低于全静脉组(P＜0.05),全动脉组较全静脉组手术耗时显著增长(P＜0.05),阻断升主动脉血流时间显著增长(P＜0.05),但术后呼吸机辅助时间显著缩短(P＜0.05),心房颤动与切口感染发生率显著降低(P＜0.05),两组术后24 h胸腔引流量、术后住院时间及其他并发症发生率差异无统计学意义(P＞0.05).术后12个月全动脉组和全静脉组的血管通畅率分别为87.13％、75.97％,全动脉组显著高于全静脉组(P＜0.05).两组血清GPBB水平变化趋势相同,在升主动脉开放后30 min到达峰值,随后下降并在24 h后恢复至低水平,但全静脉组血清GPBB水平高于全动脉组(P＜0.05).结论 全动脉搭桥手术耗时更长,操作难度更大,但术后并发症发生率更低,远期血管通畅率更高,血清GPBB水平更低,对心肌损伤更轻.
-
细胞周期依赖激酶2重组慢病毒对内毒素致大鼠急性肺损伤的作用
目的 探讨细胞周期依赖激酶2(cdk2)重组慢病毒在内毒素(LPS)导致急性肺损伤(ALI)中的作用. 方法 36只成年SD大鼠按随机数字表法分为对照组、LPS模型组、基因干预组,每组12只.通过气管滴加LPS的方法成功复制大鼠LPS致ALI动物模型.对照组于伤后0,24,48 h气管滴加60 μl/kg等渗盐水;LPS模型组于伤后0,24 h气管滴加 60 μl/kg对照慢病毒,伤后48 h给予对照组同等体积的LPS等渗盐水;基因干预组于伤后0,24 h气管滴加60 μl/kg cdk2重组慢病毒,伤后48 h给予对照组同等体积的LPS等渗盐水.伤后24 h,取各组右肺下叶肺组织200 mg,HE染色观察肺组织病理变化;Western blot法检测组织cdk2、Clara细胞分泌蛋白(CCSP)、磷脂酶A2(PLA2)和磷酸化C/EBP β (p-C/EBP β)的蛋白表达;采集各组伤后24 h新鲜血液,ELISA法检测血液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10的含量. 结果 伤后24 h,与对照组比较,LPS模型组肺组织炎性浸润明显,肺泡组织结构损伤严重;与LPS模型组比较,基因干预组大鼠肺组织炎性浸润则明显减弱,肺泡结构趋于正常.基因干预组cdk2含量(4.29±0.73)明显高于对照组(1.00±0.21)和LPS模型组(0.93±0.17)(P<0.05);基因干预组CCSP表达量(3.19±0.38)明显高于对照组(1.00±0.20)及LPS模型组(0.32±0.19)(P<0.05);LPS模型组PLA2表达量(4.49±0.51)明显高于对照组(1.00±0.13)和基因干预组(1.76±0.26)(P<0.05);三组p-C/EBP β浓度变化趋势与CCSP相似.LPS模型组TNF-α表达量[(196.34±30.17)pg/ml]明显高于对照组[(71.24±5.13)pg/ml]和基因干预组[(86.32±11.02)pg/ml](P<0.05);三组IL-1β、IL-6、IL-10 变化趋势与TNF-α相似.结论 cdk2过表达可使CCSP蛋白表达增加,PLA2、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10表达减少,对于LPS导致的ALI起到肺保护作用,可能与调控C/EBP β磷酸化程相关.
关键词： CCAAT增强子结合蛋白β 磷酸化酶类 细胞周期依赖激酶2 内毒素类 急性肺损伤 -
CRKL活性与白血病细胞多药耐药的关系
目的 探讨CRKL活性在白血病细胞多药耐药中的作用,发现与耐药相关的新因素.方法 应用流式细胞术比较CRKL在K562、HL-60及其耐药细胞中的活性变化;对敏感细胞用柔红霉素处理后,检测CRKL活性与化疗作用时间的关系以及撤药后CRKL活性的改变.结果 与K562、HL-60敏感细胞比较,在K562、HL-60耐药细胞株中,CRKL的磷酸化水平明显升高;在用柔红霉素处理72 h后,K562和HL-60细胞CRKL的磷酸化水平与化疗药物作用呈时间依赖性,未发现Jurkat细胞CRKL磷酸化水平的改变.结论 CRKL活性变化与白血病细胞多药耐药的形成有关,是自血病细胞多药耐药的又一个新的影响因素.
