免疫缺陷小鼠肿瘤模型的建立及其肿瘤相关免疫机制的探讨

目的:观察不同免疫缺陷小鼠中的人肝癌细胞生长情况以及T,B淋巴细胞的免疫作用,探讨免疫缺陷小鼠肿瘤模型制作的意义.方法:将体外培养的人肝癌细胞接种到四种免疫缺陷小鼠,分别为:B细胞缺陷的CBA/N,T细胞缺陷的Balb/c-nu,T,B细胞缺陷的SCID及免疫重建的SCID小鼠,观察其生长特点;作鼠脾细胞毒试验,测定外周血CD4+,CD8+数分数和荷瘤鼠血清Ig含量的变化;作肝癌细胞凝集试验.结果:CBA/N和用BALB/c鼠外周血淋巴细胞重建的SCID(B-PBL-SCID)鼠不成瘤,nude、SCID和用CBA/N鼠外周血淋巴细重建的SCID-(C-PBL-SCID)小鼠全部成瘤;SCID鼠的瘤体比裸鼠瘤体长的更快,肝内接种转移率更高、转移范围更大.接种瘤细胞的BALB/c和CBA/N鼠脾细胞对癌细胞杀伤力较强,免疫重建的SCID鼠脾细胞毒杀伤较小.接种瘤细胞的鼠CD4+数分数都下降,CD8+变化不大,CD4+/CD8+比值下降.具有B细胞的实验鼠均测得Ig在mg@L1水平,并能使癌细胞产生凝集反应.结论:SCID鼠是建立肿瘤模型和免疫重建研究的理想小鼠;小鼠成瘤率与T细胞相关,T细胞在异种瘤移植排斥中起主要作用;B淋巴细胞及其产生的抗体在抗肿瘤中起着不可忽视的作用.

小鼠肿瘤模型及其在胰腺癌治疗研究中的应用

恶性肿瘤严重危害人类健康.但迄今为止,尚无确实有效的治疗方法.因此,针对各种恶性肿瘤的化疗方案研究也就成了当今医学领域的重点.

小鼠肺癌模型研究进展

肺癌目前是世界范围内发病率和病死率高的恶性肿瘤,并且肺也是恶性肿瘤容易发生远处转移的器官之一.加大肺癌的科研力度势在必行,建立合适的肺癌动物模型可为肺癌的发病原因、发病机制、预防策略及临床早期诊断和药物疗效评价等提供研究基础.其中,又因小鼠是科研中常使用的实验动物,故本文旨在介绍目前常用的各种小鼠肺癌模型,如化学诱导小鼠模型、转基因小鼠肺癌模型、异位移植小鼠模型、原位移植小鼠模型及小鼠肺转移模型等构建方法,以及其在科研领域中的应用.分析表明,小鼠肺癌模型不仅需要多学科的交叉渗透以拓展其研究宽度,而且也需要将各种现有模型进行更灵活的运用和更深入的探索,这样才能有所突破.

SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠自发肺部肿瘤模型的建立

目的 构建一种利用Cre重组酶体内低表达诱导K-ras G12D在小鼠肺部活化的慢性自发性肺部肿瘤模型.方法 首先构建一种肺脏特异性低表达Cre重组酶的SPC-CRE转基因小鼠,利用SPC-CRE转基因小鼠与LSL K-ras G12D 转基因小鼠杂交,获得SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠.对4月龄,5月龄,7月龄,9月龄SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠肺部进行取材,固定并进行常规石蜡切片及HE染色,镜下观察小鼠肺部病理特征.使用micro-CT对7月龄,9月龄SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠肺部肿瘤结节进行检测.结果 获得了SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠,该小鼠在肺组织特异性低表达Cre重组酶,并诱导K-ras G12D在肺组织的表达,由K-ras G12D引起肺组织肿瘤的发生.SPC-CRE-Kras双阳性转基因小鼠4月龄肺部出现轻度炎症反应,5月龄开始肺部可见散在腺瘤样的结节,成瘤率为100%(雌6/6,雄6/6),随着月龄增加,小鼠肺腺瘤结节呈增大趋势,病理变化呈进展状态,9月龄时通过micro-CT可以检测到肺部少量散在孤立的肿瘤结节.结论 利用肺组织特异性低表达Cre重组酶的方式,建立了一种从肺部炎症反应到肺腺瘤进展时程较长的慢性自发肺部肿瘤小鼠模型,为肺癌发生的研究提供了更长的窗口期.

快速高效构建小鼠体内成像肿瘤模型的方法学平台

目的 建立小鼠肿瘤模型,并用体内成像的方法进行检测,降低传统方法中的系统误差与人为测量错误,提高模型的准确性与客观性.方法 构建萤火虫素酶的慢病毒表达载体,体外包装能表达萤火虫素酶的慢病毒颗粒.用病毒颗粒转染目标细胞,筛选出稳定表达萤火虫素酶的目标细胞系.体外运用双荧光素酶分析系统进行质控检测,通过后建立小鼠肿瘤模型,后使用活体成像的方法对小鼠肿瘤模型中肿瘤的大小进行定量分析,以评估小鼠肿瘤模型的恶化程度.结果 成功构建含有萤火虫素酶基因的慢病毒质粒；包装能正确表达具有功能活性萤火虫素酶的慢病毒颗粒；使用病毒颗粒感染目标细胞并筛选出能表达萤火虫素酶的稳转细胞系；建立小鼠皮下肿瘤模型,并利用活体成像的方法对肿瘤大小进行定量分析.结论 通过该种方法可以建立表达萤火虫素酶的稳转细胞系,利用体内成像的检测方法可以准确的对肿瘤模型的发生发展进行评估.

免疫缺陷小鼠肿瘤模型的建立及其肿瘤相关免疫机制的探讨