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表达幽门螺杆菌热休克蛋白60克隆的构建
目的:构建含Hp热休克蛋白60(Hsp60)基因的重组载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,为进一步研究Hsp60的佐剂功能和免疫原性奠定基础.方法:提取Hp染色体基因,用PCR方法扩增Hsp60基因,将其克隆至表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并通过免疫印迹实验研究其免疫原性.结果:分离得到了1.6kb的Hsp60基因片段,并在大肠杆菌中实现了该基因的高效表达,在37℃诱导表达3 h后,表达产物占细菌总蛋白的27.2%.表达以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,其中主要是包涵体的形式,目的蛋白占不溶性蛋白的76.6%.经免疫印迹证实该重组蛋白可以被Hp感染患者血清所识别.结论:成功地克隆并表达Hp Hsp60基因,为Hp疫苗的研制打下了基础.
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FS-1272滴眼液对大鼠亚硒酸钠性白内障的影响
[目的]观察FS-1272滴眼液对大鼠亚硒酸钠性白内障的作用及作用机理.[方法]采用大鼠亚硒酸钠性白内障模型,观察大鼠晶状体混浊程度,测定晶状体中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱苷肽过氧化酶(GSH-px)活性以及丙二醛(MDA)、可溶性蛋白(WSP)和不溶性蛋白(WIP)含量.[结果]FS-1272滴眼液能降低大鼠晶状体浑浊程度,增强SOD、CAT、GSH-px活性,同时降低MDA、不可溶性蛋白含量,升高可溶蛋白含量.[结论]FS-1272滴眼液可减轻晶状体氧化损伤程度,从而起到延缓白内障的发生和发展的作用.
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白内障的研究现状
白内障是当今世界上主要的致盲性眼病之一,其实质是晶体失去透明性变成混浊状态,导致视力下降,甚至失明.根据世界卫生组织(WHO)盲与低视力的标准,Zhang SY等[1]于1987年在全国范围内对视力残疾进行了分层随机抽样调查,样本量为1579316人.结果表明双眼矫正视力<0.3的白内障患者共7336人,患病率为0.46%.而白内障,尤其是老年性白内障的患病率随年龄增长而明显升高.目前白内障的治疗尚无特效药物,一般以手术摘除为主.由于白内障不但严重影响患者的视力与生活,而且给患者造成巨大的经济损失,因此世界各国有关的科学工作者正致力于白内障发病机理与药物治疗的研究,以期寻找到有效的预防措施和非手术疗法.本文就白内障的研究现状综述如下.1 晶体的生理学和生物化学[2]晶体是体内唯一富含高浓度蛋白质并具有弹性且能改变其聚焦能力的双凸透明体.它悬吊于房水与玻璃体之间,无血管,靠房水提供营养.正常晶体含水约65%、有机物35%,后者主要由长寿命的、晶体所特有的δ、β和γ等晶体蛋白所组成.晶体蛋白中, 15%组份为不溶性蛋白,其余85%为可溶性蛋白.白内障形成过程中,可溶性δ和β晶体蛋白从晶体漏出而进入前房,使晶体总蛋白量减少.