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心脏特异基因p93文献资料
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心肌特异表达基因p93的激酶及丝氨酸结构域在大肠杆菌中的高效表达
目的在大肠杆菌中高水平表达并分离纯化心脏特异表达基因p93的激酶与丝氨酸结构域片段.方法利用DNA重组技术,构建C末端带有6×His标签的p93激酶与丝氨酸结构域(p93-C)片段的原核表达载体pET28a-p93-C.对诱导表达条件和包涵体洗涤条件优化后,用Ni2+金属螯合吸附层析柱纯化.结果成功构建了pET28a-p93-C原核表达载体,诱导后摇床转速在350r/min下表达量高,包涵体洗涤在超声条件下较好,分离纯化后从100ml菌液中可获得2.5mg蛋白.结论建立了高效稳定的p93-C原核表达体系以及较好的包涵体洗涤方法.
