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抵抗素对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1表达及胰岛素分泌和细胞凋亡影响的观察
目的 探讨抵抗素对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)的表达、胰岛素分泌及细胞增殖、凋亡的影响. 方法 βTc6细胞分为对照(NC)组和抵抗素组(浓度20～200 ng/ml),干预6、12、24 h,CCK-8法测定细胞增殖能力,DNA Ladder检测细胞凋亡,RT-PCR检测PDX-1基因表达,放射免疫法测定胰岛素分泌. 结果 (1)与NC组比较,20、40 ng/ml抵抗素组各干预时段,胰岛β细胞的PDX-1表达、增殖活力、凋亡、胰岛素分泌差异均无统计学意义(P＞0.05)；(2)随抵抗素浓度在60～200 ng/ml内增加,干预时间由6～24 h延长,细胞PDX-1表达、增殖活力、胰岛素分泌均呈现浓度和时间依赖性降低(P均＜0.05),且细胞凋亡条带逐渐明显. 结论 在一定的浓度和时间范围内,抵抗素可呈浓度和时间依赖性下调胰岛β细胞PDX-1表达,损害胰岛素分泌,抑制细胞增殖、诱导其凋亡.
关键词： 抵抗素 胰岛β细胞 胰-十二指肠同源盒因子-1 胰岛素分泌 细胞凋亡 -
骨髓间充质干细胞与糖尿病及其并发症的治疗
传统的药物治疗不能阻止糖尿病患者胰岛β细胞的进行性衰竭.骨髓间充质干细胞是一个缺乏造血干细胞的细胞群,具有自我更新能力以及多向分化潜能,可定向诱导分化为胰岛素分泌细胞,分泌胰岛素,从而可能用于糖尿病及其并发症的治疗.胰-十二指肠同源盒因子-1可提高其分化效率.本文主要对骨髓间充质干细胞治疗糖尿病及其并发症作一综述.
关键词： 骨髓间充质干细胞 糖尿病 胰岛素分泌细胞 胰-十二指肠同源盒因子-1 -
游离脂肪酸对βTc6细胞PDX-1表达及胰岛素分泌能力的影响
目的 探讨游离脂肪酸对胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)的表达及相应的β细胞增殖活性和胰岛素分泌功能变化的影响.方法 0.25～1.00 mmol/L游离脂肪酸干预小鼠胰岛素瘤细胞系βTc6细胞24～48 h,应用RT-PCR法检测转录因子PDX-1 mRNA表达,四甲基偶氮唑盐法检测细胞的增殖活性,放射免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平,并观察细胞形态变化.结果 经0.25～1.00 mmol/L游离脂肪酸干预24 h,βTc6细胞PDX-1 mRNA的转录逐步增加,但随着干预时间进一步延长至48 h,PDX-1 mRNA的转录逐渐回落,特别是用1.00 mmoL/L游离脂肪酸干预48 h后,βTc6细胞PDX-1 mRNA的表达低于空白对照组.经过0.50～1.00 mmol/L游离脂肪酸24～48 h的干预之后,βTc6细胞形态学上呈现凋亡趋势,细胞增殖活力以及葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能降低,而0.25 mmol/L游离脂肪酸24 h的干预未见此类现象.结论 短时间低浓度的游离脂肪酸干预可介导β细胞转录因子PDX-1的表达上调,对β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力无明显影响;而长时间高浓度的游离脂肪酸干预则将导致PDX-1 mRNA的表达下调,并使β细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力受损.
关键词： 游离脂肪酸 βTC6细胞 胰-十二指肠同源盒因子-1 胰岛素 -
高糖在联合转录因子诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞中的作用
目的 探讨高糖在胰-十二指肠同源盒因子-1(Pdx-1)、神经元素3(Ngn 3)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为胰岛样细胞(IPC)中的作用.方法 构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/(zeo)-Ngn 3、pcDNA3.1(+)-Pdx-1,贴壁培养法分离Sprauge-Dawley雄性大鼠BMSC,流式细胞术鉴定BMSC,脂质体介导转染BMSC,并筛选稳定转染细胞培养于高糖(4.5 g/L) DMEM培养液,RT-PCR检测Ngn 3、巢蛋白、Pdx-1 mRNA的表达,ELISA法检测胰岛素浓度.结果 分离的细胞表面高表达CD44、CD105,而低表达CD34,符合BMSC特征.诱导过程中BMSC形态上趋向IPC分化,高糖培养组较低糖培养组细胞上清胰岛素浓度明显提高(F=25.77,P＜0.05),高糖质粒培养组Pdx-1、Ngn 3及巢蛋白mRNA表达水平明显高于高糖培养组及质粒转染组(F=35.12、12.76、8.34,P均＜0.05).结论 高糖对Pdx-1联合Ngn 3诱导BMSC向IPC分化具有促进作用.
关键词： 神经元素3 胰-十二指肠同源盒因子-1 高糖 骨髓间充质干细胞 胰岛样细胞
