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CREG蛋白参与高盐诱导的盐敏感性高血压大鼠心脏重构
目的:探讨CREG蛋白在高盐诱导的盐敏感性高血压大鼠心脏重构中的作用及是否与炎症因子S100A8/A9趋化巨噬细胞浸润存在相关性。
方法:Dahl盐敏感大鼠64只按随机数字表随机分为正盐组及高盐组,每组32只;正盐组给予0.3%氯化钠饮食,高盐组给予8%氯化钠饮食;每周监测鼠尾血压;分别于2 W、4 W、6 W、8 W时间点处死3只大鼠,Western blot检测大鼠心脏组织中CREG蛋白、S100A8蛋白、S100A9蛋白的表达;应用免疫共沉淀方法检测Dahl盐敏感大鼠心肌CREG蛋白与S1100A8蛋白、S100A9蛋白的相互作用,并且于过表达CREG的293S细胞中应用免疫共沉淀方法再次检测CREG蛋白与S1100A8蛋白、S100A9蛋白的相互作用;分别于2 W、4 W、6 W、8 W时间时间点,每组处死大鼠5只,心脏组织病理切片,免疫组化染色检测巨噬细胞(标志物为CD68)的浸润情况;8 W时间点,每组5只进行心脏组织病理切片,HE及Masson三原色法检测心脏胶原蛋白沉积及心脏重构整体形态,并且应用免疫荧光染色检测心肌Ⅰ型胶原(COLⅠ)的表达情况。 -
Dahl高血压大鼠肾小管细胞凋亡的研究
目的:通过对Dahl高血压大鼠肾脏皮质肾小管细胞凋亡及增殖的检测,探讨细胞凋亡在盐敏感性高血压大鼠肾损伤中的作用.方法:日本引进Dahl高血压大鼠(实验组为盐敏感型大鼠,对照组为盐抵抗型大鼠),5周龄时喂8%食盐饲料,尾套法每周测一次收缩期血压,取10周、11周、12周龄大鼠肾脏,多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,TUNEL法检测凋亡细胞和SP免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞,计算阳性细胞率,进行方差分析.结果:Dahl盐敏感型高血压大鼠肾脏皮质肾小管上皮细胞凋亡阳性细胞和PCNA阳性细胞显著增多,具体表现为10、11周龄凋亡和PCAN阳性细胞都增加,在第12周龄PCNA阳性细胞继续增加而凋亡细胞数量有所减少.结论:细胞凋亡在肾脏损伤的早期发挥作用,与细胞变性同时存在,可能是对损伤的一种保护性应激反应.
关键词: 盐敏感性高血压大鼠 细胞凋亡 增殖细胞核抗原(PCNA) 表达 -
血管内皮TRPP2/TRPV4通道复合体参与调节盐敏感性高血压大鼠血管内皮功能
目的:探讨肠系膜动脉内皮细胞上( MAECs)是否天然共定位TRPP2/TRPV4通道复合体,且该复合体在盐敏感高血压发展过程中的作用。方法:利用免疫沉淀技术证实MAECs形成天然TRPP2/TRPV4复合体;将盐敏感( SS)和盐抵抗( SR)大鼠分别喂养正常盐和高盐饲料,3周后检测血压和血浆醛固酮水平;利用血管开放式膜片钳,观察高盐饮食是否影响MAECs上TRPP2/TRPV4活性;利用分子生物学和膜片钳体外观察高盐和醛固酮对该复合体的影响。结果:TRPP2/TRPV4在MAECs上天然定位,并介导内皮细胞NO产生;在SS鼠中,高盐导致该通道活性和表达降低;体外实验证明高盐和醛固酮均抑制TR-PP2/TRPV4活性。结论:在盐敏感高血压发展过程中,MAECs上TRPP2/TRPV4通道活性和表达下降,其机制可能是由高盐和醛固酮协同介导。
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保肾片对食盐敏感性高血压大鼠肾损害的保护