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环维黄扬星D对糖尿病大鼠心肌细胞内游离钙的影响
目的:研究环维黄扬星D(CVB-D)对糖尿病大鼠心室肌细胞内游离钙的影响。
方法:以四氧嘧啶复制SD大鼠,体重(220±20)g糖尿病模型,随机分为8组,每组6只大鼠。在糖尿病大鼠的第6周,用酶解分离方法分离糖尿病大鼠的单个心室肌细胞,采用细胞内双波长荧光钙检测系统测定心室肌细胞内游离钙的浓度,记录给药前后糖尿病大鼠心室肌细胞内游离钙及钙瞬变,并与对照组比较。 -
一氧化氮对缺氧豚鼠心肌细胞游离钙浓度的影响
目的:探讨左旋精氨酸(L-arginine,L-arg)及NG-亚硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitric-L-arginine-methyl ester,LNAME)对缺氧豚鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)变化影响.方法:采用离体豚鼠心Langendorff法灌注,胶原酶I型分离细胞,再用荧光指示剂方法(Fure-2/AM)标记心肌[Ca2+]i变化.分为3组:对照组、L-arg组和L-NAME组.观察缺氧后心肌[Ca2+]i的变化.结果:①正常氧状态下,心肌[Ca2+]i均值为120.0±14.3 nmol/L(n=10).②缺氧状态下心肌[Ca2+]i增加与缺氧时间(程度)成正相关,相关系数r为0.99左右.③一氧化氮(NO)在缺氧条件下对心肌[Ca2+]i有影响.结论:在短期轻度缺氧条件下,NO不足使心肌[Ca2+]i增加,若能设法增加细胞内的NO含量,可以提高心肌细胞的自我保护作用.在长时间重度缺氧条件下,NO可能对心肌细胞有损伤作用.
关键词: 左旋精氨酸 NG-亚硝基-L-精氨酸甲酯 心肌细胞内游离钙 心肌缺氧 -
一氧化氮对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响
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脱氢紫堇碱对正常和低氧豚鼠心肌细胞内钙的影响
目的:探讨脱氢紫堇碱(dehydeocorydaline, DHC)及维拉帕米(verapamil,Ver)对豚鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)变化的影响.方法:采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注,用荧光指示剂方法(Fure-2/AM)标记心肌([Ca2+]i)变化.观察低氧后心肌[Ca2+]i的变化.结果:①正常氧状态心肌[Ca2+]i均值为(120.5±8.3)nmol/L(n=20);②正常氧条件下,DHC、Ver均使心肌[Ca2+]i明显下降.(3)低氧状态下,心肌[Ca2+]i增加与缺氧时间(程度)直线相关(r=0.98).④DHC 对低氧后心肌[Ca2+]i增加明显减缓.结论:DHC在正常氧、低氧条件下阻止心肌细胞内钙超载,我们认为DHC 可能提高心肌细胞的自我保护作用.
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缺氧再给氧对心肌细胞内游离钙浓度的影响
再灌注损伤是一个很复杂的病理生理现象.大量证据表明再灌注损伤或细胞死亡与细胞内的钙超载有关.再灌注损伤发生与否和轻重程度,多认为与缺血时间的长短有关.根据我们的研究,所谓再灌注损伤取决于缺血时间的问题.只是在一定缺血时限内有效,超过这个时限就不存在再灌注损伤的问题.每种动物在心肌缺血再灌注损伤中都有一个由可逆向不可逆转变的时间点,当缺血损伤达到不可逆的程度时,就无所谓再灌注损伤了.本文以成年大鼠体外分离的心肌细胞氧反常模型,动态、定量地观察了细胞内游离钙浓度的变化,探讨了大鼠心肌细胞氧反常变化的规律.
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大鼠心肌细胞内游离钙的Fura-2荧光测定
Fura-2的化学名为2-[6-双乙酸基-5-(2-双乙酸氨基)-5-甲苯氧乙氧基]-2-苯骈呋喃基-5-恶唑羧酸五钾盐.属于第二代荧光指示剂,是测定细胞内游离钙的重要试剂[1].用Ca2+荧光指示剂Fura-2检测活细胞胞浆中[Ca2+]i是十几年来兴起的一门技术,已广泛应用于细胞生理、病理的研究,已有文献报道应用于测定细胞[2]、组织块[3]等内的游离钙.应用本院的970CRT荧光分光光度计,根据本院的实验条件,本研究建立了用Fura-2双波长荧光法测定心肌细胞内游离钙的方法.
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人参皂甙Rg1对缺氧豚鼠心肌细胞游离钙浓度降低作用的研究
目的:探讨人参皂甙(ginsentosides,Gin)单体Rgl及维拉帕米(verapamil,Ver)对豚鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)变化的影响.方法:采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注,胶原酶Ⅰ型分离心肌细胞,用荧光指示剂方法(Fura-2/AM)标记心肌([Ca2+]i)变化.将心肌细胞悬液分为3组:对照组、Rgl组和Ver组.观察缺氧后心肌[Ca2+]i的变化.结果:(1)正常氧状态心肌[Ca2+]i均值为(125.4±10.3)nmol/L(n=20).(2)缺氧状态下,心肌[Ca2+]i增加与缺氧时间(程度)直线相关,相关系数r为0.98左右.(3)Rgl对缺氧后心肌[Ca2+]i增加明显延缓.结论:Rgl在缺氧条件下,使心肌[Ca2+]i明显下降,从而阻止心肌细胞内钙超载,其作用与Ver相似,我们认为Rgl具有心肌细胞的保护作用.
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Egb761对SD乳鼠心肌细胞外钙内流的影响研究
目的探讨银杏叶提取物(Egb761)对SD乳鼠心肌细胞外钙内流的影响.方法选择三天鼠龄的雄性SD乳鼠心肌,按Hoffman法行心肌细胞培养10-12天.实验分二组:对照组和实验组(Egb761分成三种浓度10-3mol、10-5mol、10-7mol).应用Fufa-2荧光探针的方法,观察各组静息状态和加氯化钾(浓度为20mmol)后的心肌细胞游离钙浓度的改变.结果(1)基础状态下,氯化钾能促进心肌细胞外钙内流,使心肌细胞内游离钙浓度增高(P《0.001);(2)Egb761对氯化钾激发的细胞外钙内流的增加有抑制作用(P《0.05).结论Egb761具有抑制SD乳鼠心肌细胞外钙内流的作用,提示Egb761可能对钙超载所致的心肌细胞损伤具有防治作用.
关键词: 银杏叶提取物(EGb761) 心肌细胞内游离钙 -
黄芪抑制去甲肾上腺素诱导大鼠心肌细胞内游离钙含量升高的作用
目的:研究黄芪对去甲肾上腺素(NE)诱导大鼠心肌细胞内游离钙[Ca2+]i含量升高的作用.方法:应用AR-CM-MIC阳离子检测系统,采用Ca2+指示剂Fura-2/AM检测培养新生大鼠单个心肌细胞内游离钙的浓度,并观察Am对NE诱导大鼠心肌细胞内[Ca2+]i升高的影响.结果:当细胞外Ca2+浓度为1.3 mmol/L时,大鼠心肌细胞[Ca2+]i为(97.11+8.21)nm0l/L,给予10-5mol/L的NE,可使大鼠心肌细胞[Ca2+]i增至(291.73±15.03)nmol/L,而经黄芪处理的大鼠心肌细胞的[Ca2+]i则由(95.98±8.14)nmol/L增至(114.28±9.29)nmol/L.结论:NE能诱导大鼠心肌细胞内游离钙含量明显升高,黄芪对心肌细胞静息[Ca2+]i无明显影响,但能抑制NE诱导大鼠心肌细胞[Ca2+]i升高.