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我国省级疾病预防控制系统实验室主要腹泻病原菌检测能力调查分析
目的 了解我国省级疾病预防控制系统实验室针对主要腹泻病原菌的检测条件和能力,为促进以实验室为基础的腹泻病监测工作提出建议.方法 以调查表的形式调查了27个省级疾病预防控制中心(CDC)实验室在细菌分离鉴定、血清分型及耐药性监测方面的实验条件、分子生物学技术能力以及实验储备情况和需求.结果 27个省级CDC实验室完成了本次凋查,针对主要腹泻病原,具备了基本实验室分离培养、生化鉴定、血清分型的能力;分离菌株耐药性检测仍以集中时段的实验为主;一些分子生物学检测和分子分型方法部分实验室仍未建立付诸应用;实验室人员不足.结论 目前我国省级CDC系统实验室能够完成常见致病菌基本的培养鉴定,但在腹泻病原菌检测方面的能力尚显不足,表现在实验室专业技术人员不足,培训缺乏.需要在基于分子生物学的快速检测、分子分型技术方面加强力量,并促进腹泻病原监测的实验室网络化发展.
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气相色谱法检测甜蜜素的注意事项
食品中甜蜜素的检测方法一般都是GB/T5009.97-2003中第一法气相色谱法做的。方法的原理是环己基氨基磺酸钠与亚硝酸钠生成环己醇,在硫酸介质中进一步生成环己醇亚硝酸酯,通过测定环己醇亚硝酸酯来进行定量。实验发现,衍生物环己醇亚硝酸酯易挥发,它的生成随温度、酸度、试剂加入顺序等实验条件的改变而改变,影响甜蜜素测定的准确度。因此,在测定过程中要严格按照国家标准中步骤进行分析测定。实验过程中一定要注意以下几点。
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蛋白组学及其在食品科学研究中应用分析
随着基因组研究不断深入,人们对生命科学的研究已经发展到分子方向,通过生物体遗传信息可研究生物体日常代谢,即蛋白质代谢活动研究——蛋白组学.蛋白组学定义 上世纪末外国生物学家提出的基因组表达全部蛋白质叫做蛋白质组,主要内容包括蛋白质、修饰体、亚型蛋白质等.在分子水平研究蛋白质功能、修饰等特性,其主要研究就是蛋白质的表达和功能.蛋白组学主要研究技术 蛋白组学核心技术为分离技术和鉴定技术.通过蛋白质信息学进行蛋白质结构功能分析,并对可能存在的功能进行预测.当前主要由3中较为常见的蛋白组学技术,即质谱鉴定技术、抗体芯片表面增强激光解析电离法检测技术、质谱联用蛋白质鉴定技术.研究中采用何种方法主要取决于实验条件及研究目的.
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二氧化氮对肺组织匀浆某些生化指标的影响
二氧化氮(NO2)是氮氧化物在空气中的主要存在形式,是城市环境污染物的重要组成部分,可诱发肺组织损伤.但致肺损伤的机理尚不十分清楚.NO2本身是自由基,可能通过脂质过氧化作用破坏肺组织细胞[1].但在动物实验,实验条件不同,结果也不一致.本实验在体外直接观察NO2对肺匀浆某些生化指标的影响.
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1-32 美他多辛的一般生殖毒性
目的研究美他多辛对大鼠是否具有生殖毒性.方法按照一般生殖毒性试验规范的要求给药,各组分别灌胃给予美他多辛0、400、800、1 600 mg/kg.结果一般毒性表现:400 mg/kg组大鼠未见明显毒性反应,800 mg/kg组个别大鼠出现后肢麻痹,1 600 mg/kg组雌雄大鼠都有后肢麻痹,消瘦,增重减慢.生殖毒性:雄性800 mg/kg组附睾精子数减少,生育率降低.1 600 mg/kg组睾/体比降低,附睾精子数减少,交配率和生育率降低.雌性800 mg/kg和1 600 mg/kg组受精率、妊娠率降低.胚胎毒性:400 mg/kg组胎鼠体重减轻,800 mg/kg和1 600 mg/kg组着床前死亡率增加,胎鼠身长、尾长、体重均减小,胸骨发育迟缓.致畸性:各组均未发现外观、内脏和骨骼畸形.结论在本实验条件下,美他多辛对SD大鼠无致畸性,对成年大鼠生殖毒性的大无作用剂量为400 mg/kg,胚胎发育毒性的无作用剂量小于400 mg/kg.
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ELISA双抗原夹心法检测艾滋病病毒抗体实验条件的优化
[目的]通过对酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗原夹心法艾滋病病毒抗体检测中实验条件的改进,在确保检测结果的前提下,探索出操作性更强的实验方法.[方法]以国际公认的实验条件设立对照组,设立不同实验条件的实验组,找出和标准对照组没有统计学差异的实验组.[结果]温度均为37℃,结合时间为50min,显色时间为20min的实验组和标准对照组总体均数无统计学差异,且消耗的总时间短.[结论]温度均为37℃,结合时间为50血n,显色时间为20min的实验组可以作为传统方法的替代方法加以推广.
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消毒剂杀菌试验的实验室间检测结果比对分析
目的 了解不同实验室间杀菌效果评价结果的差异,提高消毒实验室技术水平.方法 依据相同试验方法和条件,对不同实验室检测同一消毒剂杀菌效果进行评价与分析.结果 在国内13个有资质的实验室共同对同一种含碘消毒剂、醋酸氯己定和乙醇复方消毒剂进行杀菌效果评价,结果对有效剂量报告的符合率为61.54%.存在的问题主要是有机干扰物和标准硬水的使用、样品稀释和实验条件控制不严格.结论 国内消毒专业实验室对消毒产品检测结果偏离较大,需要加强统一培训.
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息咳胶囊中湖北贝母总生物碱含量测定方法的研究
湖北贝母为百合科贝母属多年生草本植物湖北贝母Fritillaria hupehensis Hsiao et K.C.Hsia的干燥鳞茎[1],为<中国药典>2000年版所收载,具有镇咳、平喘、祛痰之功效,其活性成分为生物碱.息咳胶囊是由湖北贝母有效部位总生物碱制成的制剂,为了全面、有效地控制其质量,作者选择了总生物碱作为测定指标.有关生物碱的定量方法近年来多采用酸性染料比色法[2,3]和HPLC-ELSD[4-6],但后者只能测定单体生物碱,而总生物碱的含量测定仍然主要依靠前者.由于该方法的准确性受实验条件的影响很大,故作者对其实验条件进行了多方面的考察,并选择了佳实验条件,为湖北贝母有效部位中间体及其制剂的质量控制提供了可靠的实验方法和理论依据.
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体外细胞培养应用于中药复方研究的进展
纵观现代医学研究史,体内(in vivo)实验和体外(in vitro)实验是不可分割的两个方面.从各自的地位来看,由于体外实验的结果终要通过体内实验来证实其价值,体内实验更为重要.然而,体外实验以其需时短、实验条件和因素易于控制,便于进行相对复杂的实验设计,可以避免体内实验的伦理学问题等优点,在现代医学的发展中发挥了极为重要的作用,而现代医学的许多重大突破源于体外实验的启迪.在中西医结合临床实践中,中药复方仍然是主要的用药方式.
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宏基因组技术研究进展
微生物支撑着地球上的物质循环和生命延续,除了自身可作为新基因资源的重要来源外,还可产生对人类有价值的活性物质.然而,传统纯培养方法严重限制了人们对微生物资源的认识和开发.一方面,随着对微生物活性产物研究的深入,微生物往往被重复培养和筛选,从传统方法来筛选新活性物质的几率不断下降.另一方面,多达 99% 的微生物在现有实验条件和技术下尚未得到纯培养,其中蕴含着大量潜能微生物和基因资源[1].
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阿尔辛蓝-荧光桃红-马休黄染色在羊水栓塞病理诊断中的应用价值
一、材料和方法从本单位1988~2001年经系统解剖和HE染色诊断为羊水栓塞的19例为阳性组,任意选3例新生儿羊水吸入性肺炎为阳性对照组,其他死因的产妇10例为阴性组,进行Alcian blue(阿尔辛蓝)-phloxin(荧光桃红)-Martius yellow(马休黄)组织化学染色,即AP染色[1],结合摸索的实验条件,延长在阿尔辛蓝液中的染色时间至20 min,在马休黄液中的染色时间至15 s,对AP染色和HE染色检验结果进行统计学χ2分析.
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单细胞凝胶电泳技术在运动医学中的应用
单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis, SCGE)又称彗星实验(comet assay),是近年来发展起来的一种在单细胞水平上检测DNA损伤与修复的新技术.SCGE实验初由Rydbery和Johanson(1978)提出,以后经Ostling和Johansont[1](1984)及Singh[2](1988)等对实验条件进行改良,使其具有简便快速、灵敏性高、重复性好、无需放射性标记等优点,目前已被广泛应用于临床药物筛选、肿瘤诊断与治疗、衰老和细胞凋亡机制的探讨以及遗传毒理学和生物监测等研究领域[3-5].
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如何利用geNorm软件筛选基因表达测定的内参基因?
答:随着实时荧光定量PCR成为检测基因表达谱的高通量、高精度的方法,基因表达分析在生物学研究中得到广泛应用.采用稳定的内参基因对反应进行标准化可以增加该方法的敏感度、重复性和动态范围,理想的内参基因在所研究的组织、细胞和实验条件下均恒定表达.管家基因是维持细胞低限度功能不可少的基因,在所有类型细胞中都表达,是广泛应用的内参基因.但是,很多研究表明管家基因在不同组织、细胞以及不同条件下表达量并非永远恒定,甚至差别很大,至今尚未发现在所有条件下均恒定表达的管家基因.因此,对特定基因表达研究中候选管家基因的表达稳定性进行评价,筛选出为稳定的管家基因作为内参基因,对保证研究结果的真实、可靠至关重要.
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电泳法检测肝和血清中醇脱氢酶同工酶
目的:建立琼脂糖凝胶电泳法检测人血清醇脱氢酶(alcoholdehydrogenase isoenzymes ADH EC 1.1.1.1)同工酶.方法:采用自制琼脂糖凝胶板,摸索实验条件,在pH 8.6,74 mmol/L巴比妥电泳缓冲系统中进行20 mA、20 min电泳,可清晰地分离出ADH同工酶三条区带.结果:检测了67例患者血清ADH总活性0.013-0.021 Kat/L,同工酶ADH Ⅰ占ADH总活性0.01-0.30,ADHⅡ占ADH总活性0.12-0.31,ADHⅢ占ADH总活性0.39-0.80.检测了10例人健康肝组织匀浆的ADH总活性为0.136-0.196Kat/L,同工酶ADH Ⅰ占总活性的0.07-0.25,同工酶ADHⅡ占总活性的0.19-0.27和同工酶ADHⅢ占总活性的0.56-0.73.结论:正常人血清中ADH酶活性很低,为0-1.8×10-3 Kat/L,其同工酶不易被检测出.而肝脏组织中含有大量ADH酶活性,当肝脏受到严重损伤时,ADH即从肝细胞内逸出,进入血液,使血清中ADH酶活性明显升高,同时通过琼脂糖电泳对其同工酶的检测可测出三条区带,帮助临床进一步了解肝细胞损伤程度,对患者预后和病程的监测具有一定的临床意义.
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心肌缺血再灌注后无复流发生的分子机制
无复流是指心外膜冠脉闭塞减轻或解除后,缺血心肌组织并没有恢复有效再灌注,微循环血流仍不能完全恢复正常的现象[1].无复流分为:(1)实验性无复流:实验条件下通过制作急性心肌缺血再灌注模型观察到的无复流.
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个体胰岛素敏感性的临床评估出路在何方--兼谈2005年美国糖尿病学会年会的相关信息
胰岛素抵抗(IR)因与致残和致死率极高的心脑血管疾病相关联而受到人们的广泛关注.内分泌、心血管学界都有人在从事IR与某些疾病关联的研究.在这类研究中人们常常要根据所研究的类型、研究对象的特点、样本大小、资金的多少及所具备的实验条件选取适合于自己情况的胰岛素敏感指数(ISI).
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胃肠多肽对人肝癌细胞生长的调控作用
近年的研究表明,部分胃肠多肽具有抗肿瘤的效应,由于其不具有细胞毒性,可提高患者带瘤生存的时间和生活质量,并已在原发性肝细胞肝癌 (HCC)细胞上发现多种胃肠多肽受体的表达.由于实验条件、实验对象不同,目前并不清楚哪些胃肠多肽可影响HCC细胞的生长.尽管少量临床研究应用生长抑素(SST)类似物奥曲肽延长了晚期肝癌患者的生存时间,但尚不明确奥曲肽是否直接抑制了HCC细胞的生长.我们通过细胞体外培养,观察7种胃肠多肽对人HCC细胞株SMMC-7721 增殖的影响,以寻求治疗肝癌的新途径.
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成人血清蛋白电泳正常参考值建立的初步探讨
目前,血清蛋白电泳已广泛应用于各临床实验室,但由于各个实验室实验条件不同和所采用的实验方法各异,可能会导致结果有差异.本实验室采用Helena EDC电泳扫描仪,对370例健康体检者血清进行了蛋白组分的检测,为我实验室建立正常参考值提供了初步依据,现总结如下.
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浅谈检验科的管理与发展
随着临床医学的发展,医疗工作对检验科的要求越来越高,加强检验科建设,完善管理体制是当前和今后医院管理工作中的一项重要任务,也关系到检验科为临床科室提供准确检验结果,科室正常运行的必备制度.因此,我们依据国家法规和我院现有的实验条件,提出一些管理方案.
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未成熟卵母细胞体外培养在助孕中的应用
多囊卵巢综合征是生育期妇女不孕的常见的内分泌代谢紊乱性疾病.本研究以多囊卵巢综合征患者作为研究对象,探讨未成熟卵母细胞体外培养的可行性及实验条件.