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颈动脉狭窄与脑缺血血流动力学变化的实验研究
缺血性脑血管病(ischemic cerebral vascular disease,ICVD)占脑卒中的75%~90%.是一种严重影响人民健康和生活质量的常见疾病.本课题是在严格控制实验条件下进行的相关动物实验,利用多普勒超声检测其血流动力学改变,探讨颈内动脉狭窄程度与脑部动脉末端血流动力学变化的相关性,并通过流式细胞术对脑细胞凋亡、坏死情况的检测予以印证,确定能够显著影响脑血供的临界颈动脉狭窄值.为临床工作进行筛查,选择干预措施,提供参考.
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非酒精性脂肪肝离体细胞模型的建立
随着人们生活水平提高,非酒精性脂肪肝( NAFL)及非酒精性脂肪性肝炎( NASH)的发病率呈逐年上升趋势[1,2],严重威胁人类健康。目前,对NAFL的研究常采用的是动物模型,但动物模型存在个体差异大,研究周期长,实验条件不易控制等不利因素。而细胞模型能较好地克服上述因素,有针对性地研究NAFL发病的细胞机制,且能进一步缩短药物干预的进程[3,4]。因此,建立NAFL体外细胞模型对研究其发病机制,为进一步防治NAFL具有重要的理论意义与广泛的实用价值。
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短程免疫方案制备抗血清的效价观察
通过一定程序注射颗粒性抗原或可溶性抗原免疫家兔,是实验室制备多克隆抗血清的常用方法,制备的抗血清可用于实验条件下病原体的诊断以及免疫检测[1].虽然依据常规免疫方案可以制备出效价高、亲和力强的抗血清,但整个常规方案耗时近1个多月,也容易受到免疫动物健康状况的影响和饲养成本的限制.本试验分别以伤寒沙门菌O901诊断菌液、伤寒沙门菌H901诊断菌液作为免疫原,在不影响抗血清特异性和保证实验必需效价的基础上,缩短免疫注射周期,对家兔进行短程快速免疫,并对该方案制备的抗血清几何平均滴度进行观察,以探讨短程快速免疫方案的实效性.
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克拉霉素片微生物检查方法验证
克拉霉素为大环内酯类抗生素,对革兰阳性菌和部分革兰阴性菌有抗菌活性,临床应用广泛.当建立药品的微生物限度检查法时,应进行方法的验证,以证明所采用的方法适合于该药品的细菌、霉菌及酵母菌数的测定及控制菌检查.按<中国药典>2005版的有关要求,通过接种代表性的阳性菌株,采用薄膜过滤对克拉霉素片反复实验,找到了消除克拉霉素片抗菌活性的佳冲洗量和实验条件,建立了微生物限度检查方法.
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人脐静脉内皮细胞的培养与鉴定
人脐静脉(Human Umbilical Vein,HUV)是培养血管内皮细胞的常用来源之一,与动物血管内皮细胞相比,人脐静脉内皮细胞(HUVEC)可使实验条件更符合人体情况,结果更具有意义;而与人动脉内皮细胞相比[1],其取材方便,操作简单,混有杂细胞少,因此,HUVEC的培养日益为广大研究者所重视.本文在诸多研究HUVEC培养经验的基础上,改进并建立了一套操作性强、成功率高、细胞获得多的人脐静脉内皮细胞培养方法.报告如下.
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小鼠腹腔巨噬细胞吞噬乳胶颗粒实验条件筛选
目的 建立和完善可靠、敏感、稳定的评价腹腔巨噬细胞吞噬功能方法.方法 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5%CO<,2>培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数.结果 随培养时间(0.5,1,2,4 h)延长,腹腔巨噬细胞吞噬乳胶颗粒的吞噬百分率增加,不同培养时间的吞噬百分率之间差异均有统计学意义(P<0.05);随小牛血清浓度(2.5%,5%,10%)和乳胶颗粒浓度(0.25‰,0.5‰,1‰,2‰)增加,腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数升高,不同浓度小牛血清和乳胶颗粒下腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数之间差异均有统计学意义(P<0.01);贴壁处理后的腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数显著高于未经贴壁处理的细胞(P<0.01);在Balb/C、C57、昆明(KM)、ICR 4种品系小鼠中,Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率显著高于其他品系小鼠(P<0.01).结论 乳胶颗粒浓度为1‰、血清浓度为2.5%~5%、细胞贴壁2 h后吞噬培养2 h,选用Balb/c小鼠为该实验的佳实验条件.
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含油食品过氧化值快速测定
过氧化值是油脂酸败敏感的指标之一,而样品的前处理,即油脂的抽提直接影响着该指标测定的准确性.为适合基层实验室的需要,本文设置了不同的实验条件,探讨分析油脂抽提过程中可能影响的因素,提出了一个不用减压抽提设备,又能达到既快速简便,又准确可靠的方法,以满足基层检验室日常监测的需要.现报告如下.
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毛细管色谱法分析乙酸乙酯、已酸乙酯、乳酸乙酯含量
酯类化合物是具有芳香气味的挥发性化合物,是蒸馏酒、配制酒的香味成分的主要组成部分,其中主要组分乙酸乙酯、已酸乙酯、乳酸乙酯含量之和占总酯的80%~90%以上.气相色谱法是分析蒸馏酒、配制酒中香味成分的理想的分析手段,已列入国家标准[1].近年来,多采用毛细管柱气相色谱技术分析酒中的微量成分[2,3],由于仪器设备、实验条件等不同,选用不同的固定液和内标物质.本文选用柱效高、分离能力强、灵敏度高的FFAP毛细管柱,以乙酸丁酯为内标分析酒中的三大酯.现介绍如下.
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乳与乳制品中牛磺酸的吸光光度法测定
牛磺酸,化学名为2-氨基乙磺酸,是有机体内存在的一种具有多种生理功能的含硫氨基酸,大量用作营养保健品和食品添加剂.目前,牛磺酸测定多采用高压液相色谱法、氨基酸测定仪和薄层色谱法[1],但仪器检测投资大,分析费时繁琐.本文依据氨基酸显色原理,选用可见分光光度法测定乳品中牛磺酸,并进一步探索佳线性范围、显色剂用量及加热反应时间等实验条件,建立了分光光度法测定乳与乳制品中牛磺酸的佳实验条件.结果报告如下.
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饮料中3种甜味添加剂液相色谱法同时测定
目前,我国市场上销售的饮料中阿斯巴甜、乙酰磺胺酸钾和糖精钠是常用的甜味添加剂.我国对糖精钠、乙酰磺胺酸钾使用标准的大使用量分别为0.15,0.3g/kg.而对于阿斯巴甜使用标准,美国食品药物管理局每日允许摄取量为50mg/(kg*bw),欧洲则20mg/(kg*bw),联合国粮农组织和世界卫生组织联合食品添加剂专家委员会(JECFA)每日允许摄取量为40mg/(kg*bw).我国现有GB/T5009.28-2003和GB/T5009.140-2003方法规定了高效液相色谱法和薄层色谱法测定食品中糖精钠或乙酰磺胺酸钾,为同时测定阿斯巴甜、乙酰磺胺酸钾和糖精钠,笔者在查阅文献后,建立了一种可以同时测定饮料中糖精钠、乙酰磺胺酸钾、阿斯巴甜的方法,并对实验条件进行了优化,从而使其检出限、线性范围、精密度与准确度达到了分析的要求.
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咔唑比色法测定玉米种皮中的果胶含量
果胶是半乳糖醛酸的聚合多糖,对其测定的方法主要有重量法、容量法和比色法[1],其中比色法是通过测定样品中半乳糖醛酸的含量,再换算成果胶的含量.本实验对比色法进行优化,确定佳实验条件.
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微波溶样原子光谱法测定食品中元素
为了建立食品及食品材料多元素的准确测定方法,采用MLS-1200MG微波消解系统,对食品、食品材料彻底消解,其方法的准确度、精密度结果令人满意.该方法提供了较全面的光谱法测定食品中元素的分析条件、方法,通过优化实验条件提高了测定的灵敏度、检出限、方法的准确度.报告如下.
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离子色谱法测定矿泉水中的溴和碘
以往测定水中碘和溴的方法有化学法、分光光度法等.随着分析仪器的发展,近年又出现了发射光谱法.化学法和分光光谱法分析步骤繁琐,实验条件不易控制,影响结果的准确度和精密度,而发射光谱法价格昂贵,不易普及.离子色谱技术近年来已虽日趋完善,对阴离子的分析改变了经典化学法测定阴离于的现状.本文对离子色谱测定矿泉水中碘和溴方法进行了实验,结果表明各种分析指标均能满足分析的要求.
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食品中甲醛乙酰丙酮法检测佳实验条件筛选
甲醛(Formaldehyde)是公认的致癌物质,工业用漂白剂-甲醛次硫酸氢钠(吊白块)在弱酸或弱碱条件下可分解成甲醛和次硫酸氢钠,具有肾毒性,因此,国家严禁使用于食品中[1].由于其具有防腐和改善食品感官性状的作用,近年来常发现被使用于米、面、水产品等食品中[2].目前,食品中甲醛含量的检测各地多使用国家推荐的乙酰丙酮法进行,再推算出吊白块含量.本文结合文献及本实验室前期研究工作[3],寻找佳实验条件,为建立食品中甲醛/吊白块的检测标准方法提供依据.
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葡萄酒中总糖测定方法探讨
葡萄酒国标定义为以新鲜葡萄或葡萄汁为原料,经发酵酿制而成[1].葡萄酒中总糖的检测方法有高效液相色谱法、直接滴定法和间接碘量法[2].通常实验室的常规检测方法均采用直接滴定法,该方法对样品中总糖含量、滴定操作条件、加热温度、滴定速度等都有一定要求,且存在操作人员操作熟炼与否的差异,尤其由于干红葡萄酒酒体颜色为深红色,含糖量低微,滴定时样品溶液消耗量大,滴定终点很难判定,往往影响测定结果.因此,建立一种准确、简便的比色测定方法很有必要.本文依据3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热,可被还原成棕红色氨基化合物的原理[3],采用可见分光光度法测定葡萄酒中总糖含量.并对大吸收峰、显色剂、反应时间等条件进行探索,确立了3,5-二硝基水杨酸比色法测定葡萄酒中总糖的佳实验条件.
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薄层色谱法快速测定饮料中的几种添加剂
在市场上的固体和液体饮料中,许多生产厂家为了防止其中成分变质和腐败,使用一些防腐剂如苯甲酸和山梨酸等;为了增加甜度,有时也使用一些甜味剂如糖精等.这些添加剂多数存在一定的毒性[1].在食品卫生检查中,为了判断食品中是否含有这些添加剂,通常采用薄层分析法[2].本文通过对这几种添加剂的处理和薄层色谱分析,提供在此实验条件下的有效检测限,供广大分析人员参考.
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微分电位溶出法测定发锌含量
对于锌的测定,目前普遍采用双硫腙比色法和原子吸收分光光度法.前者灵敏度低,后者实验条件较高,仪器昂贵.近几年应用溶出分析法,测定微量元素已有报道.笔者根据有关资料.从1999年7月试用溶出分析法对发锌进行测定,灵敏度高,干扰少,操作简便快速.现报告如下.
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改良的动力学光度法测定尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶是细胞溶酶体酶之一.研究表明,人体液(血液、尿液)中NAG活力的大小可用作多种疾病的有效辅助诊断指标,检测体液中NAG活力具有重要的临床价值.本文通过大量实验,考察了不同实验条件对CNP-NAG的增溶能力,建立了连续监测法测定CNP-NAG的新方法.现报谱加下.
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蛙皮素降体温作用的研究进展
上世纪70年代在蛙皮素被提取、分离之后,发现了其具有降体温的作用,研究者改变各种实验条件,通过ICV、神经核团微量注射,细胞外记录PO/AH区温度敏感神经元电活动等方法,证实了蛙皮素有体温调节作用,并从细胞分子水平探讨了蛙皮素通过受体及其受体亚型发挥降体温作用的可能机制.
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显微数码互动系统在组织学实验教学中的应用价值
人体组织学与胚胎学是一门形态学科,其中的实验教学是其理论知识的验证和补充,是教学的重要组成部分.传统的实验教学由于受实验条件的限制,不能很好地发挥实验课的综合效应.随着教育改革的不断深化,教学手段的不断改进,教学模式和方法也在发生着相应变化,如形象化教学法、目标教学法、趣味教学法、多媒体教学法、项目导师制教学法、学案导学法等[1].我院于2006年在形态学实验中心建立了2个Motic显微数码互动实验室(山东易创),经过几年时间的使用,对组织学实验教学起到了积极的推动作用,显示该系统相对传统实验课教学具有独特的优势,收到了很好的教学效果,体现出该系统具有良好的使用价值.