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不同实验条件对穿梭箱系统研究大、小鼠学习记忆行为学的影响
目的 研究大、小鼠穿梭箱实验佳训练条件,为神经系统相关实验研究提供参考.方法 利用大、小鼠穿梭实验视频分析系统,考察不同实验条件对大、小鼠学习记忆形成及保持的影响.结果 条件刺激时长为5 s时,KM鼠的单纯光刺激组学习成绩明显好于声光联合刺激组;单纯给予光刺激时,KM鼠条件刺激时长为10 s组的成绩明显好于5 s组;当给予声光联合刺激,刺激时长为10 s时,Wistar大鼠白天训练组与夜晚训练组的学习成绩并没有明显差异,但Wistar大鼠的学习成绩明显好于SD大鼠.训练达标后,KM鼠记忆至少能保持21 d;Wistar大鼠记忆至少保持28 d.结论 大小鼠学习记忆的形成与实验动物的选择及实验条件的设置密切相关.适当延长条件刺激时间有利于KM鼠条件反射的形成;训练时辰对Wistar大鼠的记忆获得没有影响;无论是KM小鼠,还是Wistar大鼠,训练达标后,其记忆均能保持较长一段时间.
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双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原的研究
目的建立双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原(Cag).方法采用两株抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,应用双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫CAg,并摸索该法的佳实验条件.对感染大鼠、小鼠、疑似和确诊广州管圆线虫病病例血清进行检测,评价方法的敏感性;对日本血吸虫、肺吸虫、旋毛虫、囊虫病人血清进行交叉反应试验,评价方法的特异性.结果 10μg/ml单抗包被,酶标记单抗1∶1 600稀释为佳工作浓度.利用该法检测不同血清广州管圆线虫循环抗原的敏感性为84.2%~87.2%,特异性为100%.结论建立的双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原具有敏感性高、特异性强和经济、简便易行等优点.
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基因重组抗原在旋毛虫病免疫诊断及免疫预防方面的研究
旋毛虫病是一种严重的人兽共患寄生虫病.若不及时诊断和治疗,患者死亡率可高达3%~30%,但本病目前尚无满意的诊断和预防方法.由于目前用于旋毛虫病免疫诊断的抗原多为虫体粗抗原,因其抗原成份复杂,常和其它寄生虫病发生交叉反应而出现假阳性;旋毛虫不能在体外完成完整的生活史,一般采用人工感染动物的方法获得虫体,然后制备抗原,这种经典方法大的弊端在于实验条件难以统一,制备抗原难以标准化,从而导致不同实验室、不同批次的抗原质量不同.
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恙虫病立克次体蛋白抗原及其编码基因研究进展
恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi)是恙虫病(Scrub typhus)的病原体,专性活细胞内寄生,革兰氏阴性,恙螨是其传播媒介。在分类地位上,恙虫病立克次体原属于立克次体科立克次体属,但由于其在许多生物学和遗传特性方面不同与其他立克次体,1995年将其另立一属一东方体属(Orientia),称为恙虫病东方体(Orientiatsutsugamushi)[1]。近十多年来,新的技术方法尤其分子生物学方法不断引入恙虫病立克次体的研究,使病原学研究更加系统深入广泛。现对其蛋白抗原与其编码基因的研究综述如下。1 恙虫病立克次体的多肽组成 纯化的恙虫病立克次体裂解物或蛋白抗原或多肽经SDS-PAGE电泳,发现有30多条带[2]。其中主要的多肽为56kD,58kD,47kD,70kD。由于各实验室实验条件的不一致,使得恙虫病立克次体多肽的命名也较为混乱,同一多肽有不同的名称。例如58kD(Hanson称为63kD,Tamura称其为60kD),56kD(Hanson称为60kD),47kD(Hanson称为50kD)。恙虫病立克次体各株SDS-PAGE电泳图谱是相似的,但某些多肽的分子量有细微的差别。如Kato株56kD多肽比其他株47kD(Gilliam,Karp,Shimokoshi)的分子量大。这与Melinda F.Moree等的发现是一致的[3](见表1)。菌体蛋白的迁移还受温度,2-巯基乙醇等样品制备条件的影响[4,3]。同一多肽分子,不同制备条件下会以不同的状态存在(见表2)。由表2可见,56kD蛋白是一个热修饰蛋白,其存在状态依温度不同而异。
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不同固定方法在阴道毛滴虫IFA中的实验研究
滴虫性阴道炎是国内外广泛流行的性传播疾病之一,临床上传统的生理盐水涂片法因其检出率较低、易漏诊而逐渐被其它先进方法所取代.目前,IFA为研究阴道毛滴虫的重要方法之一,有望成为诊断滴虫性阴道炎和流行病学调查滴虫感染的重要手段之一.本文选用不同的固定方法(福尔马林、甲醇、乙醇、丙酮和自然干燥)固定阴道毛滴虫,确定IFA试验的佳固定方法.同时对IFA实验条件进行研究.1 材料和方法
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土霉素片含量的快速测定法
土霉素片作为一种广谱抗生素药,在临床上应用广泛,至今仍为基层常用药物之一.其含量测定部颁标准规定为微生物检定法[1],但要求实验条件高,不利于基层单位开展和适应快速测定的要求.本文根据土霉素具有旋光性的特点[2],采用旋光法对土霉素片进行含量测定,并与部颁法进行比较,结果满意.
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ELISA测定血清卵巢癌抗原CA125
CA125是Bast[1]等人用卵巢癌细胞株OVCA433免疫小鼠脾细胞并杂交获得单克隆抗体,该抗体可识别卵巢癌相关抗原,且作为卵巢癌的敏感性标志物已经广泛应用于临床.目前CA125测定大多数采用放免法(RIA),但其受药盒保存时间短,实验条件要求高等限制,不易在基层推广及使用.近年来应用ELISA法检测血清的CA125的文献国外已有报道[2],本文应用ELISA法对322例妇科患者血清CA125进行了测定,现报告如下.
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重视精神神经专科医院实验室的作用
在国内同级别的医院当中,精神神经专科医院的临床实验室,无论是实验条件、业务量、服务范围等各个方面都很难与综合性医院的临床实验室相比.精神神经专科医院的临床实验室的发展与同等级的综合性医院临床实验室之间硬件差距越来越大.在一些人的印象中,精神神经专科医院实验室检查结果,对于临床诊断的确立、治疗效果的判断中的作用,似乎远不如综合性医院重要.
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冷凝集试验方法学探讨
冷凝集试验对冷凝集素增高疾病的诊断不失为简单易行的试验方法,但由于一些文献对其实验条件,要求不够确切,从而导致实验结果出现差异.为此,我们对该试验的方法学进行了探讨.
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水中微量锰动力学法测定条件的正交设计选择
[目的]建立测定水中微量锰的催化动力学光度法.[方法]选择Mn2+测定的温度、时间、缓冲液量和高碘酸钾量为影响因素,分别设置不同水平.利用正交设计模型选择佳组合的实验条件.[结果]检测的佳组合条件为:加缓冲液3.0ml,高碘酸钾溶液1.5ml,实验温度40℃时反应15min.线性相关系数为0.998.方法精密度的变异系数为11.3%,回收率为98.2%~103.5%.[结论]建立测定水中微量锰的方法、线性、精密度和回收率令人满意.方法可行.
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催化动力学光度法测定茶叶中微量铅
铅是一种严重影响人体健康的元素,水质及各类食品国家标准都有较严格的限量.目前有关铅的测定方法研究的较多的有原子吸收光谱法、原子荧光法、分光光度法、电化学分析方法等,这些方法各有优缺点.催化动力学分析方法在痕量分析中的应用虽日益广泛,但用于测定铅的报道不多,灵敏度也不高,参照有关资料[1~5]采用正交设计,优化实验条件,应用表面活化剂溴化十六烷基三甲铵(CTMAB)对结晶紫(CV)在碱性介质中褪色反应的催化作用和铅对此催化反应的阻抑效应,建立了高灵敏测定铅的新方法,该方法灵敏度高,选择性好,简单、快速、重现性好,用此法对茶叶中铅进行测定结果令人满意.
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肠溶血素实验与产志贺氏毒素大肠菌其他检测方法的对比研究
目前应用的免疫磁珠分离法(IMS)、科玛嘉O157色选择琼脂和山梨醇麦康凯琼脂,均为O157特异性选择性试剂和方法.肠溶血素为已知产志贺氏毒素大肠菌(STEC)相关毒性因子之一[1] ,检测菌株肠溶血素的洗绵羊血琼脂平板,可筛查O157 STEC,也可筛查非O157血清型STEC大肠菌,如O26、O103、O111、O145[2],且不需特殊实验条件,适合一般实验室使用.为证实该法在河南省的使用价值,于2000年应用该方法检测了河南省在O157大肠菌疫区分离到的疑似O157大肠菌株142株.
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食品菌落总数检测培养24h和48h比较试验
为观察食品中细菌在实验条件下的繁殖动态,1998年在食品卫生监督监测工作中,选择5类食品,分别在37℃培养24h和48h,计数并比较其细菌菌落总数.
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论城市基层卫生防疫站检验体制改革
预防医学检验水平是衡量疾病控制和卫生监督水平的一个重要标志,在城市基层卫生防疫站的疾病预防、控制和卫生监督中起着重要作用.,由于受客观实验条件的制约,基层的检验科室只能做一些常规检验,不能适应形势发展对预防医学检验工作的需要.
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浅析低本底α、β计数器的质量控制
质量控制是检验仪器设备有效性和可靠性的重要手段,实验室成员掌握正确、有效、便捷的质量控制方法,对于保证数据的可靠性和有效性,提高检测质量,降低出错风险,增强实验员信心都有很大帮助.低本底α、β计数器是测量各种介质放射性活度的重要仪器,广泛应用于总α、总β、锶-90和铯- 137的分析测试,是实验室应用频率高的仪器之一,因此通过质量控制来检验其是否符合运行要求,是实验室必须要做的工作[1].为了更好的做好低本底α、β计数器的质量控制,我们根据不同的实验条件,从不同角度归结了几个方法,在实际应用中取得了很好的效果.
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MCM评估LDH活性浓度不确定度
不确定度是基于已知的信息表征赋予被测量量值分散性的非负参数[1]。所有校准或检测实验室都必须建立且应用不确定度评定程序以确保分析结果的质量[2]。乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase, LDH)活性浓度具有方法依赖性,其活性浓度的大小依赖于实验条件,包括pH、缓冲液性质、温度、激活剂、抑制剂、底物特性及浓度等[3]。因此,在LDH活性浓度不确定度评估中,除基本测量模型中的影响因素外,还应考虑实验条件的影响。
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OlympusPK7300检测血型的影响因素和对策
2010年3月,我们购置了OlympusPK7300检测无偿献血者血液血型,经过与U型微板法实验比较,OlympusPK7300作为自动化的血型检测仪器与其它具有检测结果准确性高、易于使用等特点检测具有准确、方便、快捷、省力、省试剂、操作标准化等优点[1],很适合大工作量的血站血型检测工作.但在检测中,发现一些因素影响血型结果正确判读,须经试管法手工操作或经血型鉴定室型,人为改动微机判读结果,此种情况大大干扰了全自动血型仪的正常运行,也容易留下手工改动错误的隐患[2].针对这些影响因素,我们采取了相应的对策,优化了实验条件,.达到了正确检测血型的目的,保证了血液质量.
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血液中氯氮平浓度的测定方法及临床参考范围
氯氮平作为一种非经典抗精神病药物,对阳性症状、阴性症状和认知障碍均有较好的效果.目前,临床上己广泛应用氯氮平治疗精神分裂症,对氯氮平血液浓度的测定法,国外报道的有放射免疫法和气相色谱法;根据我院现有仪器设备及其它实验条件,建立了自己的测定方法,并应用于临床血浓度检测,现将测定结果报告如下:
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PT APTT TT FIB D-二聚体参考值的制定
在卫生部废除原有的出凝血时间测定方法后,血栓与止血栓检验这门新兴边缘学科迅猛发展起来,如今PT、APTT、TT、FIB、D-二聚体等已广泛应用于临床之中.但多数实验室没有对本地实验条件、实验人群进行参考值调查,只是把教科书或说明书上的参考值加以应用,这样不能准确反映本地区人群的真实凝血机制.为此,我科进行了PT、APTT、TT、FIB、D-二聚体参考值的制定现报告如下:
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胸腺素注射液活力实验的探讨
胸腺素注射液系新鲜健康猪胸腺提得的蛋白质类激素(分子量小于13500),主要用于细胞免疫缺陷及细胞免疫功能失调所引起的疾病.其活力测定原理为:T淋巴细胞表面具有绵羊红血球(SRBC)受体,把分离的T淋巴细胞与SRBC混合.在一定条件下,能与SRBC结合形成玫瑰花样的花环,取名为E玫瑰花环试验(erythrocyte raesttes assay),E玫瑰花环试验根据不同的实验条件可分为:总花环试验(Et-RFC);活性花环试验(Ea-RFC);稳定性花环试验(Eg-RFC)等.胸腺素注射液活力测定系采用Et-RFC试验方法,将一定量的胸腺素注射液加入其中,可明显提高Et-RFC的形成率,测得的E花环的百分率和绝对值数减去空白,即是被检胸腺素注射液的活力.