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  • 合成肽技术用于流感病毒快速免疫诊断的分析

    作者:胡孔新

    高致病性禽流感病毒感染人类病例发现后,因其大规模危害性和病毒高度变异性决定了对流感病毒的研究必须不断加强;也决定了针对流感病毒这类高变异病毒的识别诊断技术研究必须是动态的、灵活的和快速反应型,才能符合当前新发传染病不断出现的诊断需要.合成肽技术的简便易行使之成为能够针对流感病毒变异作出快速反应,并迅速建立有效的快速检测方法的首选技术平台.为此,结合合成肽技术发展的特点,就其针对不同亚型流感病毒的病原学和血清学精确诊断优势作一综述.

  • 迈瑞竞展创新魅力,闪耀70届CMEF

    作者:

    在第70届CMEF展会上,一贯以自主创新为标志的迈瑞,隆重展出C L-2000i全自动化学发光免疫分析系统及其生化免疫联机系统、“1 Solution”解决方案、A7麻醉工作站,以及量身定制的“灵之瑞”数字化医用X射线摄影系统、Z6便携彩超等明星产品,让观众再次领略到迈瑞科技的魅力。
      生化免疫开创新时代,血球级联承启新未来
      作为迈瑞今年的新秀产品C L-2000i全自动化学发光免疫分析系统,及其与 BS-2000M模块化组合的OmniLab免疫生化血清工作站,开创了中国IVD领域生化免疫组合的新时代。C L-2000i拥有完全自主知识产权,它的酶促化学发光是目前免疫诊断中灵敏的化学发光体系之一,其核心性能达到了国际同类产品先进水平。C L-2000i 与B S-2000M高速生化分析系统强强组合构成的OmniLab免疫生化血清工作站,可用一管血完成生化与免疫分析实验,极大地提高了样本的处理速度和实验室的工作效率,为临床带来项目齐全、准确、快速的检测。

  • 结核分枝杆菌的临床和实验室诊断

    作者:郑惠文;赵雁林

    结核病是危及我国人民健康的重大传染病之一,由于临床表现不典型,加之潜伏性结核感染以及结核耐药问题,导致我国结核病疫情防控形势依然严峻.对结核病及时准确的早期诊断是降低结核病发病率的有效措施.近年来,随着生物技术、分子生物学和免疫学的快速发展,极大地缩短了细菌学检查和结核菌药敏试验的时间,在此,阐述结核分枝杆菌的临床和实验室诊断新研究进展,以提高临床诊断的敏感度和特异度,以更大范围地确定统一的诊断标准.

  • 疟疾快速诊断试剂卡检测恶性疟原虫的应用评价

    作者:杨永昌;王北宁;靳淑玲

    疟疾是由热带、亚热带的一种蚊叮咬传播疟原虫而引起的,以寒战、高热、大汗为特点.在亚洲和非洲地区疟疾仍然是威胁和危害人们健康为严重的寄生虫疾病之一[1].目前,全球仍有1.2亿疟疾患者,带虫者约3亿,非洲每年还有百万儿童死于疟疾[2].

  • 检测日本血吸虫循环抗原的压电免疫传感器中抗体的纯化与固定

    作者:汪世平;温志立;吴朝阳;曾宪芳;沈国励

    采用饱和硫酸铵沉淀法及凝胶过滤法从感染兔血清(InRS)和免疫兔血清(ImRS)中纯化出IgG抗体,分别经过SDS-PAGE鉴定其纯度及对流免疫试验、免疫双扩散试验鉴定其活性和效价,以便制成一种新型的液相压电免疫传感器,用于检测兔与病人血清中的日本血吸虫循环抗原(SjCAg).初步应用该法检测了不同感染度的兔血清,发现频移值变化在一定范围内与感染度成正比.

  • 水蛭可溶性抗原诊断日本血吸虫病的初步研究

    作者:秦志强;曾庆仁;易新元;李中杰;曾宪芳

    目的探讨水蛭可溶性抗原(LSA)用于诊断日本血吸虫病的可能性. 方法首先用Western blot对LSA与日本血吸虫病患者血清的交叉反应性进行分析,进而对LSA-ELISA用于诊断慢性血吸虫病的效果作出评价. 结果经SDS-PAGE及Western blot技术分析的结果表明,LSA的主要蛋白组分区带为8条,其中分子质量为116~118、72、45和31 ku蛋白组分可被日本血吸虫病患者血清所识别;用LSA-ELISA检测慢性血吸虫患者血清85份,阳性检出率为90.59%(77/85)检测正常人血清87份和其它3种寄生虫病患者血清56份,假阳性率分别为4.60%(4/87)和1.79%(1/56).与SEA-ELISA法比较,两者敏感性和特异性差异无显著性(P>0.05). 结论日本血吸虫病患者血清中存在较多的抗LSA抗体;用LSA检测慢性血吸虫病显示出较好的敏感性和特异性,因而水蛭是一种值得进一步研究的血吸虫异源抗原.

  • 重组刚地弓形虫微线料体蛋白MIC1O的制备与特性分析

    作者:周伟;宋丽君;沈双;殷旭仁;许永良;刘茜;余传信

    目的 制备重组刚地弓形虫微线体蛋白10(MIC10),并对其免疫学特性进行分析. 方法 利用逆转录PCR(RT-PCR)技术从弓形虫总RNA中反转录制备第一链cDNA,再利用特异性引物从cDNA中扩增出编码MIC10的基因片段,构建重组表达质粒pET28a-MIC10,转化入大肠埃希菌BL21(DE3)后用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,通过镍螯合亲和层析法纯化重组MIC10蛋白.用纯化的重组蛋白免疫家兔,制备抗MIC10多克隆抗体,采用Western blot分析重组MIC10蛋白的免疫学特性. 结果 采用RT-PCR法从弓形虫cDNA中反转录扩增到长度约为416bp的特异性DNA,基因序列分析证实为编码MIC10的基因片段;制备的重组表达质粒pET28a-MIC10转化大肠埃希菌BL21(DE3)后经IPTG诱导,能表达重组MIC10蛋白;用纯化的重组MIC10蛋白免疫家兔,血清抗体效价达到1∶200 000以上.Western blot分析显示该抗体能识别弓形虫排泄分泌抗原中的天然MIC10分子而不识别弓形虫成虫抗原,证明MIC10为外分泌蛋白. 结论 制备了具有天然免疫原性的重组弓形虫MIC10蛋白,并证明该蛋白为外分泌蛋白.

  • 日本血吸虫热休克蛋白70(Sj HSP70)的抗体反应特征及免疫诊断价值

    作者:高玒;余传信;宋丽君;王玠;殷旭仁;沈双;姚媛;许永良;杨静

    目的 制备重组日本血吸虫中国大陆株热休克蛋白[rSj HSP70(Grp78)],检测其抗体反应特征及用于血吸虫病免疫诊断的价值.方法 以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板逆转录合成cDNA,采用基因特异性引物,通过PCR技术扩增编码Sj HSP70(Grp78)成熟肽的基因片段,并将该片段插入到表达质粒pET28a(+)中,构建表达质粒HSP70(Grp78)-pET28a.将重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后采用镍亲和层析法制备纯化的可溶性rSj HSP70(Grp78).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blot检测rSj HSP70(Grp78)的抗体反应特异性及抗rSj HSP70(Grp78) IgG在血吸虫感染小鼠血清中动态变化,以分析其早期诊断与疗效考核价值,并比较rSj HSP70(Grp78)-ELISA与SEA-ELISA检测血吸虫感染者血清抗体IgG的敏感性与特异性.结果 编码Sj SP70(Grp78)成熟肽基因片段克隆成功,并获得纯化的分子质量单位约69 ku的重组表达Sj HSP70 (Grp78)蛋白.Western blot显示Sj HSP70(Grp78)蛋白能被日本血吸虫感染的小鼠及人血清识别,但不与华支睾吸虫病和卫氏并殖吸虫病患者血清及健康人、鼠血清反应.感染小鼠血清抗Sj HSP70(Grp78) IgG水平与血吸虫感染度呈正相关,并随着感染时间延长呈增强趋势,在感染后16~18周达到峰值,随后开始回调,但始终维持在较高水平.治疗组小鼠经药物治疗后第2周(感染后第8周),体内抗体水平迅速上升并达到高峰,经过短暂下降后再次上升,出现第二个高峰,随后逐渐回调,至治疗16周(感染后第22周),部分小鼠抗体水平已接近阴性阈值.部分个体在血吸虫感染后1周即可检测到血清抗rSj HSP70(Grp78) IgG.分别以rSj HSP70(Grp78)和SEA血吸虫、华支睾吸虫及卫氏并殖吸虫感染者血清及健康人血清,敏感性分别为82.9%和95.7%,特异性分别为94.3%和85.7%,与健康人血清的交叉反应率分别为0和16.67%,与华支睾吸虫感染者血清的交叉反应率分别为5.7%和14.29%;与卫氏并殖吸虫感染者血清的交叉反应率分别为5%和65%.结论 Sj HSP70 (Grp78)具有高度的抗原特异性,以此为抗原采用ELISA检测抗Sj HSP70(Grp78) IgG具有日本血吸虫病辅助诊断价值,并具有一定的早期诊断与疗效考核潜能.

  • 胶体染料试纸条免疫诊断试剂盒诊断血吸虫病的现场应用研究

    作者:梁幼生;朱荫昌;宁安;戴建荣;何伟;杨小红;徐明;熊玉霞;高祖禄;胡启龙

    目的 进一步评价胶体染料试纸条免疫诊断试剂盒(DDIA)诊断血吸虫病 的现场应用价值。 方法 在非传播季节,用Kato-Katz 3片法现场筛选 粪 阳病人,在吡喹酮治疗前及治疗后2和4个月分别用DDIA,DGS-COPT和SEA-ELISA试剂盒做 血检,Kata-Katz法做粪检;比较3种试剂盒治前阳性检出率和治后阳性率的变化。  结果 治前DDIA、DGS-COPT和SEA-ELISA阳性率分别为96.69%、90.08%和98.36 %,DDIA与SEA-ELISA比较差异无显著性(χ2=1.46,P>0.05),与DGS-COPT比较差 异明显(χ2=4.28,P<0.05);治愈后2和4个月3种试剂盒阴转率均较低;30例健康人 DDIA均为阴性。 结论 DDIA诊断试剂盒具有较高的敏感性和特异性,方 法快速、简便,适于血吸虫病现场大规模筛查。

  • 抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究

    作者:朱荫昌;管晓虹;杨小红;仇镇宁;余传信;何伟;梁幼生;殷旭仁

    为探讨抗重组血吸虫磷酸丙糖异构酶(rSjCTPI)的单克隆抗体检测血吸虫循环酶抗原在血吸虫病免疫诊断和疗效考核中的价值。制备日本血吸虫rSjCTPI表达蛋白,以此重组蛋白免疫小鼠,筛选出高效价的抗rSjCTPI单抗,建立以纯化的抗血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的多克隆抗体(IgG)为捕捉系统,以酶标的抗rSjCTPI单抗为检测系统的酶联免疫吸附试验(P-M-ELISA)法检测血吸虫病人等血清。并对该法的敏感性、特异性、交叉反应以及疗效考核与常规的SEA-ELISA比较。结果获得了一株抗rSjCTPI的单克隆抗体,其抗体同型为IgG1。P-M-ELISA检测急性、慢性血吸虫病人、健康人以及华枝睾吸虫病人、肺吸虫病人血清的阳性率分别为100%、91.7%、 0、0和0。而SEA-ELTSA为100%、98.3%、6. 69%、10%和20%。P-M-ELISA法对30例同批血吸虫病人治疗前的阳性率和治愈后4个月的阴转率分别为100%和30%;而SEA-ELTSA分别为100%和10%。结果表明,应用抗rSjCTPI单抗检测血吸虫病人循环抗原的P-M-ELISA法具有较高的敏感性和特异性,并有一定的疗效考核价值。

  • 华支睾吸虫组织蛋白酶Cathepsin L1 样基因全长序列的克隆和生物信息学分析

    作者:胡旭初;李艳文;徐劲;胡凤玉;赵俊红;余新炳

    目的 预测华支睾吸虫全长cDNA质粒文库中cs002d09号EST序列的结构和功能特征及编码蛋白的应用前景. 方法 利用NCBI和ExPaSy等生物信息学网站在线分析工具和Vector NTI suite及PcGene等软件包,分析华支睾吸虫全长cDNA质粒文库中cs002d09号EST序列及其编码蛋白的理化性质、结构与功能特征. 结果 BLASTx分析该EST序列是组织蛋白酶Cathepsin L1的同源基因,全序列长为1 458 bp,包含完整的编码区80~1 191,编码371个氨基酸,前18个氨基酸是分泌信号肽, 蛋白的理化性质较稳定.该蛋白有2个空间构象相对独立功能域:N端的抑制功能域和C端的活性功能域,抑制功能域含有3个线性B细胞抗原表位,同源性较低;C端活性功能域同源性较高, Cys177, His318和Asn338组成催化中心,位于底物结合裂缝的底部. 结论 华支睾吸虫Cathepsin L1基因与多个物种的Cathepsin L1基因同源,编码蛋白可能是重要的虫体分泌排泄抗原成分,在华支睾吸虫病的免疫诊断和疫苗研究方面有较好的应用前景.

  • 日本血吸虫果糖二磷酸醛缩酶抗体反应模式及诊断价值的研究

    作者:王玠;余传信;肖迪;赵飞;殷旭仁;宋丽君;沈双;高玒;张建中

    目的 观察血吸虫感染家兔体内抗日本血吸虫中国大陆株果糖二磷酸醛缩酶(Sj FBA)抗体反应的动态变化,评价检测抗Sj FBA抗体IgG用于血吸虫现症感染的诊断与疗效考核价值. 方法 采用RT-PCR方法从日本血吸虫中国大陆株cDNA中扩增出编码Sj FBA的开放阅读框基因片段,然后亚克隆到表达质粒pET28a(+)中,构建重组表达质粒Sj FBA-pET28a.将重组表达质粒转化至大肠埃希菌BL21 (DE3)中,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,经镍螯合胶亲和层析的方法纯化重组Sj FBA蛋白.用日本血吸虫中国大陆株尾蚴感染日本大白兔,6周后用吡喹酮与青蒿琥酯进行治疗,收集感染前和感染后2、4、6周及治疗后2、4、6、8、10、12、14、16周的血样.以重组Sj FBA为包被抗原,建立检测抗Sj FBA抗体IgG的酶联免疫吸附试验方法(rSj FBA-ELISA),用于检测家兔不同感染阶段血清抗Sj FBA抗体反应模式.分别用5、10、15和20条日本血吸虫中国大陆株尾蚴感染小鼠,收集感染后35d的小鼠血清,采用rSj FBA-ELISA检测抗Sj FBA抗体IgG并观察抗Sj FBA抗体水平与感染度的关系.用rSj FBA-ELISA分别检测血吸虫病患者血清、健康人血清、华支睾吸虫病和卫氏并殖吸虫病患者血清,观察该方法用于血吸虫病诊断的敏感性与特异性;使用该方法检测治疗前及治疗后1年的同一血吸虫现症感染患者的配对血清,观察抗Sj FBA抗体IgG检测用于血吸虫病疗效考核的价值. 结果 血吸虫感染家兔体内抗Sj FBA抗体IgG水平随感染时间的延长而逐渐增强,感染6周达到高峰(A450值为1.364),但治疗后抗Sj FBA的抗体则迅速下降,治疗6-8周后抗体水平可下降至阴性阈值(A450值为0.4),而未治疗组则抗体水平则始终保持在高水平,表明家兔体内抗Sj FBA抗体反应呈典型的短寿抗体反应模式.不同感染度小鼠血清抗Sj FBA抗体水平随着感染度的升高而逐渐升高,呈剂量依赖性关系.检测抗Sj FBA抗体IgG用于血吸虫现症感染诊断的特异性为88.8%,敏感性为82.5%,阴性预测值和阳性预测值分别为78.6%和91.0%;与华支睾吸虫病患者血清的交叉反应率为10%,与卫氏并殖吸虫病患者血清的交叉反应率为30%.治愈1年后患者血清中抗Sj FBA的抗体IgG阴转率达100%. 结论 日本血吸虫Sj FBA在宿主体内诱导短寿抗体反应,应用rSj FBA-ELISA检测抗Sj FBA抗体IgG的敏感性和特异性均较高,具有血吸虫病诊断与疗效考核价值.

  • 华支睾吸虫成虫14~33 ku抗原诊断价值的研究

    作者:华万全;曹国群;许永良;余传信;娄培安;张志才

    目的 探讨纯化华支睾吸虫成虫14~33 ku抗原在华支睾吸虫病免疫诊断中的应用价值.方法 使用SDS-PAGE和电洗提法,从可溶性华支睾吸虫成虫抗原中分离纯化14~33 ku抗原,用此抗原经ELISA方法检测华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、日本血吸虫病、姜片虫病患者血清及健康人血清特异性IgG抗体,并与粗制可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA结果相比较.结果 检测63例华支睾吸虫病患者血清,纯化华支睾吸虫成虫14~33 ku抗原ELISA阳性率为76.2%,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA阳性率均为100%;检测25例卫氏并殖吸虫病、85例日本血吸虫病、27例姜片虫病患者血清,14~33 ku抗原的ELISA交叉反应阳性率分别为8.0%、3.5%、0,而可溶性成虫抗原分别为80.0%、62.4%、14.8%,可溶性成虫脱脂抗原分别为64.0%、55.3%、7.4%;检测127例健康人血清,14~33 ku抗原的ELISA假阳性率为0,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原的假阳性率分别为5.5%、3.1%.结论 纯化华支睾吸虫成虫14~33 ku抗原用于华支睾吸虫病免疫诊断的特异性优于粗抗原,但敏感性较低.

  • 日本血吸虫虫卵组分抗原现场查病价值的评价

    作者:孙乐平;洪青标;周晓农;黄轶昕;吴锋;张燕萍;杨国静

    目的评价日本血吸虫虫卵107/121 ku组分抗原在现场查病中的应用价值. 方法采用虫卵可溶性107/121 ku组分抗原酶联免疫吸附试验(FA-ELISA)与双面胶纸条环卵沉淀试验(DGS-COPT)和粪便孵化法平行试验的方法,观察其在现场查病中的敏感性、特异性和阳性检出率的符合情况. 结果虫卵107/121 ku抗原FA-ELISA现场检测粪阳病人的阳性率为92.68%,血吸虫病治愈后8~18个月人群的假阳性率为42.25%,对治疗后8、12、18个月的阴转率分别为36.36%、48.15%、90.90%;该抗原与DGS-COPT平行检测现场普查血清的阳性率分别为9.43%和21.00%(χ2=29.1410,P<0.01);虫卵107/121 ku组分抗原和DGS-COPT有相关关系(rn=0.6263),DGS-COPT和粪便孵化无相关关系(rn=-0.3783),虫卵107/121 ku组分抗原与粪便孵化有相关关系(rn=0.4324). 结论虫卵107/121 ku组分抗原的检测结果更接近于粪便孵化法,现场应用的价值明显高于DGS-COPT.

  • 间接ELISA检测弓形虫感染鼠NTPase-Ⅱ抗体的研究

    作者:李丽宁;沙丹;谭峰;潘长旺;梁韶晖

    目的 建立检测小鼠血清中刚地弓形虫NTPase-Ⅱ特异性IgG、IgM抗体的间接ELISA法,探讨用于弓形虫感染早期检测的应用价值.方法 以刚地弓形虫NTPase-Ⅱ融合蛋白为包被抗原建立间接ELISA法,动态检测刚地弓形虫实验感染鼠血清NTPase-Ⅱ特异性IgG、IgM抗体变化.试验设脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清对照.结果 小鼠血清中的抗NTPase-Ⅱ抗体IgM于弓形虫感染后第3 d开始出现阳性反应,IgG抗体于感染后第7 d开始出现阳性反应,脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清特异性IgG阳性率分别为0、1.92%和0.结论 间接ELISA检测弓形虫感染鼠血清NTPase-Ⅱ抗体的敏感性和特异性较高,有望应用于人感染弓形虫的早期检测.

  • 刚地弓形虫微线体蛋白3的高效表达及应用

    作者:张源源;武晓燕;孙志宇;郑昌峰;郭果为;黄晓红

    目的 构建弓形虫微线体蛋白3(MIC3)原核表达体系.制备高纯度MIC3蛋白,评价其在血清学诊断方面的应用价值. 方法 应用PCR技术扩增去除信号肽序列的MIC3基因,将其插入原核表达载体pGEX-4T-3中.转化人大肠埃希菌DH5a中并克隆,用IPTG诱导表达与谷胱甘肽S转移酶融合的MIC3蛋白(rTgMIC3),用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B纯化rTgMIC3,用SDS-PAGE和Western blot鉴定rTgMIC3纯度及抗原性.以纯化的rTgMIC3为抗原,用ELISA检测人工感染刚地弓形虫ME49株的BALB/c小鼠血清IgG抗体,并观察其消长动态. 结果 扩增的MIC3基因与GenBank中相应基因序列(AF509564)的相似性为100%;表达的MIC3融合蛋白分子质量为61.2 ku,与理论预测值一致,每升菌液能纯化出5 mg的rTgMIC3.Western blot显示,rTgMIC3能被弓形虫ME49株感染鼠血清识别;ELISA显示,感染弓形虫ME49株鼠血清能与rTgMIC3起阳性反应. 结论 本实验成功实现了MIC3基因在大肠埃希菌中的高效表达,以rTgMIC3为抗原建立的ELISA具有较高的敏感性和特异性,为开发弓形虫感染快速免疫诊断方法及弓形虫侵入宿主细胞的分子机制的研究奠定了基础.

  • 血吸虫感染小鼠及家兔抗Sj 23 ku膜蛋白大亲水肽段(Sj23HD)IgG应答模式及其免疫诊断价值

    作者:张伟;王玠;余传信;宋丽君;殷旭仁;钱春艳;沈双;金一;柯雪丹;姚媛;高玒;许永良;杨静

    目的 探讨日本血吸虫中国大陆株23 ku膜蛋白分子大亲水肽段(Sj23HD)的抗体反应模式及重组Sj23HD-HSA用于血吸虫诊断和疗效考核的价值. 方法 建立血吸虫尾蚴感染小鼠及家兔模式动物.采集尾蚴感染前、感染后及治愈后不同时间点小鼠及家兔血清,以酵母表达的纯重组Sj23HD蛋白为抗原,通过间接ELISA方法检测抗Sj23HD IgG应答水平的动态变化,观察Sj23HD在小鼠及家兔体内的抗体反应应答模式及其疗效考核潜能;以Sj23HD-HSA融合蛋白为抗原,以ELISA检测132份血吸虫、30份华支睾吸虫、10份并殖吸虫感染者以及80份健康人血清,观察该重组抗原用于血吸虫病诊断的价值,以抗可溶性虫卵抗原的抗体应答反应作为对照. 结果 血吸虫感染小鼠及家兔体内抗Sj23HD蛋白的抗体反应呈短寿应答模式,抗Sj23HD IgG反应随着感染时间的延长呈增强趋势,治愈后的初期继续增强,至治疗后2~4周达到高水平,随后逐渐下降,至治疗后16周,部分小鼠、家兔的抗体水平可达到阴性阈值,但下降幅度存在个体差异;抗SEA抗体水平在治疗后呈轻度下降趋势.未治疗小鼠和家兔血清中抗Sj23HD、SEA的抗体水平均无明显下降.重组Sj23HD-HSA和SEA ELISA检测132份血吸虫病病人血清,特异抗体阳性率分别为88.64%和97.73%;检测10份并殖吸虫病病人血清,交叉反应率为50%和90%;检测30份华支睾吸虫病病人血清,交叉反应率为0和16.7%;80份健康人血清检测均为阴性. 结论 血吸虫感染小鼠、家兔血清中抗Sj23HD蛋白的抗体反应为抗原依赖的短寿抗体反应,检测参与这一特异性短寿抗体反应的抗体具有血吸虫病诊断与疗效考核潜能.与SEA相比,重组Sj23HD蛋白作为抗原用于血吸虫病实验诊断具有较好的特异性,但对于来自并殖吸虫流行区的患者仍需注意鉴别诊断.

  • 曼氏裂头蚴可溶性抗原DIGFA法快速检测特异性抗体的潜在诊断价值

    作者:王越;叶丽萍;孙亚维;鲁锋;干小仙

    目的 探索曼氏裂头蚴可溶性抗原金标免疫渗滤法快速检测曼氏裂头蚴特异性抗体的免疫诊断价值. 方法 从自然感染的青蛙中分离出曼氏裂头蚴,经口感染小鼠;于感染后第7周剖杀小鼠,收集鼠血清和虫体并计数.以曼氏裂头蚴可溶性抗原(PSA)为探针建立PSA-DIGFA, 分别检测曼氏裂头蚴感染小鼠、健康小鼠、健康人群及其他寄生虫感染者血清中特异性抗体,并与常规ELISA法进行平行检测和比较. 结果 DIGFA法检测感染小鼠血清中特异性抗体的敏感性为100%(49/49)、特异性为100%(30/30),与ELISA法检测结果相同;不同虫荷数感染鼠间抗体水平差异无显著性(P>0.05),感染鼠与正常鼠之间抗体水平差异有显著性(P<0.01).PSA-DIGFA检测健康人群血清100人份均为阴性,检测囊虫、包虫、旋毛虫、肺吸虫、华支睾吸虫病病人血清的阳性率分别为42.5%(17/40)、10.0%(2/20)、20.0%(5/25),80.0%(8/10)、8.0%(2/25). 结论 用曼氏裂头蚴粗抗原检测感染动物血清中特异性抗体具有较好的敏感性和特异性,但与其他蠕虫感染存在较高的交叉反应.不同虫荷数感染鼠均产生较高水平抗体,组间差异无显著性.DIGFA法与ELISA法检测的敏感性和特异性相同,但前者更为简便、快速,无需特殊仪器设备,可单份检测,适合寄生虫病的临床检验和流行病学调查.若能进一步纯化检测用抗原,减少与其他蠕虫间的交叉反应,有潜在的应用价值.

  • 胶体染料试纸条法诊断日本血吸虫感染的meta分析

    作者:钱熠礼;汪伟;洪青标

    目的 评估胶体染料试纸条法(DDIA)检测日本血吸虫感染的诊断效能. 方法 在万方数据、维普、中国知网、Web of Science、PubMed和Embase等数据库中检索有关DDIA诊断日本血吸虫感染的文献,采用RevMan和Metadisc软件进行meta分析,评估DDIA对日本血吸虫感染的诊断效能. 结果 共有16篇文献纳入分析,文献发表偏倚均较小,文献质量较高.16篇文献报道的DDIA检测日本血吸虫感染敏感度为0.448~1.000,特异度为0.322~0.987,合并敏感性89.2%00,合并特异性为62.7%.DDIA试验SROC曲线下面积为0.8992,Q*值为0.8304,DOR为20.49.结论 DDIA检测日本血吸虫感染的敏感性高、特异性强,可推广应用.

  • 我国常用IHA方法对日本血吸虫人体感染检测效能的综合评估

    作者:王利磊;王用斌;魏冬冬

    目的 对我国日本血吸虫人体感染检测的常用IHA方法诊断效能进行综合评估.方法 在中国知网(CNKI)、万方数据(Wanfang Data)、重庆维普(VIP)、中国生物医学文献数据库、PubMed、Web of Science、Scopus和Google Scholar中检索有关间接血凝试验(IHA)诊断日本血吸虫人体感染的全部文献,采用meta分析综合评价IHA检测日本血吸虫人体感染的诊断效能.结果 共有14项研究纳入终分析,IHA法诊断日本血吸虫人体感染的灵敏度为37.6%(95%CI:32.1%~43.3%)~95.1% (95%CI:83.5%~99.4%),特异度为34.7% (95%CI:33.2%~38.2%)~91.6%(95%CI:91.6%~95.6%).不同研究间存在异质性,采用随机效应模型加权合并的敏感度、特异度、阳性似然比和阴性似然比分别为75.6%(95%CI:73.9%~77.7%)、73% (95%CI:72.4%~73.7%)、2.877(95%CI:2.106~3.931)和0.306(95%CI:0.196~0.48).应用加权小二乘法、一般小二乘法和稳健法计算得出的IHA合并准确度为0.71、0.759和0.749,合并OR值分别为5.997、9.937和8.893,3种方法拟合的IHA法SROC曲线下面积分别为0.766、0.826、0.815;合并优势比DOR值为9.41(95%CI:4.88~18.182).散点图中散点基本对称,纳入文献发表偏倚较小.结论 IHA法对日本血吸虫人体感染诊断效能较高,是适合在向血吸虫病传播阻断乃至消除迈进中应用的适宜技术.

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