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免疫法粪便潜血试验的临床意义
我们改用免疫法常规检查粪便潜血.实践表明对临床诊治消化系统疾病的诊断有一定的意义.1 化学法和血红蛋白方法比较(1)化学法:依据血红蛋白中血红素,有过氧化物酶活性的原理.受动物血、蔬菜、铁剂等食物影响.(2)血红蛋白免疫法:利用抗人血红蛋白抗体显色.针对人血红蛋白抗原,基本排除饮食及药物因素的干扰.
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临床菌株中幽门螺杆菌主要蛋白抗原的表达及感染者血清抗体水平的调查
了解不同地区幽门螺杆菌(Hp)菌株主要蛋白抗原的分布及Hp感染者血清中抗体水平,为选择疫苗及诊断试剂盒抗原、了解Hp免疫性及其特点提供重要参考依据.1. 材料与方法:(1)标本来源:收集2003年1~9月浙江地区157例尿素酶阳性患者胃活检和血清标本,其中慢性胃炎88例(浅表性胃炎58例、活动性胃炎15例和萎缩性胃炎15例)、消化性溃疡69例(胃溃疡16例、十二指肠球部溃疡46例和复合溃疡7例).所有患者采样前2周内未接受抗炎、抗生素和抗酸药物的治疗.
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苯接触工人血浆热应激蛋白抗原和抗体水平探讨
苯毒物作为1种应激源,引起机体内热应激蛋白(HSPs)抗原和抗体水平的变化.我们初步探讨了HSPs抗原和抗体在苯接触工人机体中水平的变化.1.对象:根据作业环境空气中苯浓度,选择某市橡胶厂成型、胶浆工人42名为高暴露组(苯浓度≥40 mg/m3),某市造船厂刷漆、喷漆工人50名为低暴露组(苯浓度<40 mg/m3),不接触苯等毒物的机械加工、木工等工种工人42名为对照组.3组工人在年龄、工龄、生活习惯等方面差异无显著性.
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结核分枝杆菌特异性蛋白抗原研究进展及其应用策略探讨
结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据.随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现.本文概述了38 ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16 ku蛋白、MTB81、MTB84和U1蛋白等9种结核分枝杆菌重要抗原的研究进展,并对其应用策略进行了探讨.
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结核分枝杆菌早期培养滤液蛋白的制备和应用
全球结核杆菌感染者高达 20 亿人,每年新发病例约800 万 ~ 1000 万,其中我国每年新发患者高达 150 万.结核杆菌流行病学的一个重要特征是结核分枝杆菌的潜伏感染.结核分枝杆菌潜伏感染是一种亚临床状态,其中约有 10% 的结核分枝杆菌潜伏感染者会发展成为结核病患者[1].流行病学调查显示,我国受结核杆菌感染人数超过5 亿.因此,如何有效、全面地筛查出结核病患者和结核杆菌潜伏感染人群,是结核病控制首要解决的问题.结核分枝杆菌早期培养滤液蛋白主要为小分子的分泌性蛋白,这些蛋白抗原是记忆性免疫 CD4+T 细胞的靶分子[2].以早期培养滤液蛋白为刺激源,结合 γ 干扰素释放技术,可以用于结核杆菌感染的体外诊断.
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中国甲型肝炎病毒龙甲株全基因序列的cDNA克隆及序列分析
甲型肝炎是我国主要传染病之一,经粪-口途径传播.甲型肝炎病毒(HAV)在组织培养中生长缓慢,滴度低,限制了甲型肝炎疫苗及诊断试剂的生产.因此有必要克隆我国自己的HAV基因,为体外表达HAV抗原打下基础.HAV属小RNA病毒科肝病毒属,为无包膜的单链RNA病毒,含有长约7.5 kb的正链RNA,5′端有长的非编码区,3′端有polyA的尾巴.基因组含有一个长的开放读码框架,编码2 227个氨基酸的大蛋白.基因排列顺序为:5′-NCR-VP4-VP2-VP3-VP1-2A-2B-2C-3A-3B-3C-3D-3′NCR,其中VP4至VP1为结构蛋白区又称P1区,2A至3D为非结构蛋白区,又称P2(2A-2C),P3(3A-3D)区.HAV只有一个血清型,结构蛋白抗原具有构型依赖性,抗原序列相对保守.其中5′NCR、2B、2C、3A及3′NCR区对细胞培养株的适应性有关,3C为蛋白酶区,几乎切割多蛋白的所有位点,3D为RNA聚合酶区[1].我们对我国HAV龙甲株全序列的cDNA克隆及序列进行了分析,并与HM175株[2]和MBB株[3]以及已发表的甲肝病毒龙甲株结构区基因[4]进行了比较.
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MAGE-3抗原冲击外周血单个核细胞诱导抗肿瘤免疫应答
MAGE-3基因的表达产物是一种肿瘤排斥抗原,在抗肿瘤免疫治疗中可作为靶抗原.本实验以原核表达GST-MAGE-3融合蛋白,体外观察MAGE-3蛋白抗原冲击外周血单个核细胞(Peripharal blood mononuclear cells,PBMCs),能否诱导特异性的抗肿瘤免疫应答.
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不同剂次重组乙型肝炎疫苗(中国仓鼠卵巢细胞)加强免疫效果评价
加强免疫是提高保护性抗体阳性率和滴度的有效途径.国内对加强免疫的必要性存在争议.如有的从免疫细胞特异的回忆反应角度进行研究,认为加强免疫似无必要[1];有的从乙肝病毒携带率与免疫后间隔时间相关性角度进行研究,认为有必要进行加强免疫[2-3],以增加免疫效果.结合当前疫苗安全有效、价廉且市场供应充足的实际,为确保避免感染后成为慢性携带者,在抗体下降到保护水平以下接触乙肝病毒后是否能避免感染这一问题尚未明确以前[4-5],本研究选择能诱导较强地体液免疫且其表达的蛋白抗原接近天然HBsAg的HepB(CHO)进行加强免疫研究,比较其免疫效果,旨在为基层采取适宜加强免疫措施提供依据.
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结核分枝杆菌含信号肽的Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗免疫保护效果研究
目前人类预防结核病的惟一疫苗棗卡介苗(BCG)存在着不足,研制新型、有效、安全的预防结核病的疫苗成为国内外学者共同关注的一个重要课题.目前由于大多数结核病DNA疫苗的免疫保护效果尚不如BCG,因此,提高DNA疫苗免疫效力是目前结核病核酸疫苗研究的热点.本研究选择新近从结核杆菌培养滤液(CF)中纯化分离出的一种低分子量蛋白抗原棗含信号肽的Mtb8.4(MS)作为目的抗原,与人白细胞介素12(hIL-12)构建成结核病嵌合基因疫苗,旨在提高MS的免疫效力.
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兔胸腺、猪脾丙酮粉的制备及ENA的提取
ENA全称为Extractable nuclear antigen,即可提取性核抗原,包括Sm、U1-RNP、SSA、SSB、Jo-1、Sc1-70、rRNP、Ku、PCNA、Mi-1、Mi-2、PM-1等.ENA抗体是抗核抗体中种类多、为重要的一族抗体谱,是自身免疫性结缔组织病中常见的自身抗体.本文拟从兔胸腺和猪脾中制备ENA丙酮粉,探索简便可行的浓缩ENA蛋白抗原的方法,以达到提高检测抗ENA抗体阳性率的目的,终向基层医院推广.
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人参皂甙Rg1对HPV16 L2 E6 E7融合蛋白疫苗的免疫佐剂作用研究
宫颈癌( cervical carcinoma)是威胁女性健康的第二大恶性肿瘤,其危害程度仅次于乳腺癌[1]。据国际癌症中心( In-ternational Agency for Research on Cancer,IARC)统计,全球每年宫颈癌的新发病例约为49.3万,死亡人数约为27.4万。Papovaviridae科的人乳头瘤病毒( human papillomaviruses, HPV)感染是导致宫颈癌发生的重要原因[2],目前已发现它有170多种亚型,而75%以上的宫颈癌患者感染了16、18、31和45型的HPV病毒。国际上正在积极研究防治宫颈癌的疫苗,目前已有3种预防性疫苗问世。 HPV16 L2E6E7融合蛋白疫苗是针对HPV16病毒感染后E6E7癌基因引起的宫颈上皮内瘤样病变的一种治疗性疫苗,目前正在申报国家食品药品监督管理局药审中心( CDE )临床试验(受理号CXSL1200006)。像其他蛋白抗原一样,该疫苗尚存在免疫原性差的缺点。为提高该疫苗的免疫效果,本研究在HPV疫苗中添加人参皂甙Rg1,研究Rg1对HPV疫苗的佐剂作用。
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结核分支杆菌重组ESAT6蛋白抗原诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究
结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)含多种蛋白成分,与多种分支杆菌存在交叉,尤其在鉴别结核分支杆菌感染和卡介苗接种阳转者上有一定的困难.所以PPD作为结核病诊断试剂有其局限性.现已发现结核分支杆菌Ag85、MPT64、38 000、MPT63、ESAT6等抗原,均能诱发豚鼠发生迟发性超敏反应(DTH).具有高特异性的新的诊断试剂或许就存在它们或它们的组合中.ESAT6蛋白是结核分支杆菌生长中的一种小相对分子质量分泌蛋白,它能诱发结核分支杆菌感染的豚鼠发生很强的DTH反应,大部分BCG在减毒过程中丢失了编码该蛋白的基因,且该基因只在少数分支杆菌中存在,特异性较强,用于皮肤试验有其自身的优点.
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结核中心结核分支杆菌Ag85A蛋白的克隆、表达及其血清学诊断价值的研究
10多年来国内、外学者一直从结核分支杆菌培养滤液中提纯蛋白质抗原进行多方面的研究,由于该方法制备蛋白抗原较烦琐、费时,因此,近年来许多研究者应用大肠杆菌来表达结核分支杆菌基因,简便地获得了大量结核分支杆菌单一的蛋白抗原.Ag85复合物是结核分支杆菌主要的分泌性蛋白,在结核分支杆菌H37Rv株中占分泌蛋白总量的30%,可从早期培养物中分离,是一种热不稳定的蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和等电聚焦分析可分为Ag85A、Ag85B和Ag85C三个组分[1].因此本研究通过基因工程技术构建结核分支杆菌Ag85A表达株,获得重组Ag85A(rAg85A)蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值,为研制更有效的结核病免疫诊断试剂和新型的结核病疫苗奠定了基础.
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抗α-fodrin抗体在干燥综合征诊断中的意义
干燥综合征(SS)是以外分泌腺体淋巴细胞浸润为特征,以口干燥征和干燥性角结膜炎为常见表现的一种慢性炎症性、系统性自身免疫病.分为原发性(PSS)和继发性(SSS)两种.特异性血清抗体检查是SS诊断的重要指标.相对分子质量为120 000 的α-fodrin(简称α-fodrin)是近来发现的一种蛋白抗原,主要存在于腮腺组织,有人认为抗α-fodrin抗体可能为SS患者的标志性抗体[1].我们通过检测结缔组织病患者血清中抗α-fodrin抗体,并与其他检查指标相比较,来探讨抗α-fodrin抗体在SS诊断中的临床意义.
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早发现不必早烦恼
直肠检查属于男子不需每天注意的事项.泌尿科医生以往是用食指和安全的检查用具,对前列腺进行触诊的.不过现在的趋势是,额外增加抽血检查来确认前列腺是否有肿瘤,也就是所谓的PSA检测.PSA即前列腺特定抗原,这种蛋白抗原是由前列腺分泌到血液中的.这种栗子般大小的腺体位于膀胱之前(所以才叫前列腺),其所形成的分泌物会在射精时同时进入尿道,在此与精液混合从而加强精子的活动性.
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黏蛋白MUC1在卵巢肿瘤诊断与监测中的应用
近年来已有至少十种不同的黏蛋白基因被克隆成功,同时人们还发现黏蛋白抗原是多种肿瘤相关抗原,如:乳腺、胰腺、胃、肠道、气管支气管、膀胱以及女性生殖系统肿瘤,这为进行黏蛋白分子合成和各种疾病状态下基因异常改变的研究提供可能,对黏蛋白MUCl基因表达研究,提示此基因在卵巢上皮肿瘤病……
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姬松茸多糖促进OVA抗原免疫反应的研究
目的:探讨姬松茸多糖(ABP-AW1)促进OVA抗原诱导Th1/Th2免疫反应的研究。方法:ICR小鼠随机分为PBS免疫组、OVA免疫组、DT免疫1、2、3组和Alum免疫组。第1次免疫后,间隔2周再免疫第2次。采集二免2周后小鼠血液,间接ELISA法测定IgG及其亚类抗体水平,取重要脏器HE染色观察ABP-AW1佐剂对主要脏器继发的损伤反应。结果:OVA免疫组血清中抗OVA特异性抗体IgG的产生与PBS免疫组、DT免疫组2、Alum免疫组比较差异均有统计学意义(P<0.05);OVA免疫组血清中抗OVA特异性抗体IgG2b的产生与PBS免疫组、DT免疫组2、DT免疫组3比较差异均有统计学意义(P<0.05);OVA免疫组血清中抗OVA特异性抗体IgG1的产生与其余各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。未见主要脏器的损伤反应,无继发性的免疫损伤。结论:ABP-AW1佐剂可同时促进OVA免疫小鼠Th1和Th2型免疫反应,调节抗原刺激小鼠Th1/Th2失衡的作用,具有不同于铝佐剂的Th1优势反应。
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2000年度上海市医学科技成果简介(续)
(上接第18期)甲状腺球蛋白抗原固相放免法建立及初步临床应用(上海市普陀区中心医院,国内领先水平)该项研究具有以下特点:1.在固相试剂盒建立过程中自行提取抗原,制备单克隆抗体及相应的胞株,并进行了125I标记,建立了整个药盒制备的方法学.
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大体骨组织免疫组织化学染色的比较
骨组织因其十分坚硬,脱钙时间长,且在常规HE及免疫组织化学染色中均极易脱片,不能观察完整的骨组织结构.常规骨组织采用混合酸即45%盐酸、55%甲酸和EDTA脱钙.20例兔股骨头10例采用昆合酸液[1](福尔马林100ml,生理盐水800ml,甲酸70ml,盐酸80ml,三氯化铝结晶60g,冰醋酸25ml)脱钙,10例采用45%盐酸、55%甲酸脱钙,均用10%中性福尔马林作为固定液,采用胰酶消化方法定位,观察骨组织结构改变和蛋白抗原保存情况,混合酸液[1]得到了较满意的结果.
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高压锅水浴法修复组织抗原和微波染色并用的体会
目前,免疫组织化学染色技术的出现,是病理学发展史上的一次革命.免疫组织化学特异性高、简便易行,无论在临床病理诊断,还是病理研究领域,都起着十分重要的、不可缺少的作用.但日常工作中所使用的10%甲醛固定的石蜡包埋组织常产生蛋白交联反应,遮蔽了组织内某些蛋白抗原,使抗体不能与抗原结合,导致免疫组织化学染色呈假阴性结果,影响了病理诊断的结果及科研的结论.用于免疫组织化学的抗体近千种,不同抗体对病理切片的抗原修复要求也不尽相同.