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SARS实验室诊断技术研究现状
严重急性呼吸综合征(Serve Acute Respiratory Syndrome,简称SARS)是2003年主要在我国暴发流行的一种以发热和严重肺部感染为主要特征的新发急性传染病.经过国内外专家学者的病原体的分离和基因图谱的协作研究,2003年4月16日,WHO正式宣布,确认冠状病毒的一个变种是引起SARS的病原体[1].自加拿大科研人员率先成功地分离出SARS相关冠状病毒(SARS-CoV)以来[2],世界上不同实验室相继成功地分离出了SARS-CoV[3-5],同时研制开发出了不少可用于SARS-CoV感染的特异性实验室检查技术.这些实验室诊断技术主要可以分为以下几类:(1)病毒分离;(2)聚合酶链反应(PCR);(3)特异性抗体检测;(4)免疫组化法检测病毒抗原;(5)电子显微镜检查.这些技术大多未经多家实验室之间的标准化,在用于SARS-CoV诊断中其特异性、敏感性、准确性等方面还存在着差异.现就这些技术的研究情况作一综述.
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安捷伦:科技方案推动实验室高效发展
作为全球生命科学、诊断和应用市场的领导者及领先的实验室合作伙伴,安捷伦始终关注分析检测技术的发展以及不同实验室面临的挑战和需求,致力于为用户和行业提供更为完善、更加创新的解决方案。
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免疫组化技术(六)
必须记住在来源实验室中的织切片是独一无二的.固定类型和持续时间的不同以及组织处理时间表、试剂和切片的干燥方式上的差异都是重要的考虑事项.不同实验室在这些步骤上的操作是不同的.
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流式细胞仪每秒进样细胞数对细胞G0/G1期峰的荧光强度值及变异系数值的影响
在生物学研究中,利用细胞内DNA双螺旋结构碱基对与某些核酸荧光染料有良好的亲和力,荧光染料在光的激发下,产生特定的荧光,运用流式细胞仪检测、分析其荧光强度(Mean值),及其变异系数(CV值),了解细胞内DNA含量,已成为科学分析细胞DNA含量及其所处周期状态的一种手段[1,2].然而,流式细胞仪对操作者技术要求高,同一样本不同实验室检测的结果不尽相同;即使是同一实验室,不同操作人员检测结果亦不一样.其原因既有各实验室评价指标的差异[2-4],也有操作人员个人习惯以及机器本身性能的差异,选定技术参数不同等等.本研究旨在探讨流式细胞仪每秒进样细胞数对检定细胞G0/G1期峰Mean值及CV值的影响,以寻求合适的每秒进样细胞数.
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27株儿童多重耐药肺炎链球菌的基因型分析
肺炎链球菌是引起社区呼吸道感染的主要病原菌,在0~5岁儿童中可导致肺炎、中耳炎、脑膜炎等.国际通用多位点序列分型技术(MLST)进行克隆株的鉴定分析,用于对耐药菌的长期监测和不同实验室比较.但国内此种研究数据非常有限.我们选取27株多重耐药肺炎链球菌进行多位点序列分型,以了解其分子分型特征及与耐药播散的关系.
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阴沟肠杆菌基因分型方法的比较研究
细菌分型的方法多、应用灵活、对不同的菌属分辨力不同,实验室之间缺乏统一的应用标准,造成不同实验室之间结果无法进行比较。
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血细胞分析溯源体系的建立及有关问题的探讨
血细胞分析(血红蛋白测定、红细胞计数、白细胞计数、红细胞比积、血小板计数等)是临床常用的实验室检测指标,其结果的准确性直接影响对患者的诊断和治疗.根据国际血液学标准化委员会(international council for standardization in haematology, ICSH)颁布文件的要求,血细胞分析的检测结果只有直接或间接地溯源至参考方法,才能保证结果的准确性和不同实验室检测结果的可比性,但由于血细胞分析检测系统配套校准物的价格高、进口入关手续的办理较难、效期短且难以及时获得等特点,使校准物的使用难以得到推广.
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白血病与淋巴瘤的分子诊断
近年临床研究表明,大部分白血病和淋巴瘤存在某种染色体易位,易位会产生新的融合基因.这些标志可以用于诊断不同类型的白血病和淋巴瘤.世界卫生组织2000年发布的白血病和淋巴瘤诊断标准已经将染色体易位作为重要的指标之一.当前白血病和淋巴瘤的治疗取得了很大进展,不幸的是,相当一部分患者终会复发,复发的原因是许多完全缓解的患者体内仍然存在常规方法不能检测出来的低水平的肿瘤细胞,称为微小残留病(minimal residual disease,MRD)[2].目前,临床治疗的目标是使患者达到分子水平上的缓解,这就要求MRD检测的灵敏度能够达到1/10细胞,能够定量,快速、价廉、易于标准化,同时能在不同实验室重复结果[3-6].
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血脂测定标准化--临床化学的重要课题
在临床化学试验中,首次提出标准化要求并已具备完整的参考系统为准确性基础的是胆固醇测定.根据美国的国家胆固醇教育计划(NCEP),总胆固醇(TC)测定成为独一无二的用作全民普查的临床化学项目[1].现在NECP提出的血脂基本项目除TC外,还有高密度与低密度脂蛋白胆固醇(HDL-C与LDL-C)及甘油三酯(TG).NCEP的实验室标准化专家组(LSP)已发表了做好这些试验的指南,制定了试验的技术目标[2,3],即要求不同实验室对同一批标本的测定值落入在可允许的不精密度(CV)与不确定度(与靶值的偏差)范围内.
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血浆脂蛋白(a)检测的研究进展
大量的流行病学和临床研究表明,脂蛋白(a)[Lp(a)]是动脉粥样硬化性心脑血管疾病(CVD)的危险因素[1].自McLean等[2]发现载脂蛋白(a)[apo(a)] 与纤溶酶原结构高度同源以来,Lp(a) 与动脉粥样硬化和血栓形成的关系又成为新一轮研究热点[3,4].市场上也出现了众多的用于Lp(a)浓度测定的免疫方法和校准物(定标血清).但是由于很多方法没有考虑到样品中Lp(a)分子大小多态性及结构的复杂性,以致测定结果受抗体的免疫特性和校准物中Lp(a)颗粒大小的影响很大.不同实验室和不同方法之间的测定结果缺乏可比性 [5], 妨碍了Lp(a) 前瞻性研究和危险水平的划分.近年来,由国际临床化学联合会(IFCC)组织、美国西北脂类研究室牵头的Lp(a)测定标准化研究已取得了突破性的进展[6].尽管国内很多医院都开展了Lp(a) 测定项目,但标准化工作尚未起步.以下简单综述Lp(a)的结构、测定方法及标准化中的一些问题.
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评析《甲状腺疾病诊断治疗中实验室检测项目的应用建议》
甲状腺相关实验室检查在临床实践中有着广泛的需求和应用.不仅用于甲状腺疾病的诊断和治疗,也用于其他系统疾病的诊断和鉴别诊断.甲状腺相关实验室检查项目众多,检测方法几经变化或改进,不同实验室现行使用的方法各异,缺乏一致性.因此,不论是临床医师,还是实验室技术人员,都应该掌握甲状腺相关实验室检测技术的原理和方法,应能根据患者诊治的需求,选择恰当的甲状腺相关的实验室检测指标进行检测,并能合理地解释和分析检测结果,用于疾病的诊断和治疗.中华医学会检验分会、卫生部临床检验中心和中华检验医学杂志编辑委员会制定,中华医学会检验分会编写的《甲状腺疾病诊断治疗中实验室检测项目的应用建议》[1]恰恰满足此项临床需求,值得认真阅读和理解,并付诸于临床实践.
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依据Nordtest准则评估测量不确定度更适合于临床实验室
测量不确定度能够客观地反映测量结果的可靠性[1],不确定度愈小,测量水平愈高,测量结果的使用价值愈高.了解测量不确定度,可促进临床医师在诊断和治疗疾病时更恰当地解释测量数值.1995年国际标准化组织推出的《测量不确定度表述指南》(Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement,GUM)推荐使用"模式办法(modelling approach)"评估不确定度[2],确定被测量之后,从下向上尽可能找出不确定度来源的所有组分,然后用方差分析合并得到测量结果的合成不确定度.这种"模式办法"广泛应用于物理、化学领域,并得到2000年"分析测量中定量不确定度(Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement,QUAM)"文件及ISO/PDTS导则25680.8(医学实验室-测量不确定度的计算和表示)的认同[3].然而,"模式办法"在临床实验室内很难应用,因为全面搜寻不确定度来源不仅耗费大量人力、物力和财力,而且不同实验室搜寻结果难以一致,评估结果往往不能比较.所以,如何使用一种简单实用的方法评估常规检测项目的测量不确定度成为大家关注的问题.
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糖化血红蛋白诊断糖尿病的时代——糖化血红蛋白实验室检测指南解读
HbA1c不仅是WHO及一些国家专业学术团体推荐的糖尿病诊断标准,也是糖尿病血糖控制目标,以及评价糖尿病治疗方案有效性的指标,是20世纪90年代中期在国际上逐步推广应用的一个指标.目前,临床实验室能够检测的指标有几百甚至上千种,但可作为疾病诊断、筛查及监测疗效的指标不多,而HbA1c就是其中之一.因此,保证HbA1c测定质量十分重要.HbA1c的临床实验室常规测定方法自20世纪70年代末问世以来,几经变革及改进,不同实验室现行使用方法种类繁多、品牌各异,测定结果缺乏可比性.鉴于其测定质量直接关乎到医疗水平及医生、患者切身利益.因此,不论是临床医生,还是检验医学工作者都应掌握HbA1c检测原理和方法,尤其是相关干扰因素.
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血清新型冠状病毒特异性抗体水平的检测及其动态变化规律
重症急性呼吸综合征(SARS)的病原体相继被不同实验室发现并确证为一种新型冠状病毒,又称为SARS病毒[1],已确定了病毒基因的一级结构和一些基因组特征,为利用分子免疫学手段研究和建立SARS的血清学诊断方法奠定了基础[2].我国军事医学科学院等单位已成功建立了检测SARS病毒抗体的ELISA方法,并开发出相应的检测试剂盒.本研究采用ELISA方法检测SARS患者和医务人员血清SARS病毒特异IgG抗体,观察SARS病毒抗体在患者和高危易感人群的产生规律和水平,为SARS的诊断及其流行传播特点的分析提供实验依据.
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现代精液分析在临床上的运用
据报道不育夫妇约占已婚育龄夫妇10%,其中男性不育占40%,女性不育占60%.精液分析是不育者必需检查项目之一.传统的精液分析是用血细胞记数板记数精子密度,再用涂片估算精子的百分率.此法不但误差大,不同实验室以及不同操作者之间缺乏可比性,而且只能分析精液有限几个参数指标.
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检验的标准化道路
检验工作中,由于不同医院的设备、方法、试剂、人员素质不同,使同一病人同一被测物在同一时间内在不同实验室出现检验值相差甚远的结果.实验室常常制定各自参考值,使不同医院的检验结果没有可比性.尽管通过室间质控后一些项目得到相对统一,但未参加室间质控的实验室及未开展室间质控的项目结果很难统一.
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临床实验室检测系统的溯源性
检验结果的准确性,是临床医生对疾病进行诊断和治疗的重要依据.在临床实验室中如何确保检验结果的准确,是每个检验人员必须关心的问题.而量值溯源可以提高检测结果的准确性,提高不同实验室检测结果的可比性.是提高检验质量的重要手段,检验结果的溯源性将成为临床实验室的检验工作和检验试剂生产的重要质量指标.(在检验过程中使用可溯源性检测系统是保证检验结果准确性的前提.
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血流动力学与肺动脉漂浮导管——不学病理生理学不能取得根本性的进展
过去的60年里,生理学、病理生理学和药理学等新理念推动着危重病医学沿着正确的道路发展.同时也开发了一批新的医学技术.话说肺动脉漂浮导管,很自然想到Swan和Ganz.Harold James Charles Swan原藉爱尔兰,曾在伦敦大学获生理学PhD学位.William Ganz原藉捷克斯洛伐克,曾获理科PhD学位.他们早年曾在不同国家、不同实验室分别参加测定心排血量的研究工作,他们共同的专业背景是心内科,后来两人先后移民美国.
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应改善睾酮水平的测定方法——"美国内分泌学会"立场声明
1背景对患者睾酮水平进行测量可用于辅助诊断、监测治疗效果及开展研究工作.多种疾病可以导致睾酮水平异常,如男性性功能低下、女性多囊卵巢综合征、儿童性发育异常等.美国目前采用的睾酮测量方法通常是测量总睾酮或游离睾酮,但尚未有对睾酮水平进行校准的通用标准,不同实验室的测量结果具有差异.
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应用相差显微镜鉴别血尿来源的方法学及形态学探讨
近年来国内外陆续报道了应用相差显微镜鉴别血尿来源的方法,这对于初步鉴别血尿来源具有一定的临床价值[1,2].但由于目前各实验室的方法学尚不规范,对于肾小球性红细胞(肾内红细胞)和非肾小球性红细胞(肾外红细胞)的形态学认定标准不统一,从而出现了不同实验室检验结果的不一致性,贻误临床诊断.因此亟待规范实验方法,统一畸形红细胞的认定标准.