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高效毛细管电泳法鉴别半夏及水半夏
半夏Pinellia ternate(Thanb.)Breit为天南星科植物[1].由于野生半夏货源短缺,人工培育赶不上需求,市场上的掺伪品和混伪品时有发生.天南星科植物戟叶犁头尖水半夏Typhonium flagelliforme (Lodd.)Blume是较常见的掺伪品.虽然它与半夏有相似的燥湿化痰、止咳作用,但止呕作用不明显,在本草中未见记载,故不宜代半夏使用,因此,正品与非正品的鉴别甚为重要.有报道,从药材外形、显微、理化及二维相关红外光谱法等几方面,对半夏及其伪品水半夏进行过鉴别研究[2-4],但这些方法操作较繁杂,有的专属性不强,作者拟以中药材细胞中普遍存在的,受遗传基因控制的蛋白多肽分子为指标,用高效毛细管电泳(HPCE)来探索和论证鉴别半夏的可行性.
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运用内标校准法提高表面增强激光解吸电离飞行时间质谱检测中的重复性
表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)具有高灵敏度、高通量、高效率等优点,是近年来疾病蛋白组学研究的先进技术 [1],但该技术检测结果 的重复性较差.因此,建立SELDI-TOF-MS检测流程的标准化至关重要 [2].我们将色谱分析常用的内标法 [3-4]引入SELDI-TOF-MS技术,采用合成多肽分子作为内标物,建立内标校准法以校准SELDI-TOF-MS质谱图的横坐标和纵坐标,以提高该方法 检测蛋白质分子和丰度的重复性.现报告如下.
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成纤维细胞生长因子2在椎间盘中表达与作用的研究进展
成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)目前发现总共有22种,但在椎间盘领域主要涉及的是成纤维细胞生长因子2 (fibroblast growth factor 2,FGF2)[1].因为FGF2呈碱性,故亦称为碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF).FGF2是一种具有促有丝分裂作用的活性多肽分子,在体内具有广泛的作用.在椎间盘中基本的病理变化是椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD),其本质就是一种基质代谢的失稳态[2].
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Obestatin研究进展
Obestatin是新近发现的一种由机体分泌的多肽分子.研究表明,obestatin不仅作用于胃肠道,延缓胃排空,而且还作用于下丘脑摄食中枢,抑制食欲.
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心血管活性多肽分子内调控研究
蛋白质为生命的基本构件单位,是联系基因与机体生理功能的枢纽,但蛋白质功能的研究面临着极大的困难.人类约不到4万个基因可表达30多万种蛋白质,蛋白质种类繁多,每一种蛋白质又具有复杂的功能,众多蛋白质活性分子间的生物学效应相互作用形成复杂的调控网络.
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慢性肝病中细胞因子网络的特点和作用
细胞因子是一类由免疫细胞(淋巴细胞、单核巨噬细胞等)和相关细胞(成纤维细胞、内皮细胞等)产生的调节细胞功能的高活性蛋白质多肽分子.由于一种细胞可以产生多种细胞因子,一种细胞因子具有多种生物学活性,多种细胞因子之间存在着生物学活性的相互增强或相互拮抗.
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胰岛素生长因子-1与神经系统疾病
一、胰岛素生长因子-1的基础IGF-1早在20世纪60年代由Salmon和Danghaday发现,曾被称为硫化因子,后因其对机体生长发育的重要作用又被称为生长介素.它是一类介导合成代谢具有生长激素样效应的细胞因子.IGF-1由70个氨基酸组成的单链碱性多肽分子,分子量为7649.它与胰岛素前体有50%的相同序列.与胰岛素不同的是,它在循环中保留相当于胰岛素C肽的部分,并有一个延长的羟基端.体内几乎所有组织、细胞都能分泌IGF-1、表达IGF-1受体.循环中的IGF-1主要是由肝脏合成.血中的IGF-1主要与胰岛素样生长因子结合蛋白(1GFBP)结合,只有1%是游离的.人类IGF-1在循环中的浓度约为25nmol/L.[1]
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核心蛋白聚糖和细胞因子的相互作用
核心蛋白聚糖(decorin)为蛋白聚糖(PG)的一种,属分泌型的富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖家族,由于其能修饰胶原原纤维因此也称为饰胶蛋白聚糖.decorin由富含亮氨酸的核心蛋白和一条糖胺聚糖链组成,在调节细胞黏附、迁徙、增殖,胶原纤维形成及对转化生长因子(TGF)-β活性调节中起重要作用.近来发现decorin高表达可以使TGF-β和白细胞介素(IL)-1β的水平降低,相反,使IL-4和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平升高,说明decorin在细胞因子产生的调节中起着重要作用[1].细胞因子是由免疫细胞、成纤维细胞和内皮细胞等产生的调节细胞功能的高活性多功能蛋白多肽分子.细胞外基质(decorin其中之一)的形成和改变受各种细胞因子的影响[2].decorin可以与多种细胞因子相互作用,下面就decorin与TNF-ot、干扰素(IFN)-γ、IL-6等细胞因子的相互作用作一简单综述.
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细胞因子在男性不育中的作用
细胞因子是一类具有异质性的可溶性多肽分子,它是由多种细胞产生并释放,通过与靶细胞受体结合,激发信号传递过程,从而调节细胞的生长、增殖、分化等功能.细胞因子的生物学作用十分广泛.在男性生殖系统中,细胞因子对睾丸的功能、精子的发生等有着重要的影响,因而在男性不育的发病机制中起着十分重要的作用,现结合近年的文献综述如下.
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组织芯片技术及其应用
生物芯片(biochip)是指采用微量点样等方式,将核酸片段、多肽分子、组织切片和细胞等生物样品有序地固定于支持物(如玻片、硅片、尼龙膜等载体)的表面,组成密集二维阵列,然后与已标记的待测生物样品中的靶分子进行杂交、或用免疫组织化学、原位杂交等技术使待检分子可视化,后通过特定的仪器如激光共聚焦扫描仪或电荷偶联摄影像机(CCD)对可视化信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的相对数量.
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恙虫病立克次体蛋白抗原及其编码基因研究进展
恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi)是恙虫病(Scrub typhus)的病原体,专性活细胞内寄生,革兰氏阴性,恙螨是其传播媒介。在分类地位上,恙虫病立克次体原属于立克次体科立克次体属,但由于其在许多生物学和遗传特性方面不同与其他立克次体,1995年将其另立一属一东方体属(Orientia),称为恙虫病东方体(Orientiatsutsugamushi)[1]。近十多年来,新的技术方法尤其分子生物学方法不断引入恙虫病立克次体的研究,使病原学研究更加系统深入广泛。现对其蛋白抗原与其编码基因的研究综述如下。1 恙虫病立克次体的多肽组成 纯化的恙虫病立克次体裂解物或蛋白抗原或多肽经SDS-PAGE电泳,发现有30多条带[2]。其中主要的多肽为56kD,58kD,47kD,70kD。由于各实验室实验条件的不一致,使得恙虫病立克次体多肽的命名也较为混乱,同一多肽有不同的名称。例如58kD(Hanson称为63kD,Tamura称其为60kD),56kD(Hanson称为60kD),47kD(Hanson称为50kD)。恙虫病立克次体各株SDS-PAGE电泳图谱是相似的,但某些多肽的分子量有细微的差别。如Kato株56kD多肽比其他株47kD(Gilliam,Karp,Shimokoshi)的分子量大。这与Melinda F.Moree等的发现是一致的[3](见表1)。菌体蛋白的迁移还受温度,2-巯基乙醇等样品制备条件的影响[4,3]。同一多肽分子,不同制备条件下会以不同的状态存在(见表2)。由表2可见,56kD蛋白是一个热修饰蛋白,其存在状态依温度不同而异。
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中药离子导入临床应用概况
中药的有效成分可通过皮肤上的汗腺管开口、毛孔、皮肤腺开口及细胞间隙等途径进入体内,但因受到诸多阻力,进入量有限.表皮角质层是药物进入体内的主要屏障[1].中药离子导入法是根据直流电场内同性电荷相斥、异性电荷相吸的原理,在电极与皮肤之间放置以药液浸湿的纱布或滤纸,通以直流电,使皮肤角质层两侧产生电压.一则此电压降可引起角质层α-螺旋角蛋白多肽分子重新分布而形成新的孔道结构;二则因汗孔、毛囊等孔道的电阻小,有利于电流通过,从而使药物易于透入[2].
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心脏手术与细胞因子
细胞因子(CK)是一类主要由活化的免疫细胞(如单核/巨噬细胞、T细胞、B细胞等)或间质细胞(如血管内皮细胞等)所合成、分泌,具有调节细胞生长、分化、成熟、调节免疫应答、参与炎症反应、促进创伤愈合、参与肿瘤消长等功能的多肽分子.某些病理过程常伴有CK的异常表达,并可直接影响疾病的发生、发展及预后.CK的重组成功,为其在临床的应用打下了良好的基础,成为一类重要的生物应答调节剂.
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细胞因子与心血管疾病
细胞因子(Cytokines)是一类由细胞产生的、具有调节细胞功能的高活性、多功能的蛋白质或多肽分子。其功能是调控细胞增殖、分化、生长和代谢活动。 历史上,曾经出现过4类细胞因子:病毒学家们研究干扰病毒复制的细胞因子——干扰素(interfron,IFN);细胞生物学家对影响组织细胞生长和分化的因子——多肽生长因子感兴趣;血液学家们研究的焦点是促进骨髓细胞增殖、分化形成集落的因子——集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF);免疫学家们则更热衷于来自淋巴细胞和巨噬细胞并对这些细胞发挥作有的细胞因子——白细胞介素(interleukin,IL)。本文讨论的内容属于广义的细胞因子范畴,即包括前述四类细胞因子,而不仅仅限于免疫学领域。
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人大颗粒淋巴细胞抗菌多肽的分离
新近的资料表明T淋巴细胞和NK细胞具有直接抗细菌、真菌和寄生虫作用,其分子基础受到关注.现已报道从猪细胞毒性T细胞和NK细胞发现一链长为78个氨基酸残基的小分子抗菌肽,并对肿瘤细胞亦具细胞毒性.本文报道从人大颗粒淋巴胞浆颗粒中分离抗菌多肽.取健康人外周新鲜血,用淋巴细胞分层液分离单个核细胞,离心洗涤,用RPMI 1640完全培养基(含rIL-21 000 U/mL),于37℃,5% CO2孵箱培养7 d.收集IL-2刺激的淋巴细胞,0.34 mol/L蔗糖匀浆,经差速离心获得胞浆颗粒,用5%乙酸提取酸性可溶物.电泳凝胶/琼脂糖弥散抗菌技术发现三条抗菌蛋白带.经制备性AU-PAGE获得HLP-1、和HLP-2和HLP-3等3个抗菌组分,琼脂糖弥散抗菌试验显示对大肠杆菌、绿脓杆菌和金色葡萄球菌等均具很强抗菌活性.SDS-PAGE分析显示HLP-3已为纯化分子,其分子量约为7 kD;HLP-2包含3个多肽,分子量范围5.6~8.8 kD;HLP-1组分相当复杂,包含6个多肽分子,分子量范围5.5~13.0 kD.
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基因芯片技术及其在临床医学研究中的应用
生物芯片由美国Affymetrix公司首先开发,在短短数年中,芯片技术进步迅速,并呈现发展高峰.所谓生物芯片是由固定于不同种类支持介质上的高密度的寡核苷酸分子、基因片段或多肽分子的微阵列组成,其中每个分子的位置及序列为已知,当荧光标记的靶分子与芯片上的探针分子结合后,可通过激光共聚焦荧光扫描或电荷偶摄影像机(CCD)对荧光信号强弱的检测而判断样本中的靶分子数量,以实现对化合物、核酸、蛋白质、细胞及其他生物组分的准确、快速和大信息量的筛检,其特点是高度平行性、多样性、微型化和自动化.
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急性脊髓损伤后aFGF、bFGF的表达
成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)在体外能促进多种中枢及外周神经元的存活及突起生长,体内也能促进神经元的修复与再生.FGF是1974年Gospadarowicz[1]从牛脑的垂体中分离纯化出的一种多肽分子.根据等电点的不同,FGF分为酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)两类.本文就aFGF与bFGF因子在脊髓中的分布情况与不同作用、急性脊髓损伤后aFGF、bFGF的不同表达以外对急性脊髓损伤体外应用FGF的实验性治疗方面加以综述.
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幽门螺旋杆菌与细胞因子
细胞因子的概念细胞因子(Cytkrines)是一类由免疫细胞和相关细胞(成纤维细胞、基质细胞、内皮细胞、上皮细胞、胶质细胞等)产生的调节细胞高活性多功能蛋白质多肽分子.免疫细胞是指参与免疫应答或与之相关的细胞.根据它们在免疫应答过程中所起的作用不同,免疫细胞可分为:1淋巴细胞它是免疫应答中起核心作用的免疫细胞,是一个很不均一的群体,至少有T细胞、B细胞和自然杀伤细胞三类.国际免疫学组织依据杂交瘤技术产生单克隆抗体,将对靶细胞抗原分子反应的单克隆抗体归为一个分化抗体群(Cluster of differentiation,CD),规定采用系统命名法.由CD抗体鉴定的抗原称CD分子.目前CD抗原数已超过150个之多.