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旋毛虫成虫可溶性抗原免疫小鼠攻击感染后的免疫应答
目的探讨旋毛虫成虫可溶性抗原(AWSAg)接种小鼠后诱发的免疫应答.方法制备旋毛虫AWSAg免疫小鼠,分别于攻击感染后7、14、21、28和35 d,动态观察免疫小鼠特异性IgG抗体水平、IL-2水平和T淋巴细胞亚群的变化.结果与非免疫鼠相比,免疫鼠血清特异性IgG抗体OD值在攻击感染后7 d明显升高,在观察期内一直高于非免疫鼠.感染后7d IL-2水平明显增高,达观察期内高值,21 d后才逐渐减少,在感染后28~35 d仍高于正常组.免疫鼠CD4+T细胞在攻击感染7d明显增加并保持不变,非免疫鼠CD4+T细胞及CD4/CD8比值明显较正常鼠减低.结论旋毛虫AWSAg免疫小鼠攻击感染后,出现细胞、体液免疫应答.
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一维和二维电泳分析斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原
人不是斯氏狸殖吸虫的适宜宿主,幼虫寄生后可引起多种肺外型感染,病原学检查困难[1],临床诊断主要依靠免疫学检查,除检测方法外,诊断用抗原的特异性是影响检测效果的关键因素.故分析和检测并殖吸虫的特异抗原组分,在并殖吸虫病的免疫诊断和抗原的分离纯化方面均具有重要意义.本文采用一维、二维电泳和免疫印迹技术分析斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原,试图鉴别特异的、高免疫原性斯氏狸殖吸虫蛋白和多肽,为开发特异、敏感的免疫学诊断方法、研制抗斯氏狸殖吸虫药物和疫苗提供参考资料.
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斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原dipstick诊断方法的建立
Dipstick是一种简便、快速的免疫诊断方法.本研究以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性蛋白Mr 22 000分子纯化抗原和自制的胶体金标记羊抗人IgG建立胶体金标记dipstick快速诊断法,探讨该抗原在dipstick快速诊断斯氏狸殖吸虫病中的应用价值.
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双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原的研究
目的建立双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原(Cag).方法采用两株抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,应用双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫CAg,并摸索该法的佳实验条件.对感染大鼠、小鼠、疑似和确诊广州管圆线虫病病例血清进行检测,评价方法的敏感性;对日本血吸虫、肺吸虫、旋毛虫、囊虫病人血清进行交叉反应试验,评价方法的特异性.结果 10μg/ml单抗包被,酶标记单抗1∶1 600稀释为佳工作浓度.利用该法检测不同血清广州管圆线虫循环抗原的敏感性为84.2%~87.2%,特异性为100%.结论建立的双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原具有敏感性高、特异性强和经济、简便易行等优点.
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广州管圆线虫成虫可溶性抗原诱导小鼠保护性免疫的研究
目的探讨广州管圆线虫成虫可溶性抗原诱导小鼠的保护性免疫,为广州管圆线虫病的免疫预防研究提供科学依据。方法以广州管圆线虫成虫可溶性抗原隔周腹腔注射免疫小鼠1次,共3次,末次免疫1w后,用300条广州管圆线虫第三期幼虫感染每鼠,攻击感染4w后解剖每鼠检获虫体,计算减虫率,并观察、测量检获虫体形态、大小。此外,还检测了小鼠体内血清特异性抗体IgG和血液嗜酸性粒细胞含量。结果免疫组小鼠与对照组比较,有极显著的减虫效果(P<0.01),800μg、400μg和200μg免疫原组小鼠的减虫率分别是44.0%、42.6%和18.7%。免疫组小鼠体内检获的虫体比对照组要少。免疫组小鼠血清抗体水平及血液嗜酸性粒细胞绝对值均高于对照组(P<0.01)。结论广州管圆线虫成虫可溶性抗原可诱导小鼠产生保护性免疫。
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旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠免疫保护作用的比较研究
目的比较旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠的免疫保护作用.方法收集人工感染大鼠小肠内的成虫,经研磨和冻融制备成虫可溶性抗原.采用体外培养的方法从培养液中提取旋毛虫成虫排泄分泌抗原.分别用两种抗原免疫小鼠,间隔1周共免疫3次,末次免疫后1周,每只小鼠攻击感染100条旋毛虫感染性肌肉幼虫.感染后1周检查小鼠小肠内成虫数量和雌虫生殖力,感染后5周检查肌肉幼虫负荷.结果成虫可溶性抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别为79.55%、62.25%和65.0%.成虫排泄分泌抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别是97.27%、86.60%和90.0%.结论实验结果表明旋毛虫成虫可溶性抗原和成虫排泄分泌抗原均能够诱导宿主产生较强的抗攻击感染的免疫力,但后者的免疫原性更强.