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丙型肝炎DNA疫苗研究进展
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒感染引起的一种重要的世界性传染病,目前尚无高效的特异性治疗方法,亟需寻求一种预防HCV感染的疫苗.HCV DNA疫苗是近年发展起来的新型疫苗之一,与传统的HCV蛋白质疫苗相比,具有多种优点.近年来,国内外学者纷纷构建HCV四个不同区段(核心区、包膜区、结构区及非结构区)的DNA疫苗,免疫动物后,部分已显示出保护性反应.本文主要介绍HCV DNA疫苗构建方面的进展及其保护性反应,并展望其发展前景.
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卵透明带避孕疫苗研究进展
哺乳动物卵透明带(zona pellucida, ZP)是由卵母细胞及颗粒细胞分泌并覆盖于卵母细胞及着床前受精卵外的一层基质,人和许多动物包括猪、鼠、兔等在内的ZP都是由3~5种糖蛋白组成,称为ZP1、ZP2、ZP3等。ZP蛋白在精卵结合及精子穿透卵透明带中起着非常重要的作用,影响受精过程的成败。ZP蛋白具有很强的抗原性,主动免疫动物可诱发产生抗体,其相应抗ZP抗体与ZP结合能干扰卵子和卵泡细胞间信息交流,使卵子失去与同种精子结合的能力。ZP是一个不影响激素水平的特异性的抗生育阻断位点,国内外已对ZP避孕疫苗进行多层次的研究。随着研究的不断深入,无疑将为人类生殖避孕、鼠类等有害动物不孕控制提供新思路和新途径。本文就ZP疫苗近年来的研究进展进行综述。
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单克隆抗体:生命科学的革命、治疗肿瘤的希望
1 单克隆抗体的概念及制备免疫反应是人类对疾病具有抵抗力的重要因素.当动物体受抗原刺激后可产生抗体.抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各种抗原分子具有很多抗原决定簇,因此,免疫动物所产生的抗体实为多种抗体的混合物.
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肾综合征出血热灭活疫苗大鼠效力试验模型
目前肾综合征出血热灭活疫苗效力试验采用家兔作为免疫动物,对疫苗免疫能产生较好的中和抗体和免疫荧光法(IFA)抗体应答,但购买和饲养家兔成本较高.实验用大鼠为汉坦病毒的敏感动物,我们已经报道汉滩病毒(HTNV)型(Ⅰ型)肾综合征出血热灭活疫苗免疫大鼠,观察表明大鼠对Ⅰ型疫苗的反应性良好,同型中和抗体应答类似于家兔,异型中和抗体和IFA抗体应答较家兔为好.我们继续研究汉城病毒(SEOV)型(Ⅱ型)和双价肾综合征出血热灭活疫苗在大鼠的免疫反应,并观察了疫苗的稳定性.
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AI免疫原制备及应用
血管紧张素I(angiotensin,AI)为10肽结构.AI正常生理浓度下没有生理活性,若在血浆浓度很高时,能刺激肾上腺髓质释放儿茶酚胺,作用于脑中枢神经,引起周围血管收缩,使血压升高,还对钠、水的重吸收产生影响[1].AI分子量为1295.69,属于半抗原,必须与大分子载体蛋白相结合制成免疫原,才能免疫动物诱发抗体的产生.本文对AI免疫原制备作一探讨.
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变性乙型肝炎病毒表面s抗原抗体的制备和应用
在新型乙型肝炎基因工程疫苗(s+pre s1,ss1)的研制中,对s抗原的免疫学鉴定至关重要,但我国现有的乙型肝炎病毒表面抗体不能有效地用于蛋白印迹法(Western blot)鉴定变性乙型肝炎病毒表面s抗原.常规的从SDS-PAGE凝胶上回收变性抗原多肽免疫动物,可诱导免疫应答,产生抗体,但从凝胶上回收的变性抗原量很少,无法用来大量制备抗血清;电泳结束后,切下含特异多肽的凝胶条,制成凝胶碎末,或凝胶转至硝基纤维素滤膜,剪下相应部分,溶于二甲基亚砜,再加佐剂免疫动物,整个方法操作步骤多、耗时长、切割相应多肽部位难以掌握精确[1].我们建立了一种新的抗变性乙型肝炎病毒(HBV)s抗原抗血清的制备方法,并把该方法制备的抗血清成功地应用于HBV s抗原的Western blot鉴定工作中.
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重组结核抗原痘苗病毒免疫次数和免疫途径对免疫原性的影响
卡介苗(BCG)是目前用于预防结核病的惟一疫苗,但其对成年人结核病的预防效果不理想.本研究前期工作已构建了5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组痘苗病毒,其免疫小鼠2次后均可激发针对结核杆菌抗原的特异性细胞免疫.然而,重组安卡拉痘苗病毒(MVA)是一活的病毒载体[1],此重组病毒是否能多次免疫动物以及多次免疫动物后能否产生更有效的免疫反应尚不清楚.
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人免疫球蛋白转基因小鼠自身免疫性重症肌无力模型的建立
重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是由乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,AchR) 抗体介导的自身免疫病.AchR抗体与神经肌肉接头处的AchR结合,通过抗原调变、激活补体导致突触后膜裂解而使AchR数量减少,结果出现肌肉收缩无力等症状.MG的动物模型--实验性自身免疫性MG(experimental autoimmune MG,EAMG)可经主动免疫动物富含AchR的电鳐(Torpedo)电器官制备的AchR(tAchR)诱导出.
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人抗鼠抗体效应对临床免疫学检测的影响
人抗动物抗体产生的原因为医源性与非医源性因素.医源性因素包括动物源性蛋白、胸腺肽、靶抗体造影剂、靶抗体药物、被动免疫动物血制品(如破伤风针、胰岛素、凝血因子Ⅷ)等;非医源性因素包括母婴传递、偶然或职业性原因与动物蛋白接触史(如兽医、牧区、食品加工人员、宠物饲养)、选择性IgA缺乏症患者食人牛奶及动物蛋白食品等.
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福氏佐剂的替代物和抗体生产
以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典方法.为了提高免疫效果,在免疫的时候,常辅以佐剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时间,使抗原缓慢释放,同时非特异性的促进局部吞噬细胞反应来增强动物的免疫效果.佐剂的类型较多,目前常用的还是福氏佐剂(Freund's Adjuvant,FA).它是一种对大多数抗原都有效的佐剂,但由于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用.因此,福氏佐剂只能在确实需要的情况下(如使用的抗原为小分子可溶性抗原或半抗原)和强佐剂活性时使用.
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肿瘤抗体治疗与基因抗体治疗的前景
早在1888年,von Behring新发现在白喉或破伤风毒素免疫动物后,其血清中可产生一种中和毒素的物质,从而开始进行抗体研究,他因此获得了第一届诺贝尔奖.但由于这种免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物,特异性不高,容易出现交叉反应,所以其应用受到限制,在随后很长一段时间,抗体技术并没有重大突破.直到1975年,Kohler和Milstein成功研究出杂交瘤技术(获诺贝尔奖),出现单克隆抗体(MAb),这才有了真正意义上的治疗性抗体,为肿瘤的治疗提供了一种新的方法--肿瘤的抗体导向治疗法.
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高效价兔抗羊免疫血清制备及其在实验教学中的应用
家兔经绵羊红细胞(SRBC)免疫后血清中可出现抗SRBC的抗体,采集免疫动物血液分离血清,即可获得抗SRBC 的抗血清。用 SRBC与相应抗血清混合,当有补体存在时,在一定条件下, SRBC被溶解破坏,故抗 SRBC 抗体又称为溶血素。动物免疫血清是医学教学、科研及临床实验工作中经常要用到的试剂。但目前市场上购买到的溶血素价格昂贵,效价也不高,因此为了节约经费,使用方便,提高实验课的教学质量,本实验室选取S RBC作为颗粒性抗原,在短时间内获得了高效价的免疫血清(溶血素),并取得了较好效果,现报告如下。
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短程免疫方案制备抗血清的效价观察
通过一定程序注射颗粒性抗原或可溶性抗原免疫家兔,是实验室制备多克隆抗血清的常用方法,制备的抗血清可用于实验条件下病原体的诊断以及免疫检测[1].虽然依据常规免疫方案可以制备出效价高、亲和力强的抗血清,但整个常规方案耗时近1个多月,也容易受到免疫动物健康状况的影响和饲养成本的限制.本试验分别以伤寒沙门菌O901诊断菌液、伤寒沙门菌H901诊断菌液作为免疫原,在不影响抗血清特异性和保证实验必需效价的基础上,缩短免疫注射周期,对家兔进行短程快速免疫,并对该方案制备的抗血清几何平均滴度进行观察,以探讨短程快速免疫方案的实效性.
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人用H5N1禽流感疫苗免疫动物效果观察
目的 将用禽流感毒种R1203株按3种生产工艺生产的疫苗进行动物接种,观察疫苗的免疫效果.方法 用不同剂量的3种工艺生产的禽流感疫苗,分别免疫大鼠和家兔,肌肉接种2针(隔14d),首针后14和28 d静脉采血,测定接种1针和2针后,动物血清中血凝抑制抗体和中和抗体的产生情况.结果 大鼠的抗体反应较家兔敏感;大鼠和家兔在疫苗接种1针后14d,都能产生血抑抗体,滴度可达1:40,但中和抗体滴度都很低,几乎测不到;接种2针后,血抑抗体或中和抗体反应都显著高于第1针;裂解-2苗接种大鼠和家兔后的抗体反应普遍高于另2种疫苗,且家兔量-效反应明显.结论 裂解-2疫苗优于其他2种;中和抗体能正确反应疫苗的质量;H5N1禽流感疫苗的效力试验可用于免疫家兔测定中和抗体和临床前研究的动物试验,用15 μg血凝素(HA)接种家兔2针,血清中和抗体滴度达1:40或以上.
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97、佐剂病
福氏完全佐剂是在液体石腊中加入死结核杆菌菌体成分组成的.把它和抗原混合在一起,研磨成油包水状态,再免疫动物,能增强对抗原免疫应答的物质.
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87、变态反应性脑脊髓炎
已知,接种狂犬疫苗以后,有时会发生脑脊髓炎.这是因为所用的疫苗是用含有动物脑组织的材料制成的,针对脑组织抗原而产生了免疫反应的缘故,从而对脑脊髓造成了损伤,如果将动物的脑组织混入福氏完全佐剂,然后免疫动物,也能诱发脑脊髓炎,将此称为实验性变态反应性脑脊髓(EAE).
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不同氢氧化铝含量的吸附白破二联疫苗的吸附度及免疫效果
按<中国生物制品规程>,应用精白类、精破类和Al(OH)3胶体溶液各3批,分别配制成不同Al(OH)3含量(1、2和3mg/ml)的吸附白破二联各3批{每批分别含精白类40Lf/ml,精破类20Lf/ml),并分别进行吸附度测定和免疫力试验.结果不同Al(OH)3含量的二联吸附度均为100%,免疫效果,白喉的活存率分别为80%、93%和80%(均为3批平均值);破伤风的抗毒素单位分别为2.7、3.1和2.7IU/ml(均为3批平均值).表明吸附精制白破二联疫苗中Al(OH)3含量在一定范围内,免疫动物的效果差异无显著意义.因此,适当减少白破二联疫苗中的Al(OH)3含量是可行的.
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严重急性呼吸道综合征相关冠状病毒疫苗的研制现状
新型冠状病毒作为严重急性呼吸道综合征暴发流行的病原体(SARS-CoV),目前仍无抗SARS-CoV的特效药物,因此疫苗的研究为预防SARS再次流行具有重大意义.目前研制的SARS-CoV疫苗有SARS-CoV灭活疫苗、SARS-CoV DNA疫苗、SARS-CoV腺病毒载体疫苗、重组SARS-CoV刺突蛋白-减毒痘苗病毒等.体外及体内动物攻毒保护实验结果显示,所研制的SARS疫苗均可诱生体液和细胞免疫应答,并对免疫动物具有保护性作用.本文将近期有关研究结果作了综述.
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乙型肝炎病毒S基因单独和联合白细胞介素-12诱导小鼠产生特异性免疫应答
核酸疫苗是用带有目的抗原基因的重组表达载体免疫动物,使目的抗原在体内持续表达,诱导机体产生特异性体液和细胞免疫应答[1].我们用含乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)主蛋白编码基因的核酸疫苗单独或与白细胞介素-12(IL-12)联合免疫Balb/c小鼠,检测小鼠的抗-HBs和HBsAg特异性细胞毒活性.
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pMAL-C2融合表达幽门螺杆菌HspA-UreB重组蛋白
幽门螺杆菌(Hp)有效保护性抗原有多种,如:热休克蛋白(Hsp)、尿素酶(Ure)、空泡毒素(VacA)、毒素相关蛋白(CagA)及过氧化氢酶等,但单独免疫动物时保护性均不理想,而使用多种抗原成分联合免疫,可使100%的小鼠避免感染Hp[1].本研究将Hp的两个主要抗原成分HspA和UreB的编码基因共同插入一个融合表达载体pMAL-C2,使其融合表达,为Hp基因重组疫苗的研究奠定基础.