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丙型肝炎DNA疫苗研究进展
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒感染引起的一种重要的世界性传染病,目前尚无高效的特异性治疗方法,亟需寻求一种预防HCV感染的疫苗.HCV DNA疫苗是近年发展起来的新型疫苗之一,与传统的HCV蛋白质疫苗相比,具有多种优点.近年来,国内外学者纷纷构建HCV四个不同区段(核心区、包膜区、结构区及非结构区)的DNA疫苗,免疫动物后,部分已显示出保护性反应.本文主要介绍HCV DNA疫苗构建方面的进展及其保护性反应,并展望其发展前景.
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HIV-1 p24抗原不同位区的抗体应答
HIV-1病毒编码3种结构蛋白,即核心区(gag区)、包膜区(env)及酶区(pol).在病毒感染机体后,体内的免疫系统对不同的编码蛋白产生应答,目前研究较多的为抗体应答[1].
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丙型肝炎病毒细胞和动物模型研究进展
丙型肝炎病毒(HCV)为黄病毒科病毒的一条RNA正链.整条负链的中间编码区域、包膜、非结构蛋白都可以进行复制,包膜区包括超变量区域,与序列的变异有关.丙型肝炎"基因准种"的出现对疫苗和包括针对逃避变异抗病毒药物的开发增加了难度.
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上海地区Ⅱ、Ⅲ型丙型肝炎病毒包膜区cDNA序列分析
目的 分析上海地区丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)II、Ⅲ型包膜区cDNA序列变异.方法 采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HCV包膜区E1、E2/NSl片断(1 005bp),在373DNA全自动测序仪上进行了序列分析.结果 HCV-E1、E2/NSl区核苷酸和氨基酸同源性比较显示:上海株Ⅱ型、Ⅲ型间同源性分别为62.48%和59.10%;上海株与国内外同型株间分别为85.97%~87.36%和83.38%~86.57%;上海株与国内外不同型株间分别为61.49%~70.95%和59.10%~78.21%.此外,共发现5个变异较大的区域,其中两个是国际公认的高变区(HVRl及HVR2),另外3个为首次报道(第251~258、297~301、461~467位氨基酸).结论 HCV-E1、E2/NSl序列变异大,这对其疫苗设计有参考价值.
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献血者体内携带的HCV包膜区基因同源性分析
目的建立HCV包膜区基因同源性分析方法,探讨献血者体内携带的HCV包膜区基因变异情况. 方法通过RT-PCR和序列测定,对9例献血者体内携带的HCV基因组中高变的包膜区(E1和E2/NS1区)基因变异进行了横断面的同源性分析. 结果不同型HCV毒株间的同源性只有56.99%~68.80%;同一亚型内毒株间的同源性为80.33%~96.40%,且有地区性分布的特点. 结论在无症状的HCV携带献血者中,不同HCV毒株间高变区基因的变异相当大,以此可在分子水平上对丙型肝炎的传播途径进行确认,对供受者间输血后丙型肝炎的因果关系进行鉴定.
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慢性肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核心区和包膜1区基因变异研究
目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心(C)区和包膜1(E1)区变异与其感染慢性化的关系。方法 10例HCV慢性感染者和2例急性感染者血标本,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HCV的C区羧基端、E1及E2区氨基端片断(1kb),扩增产物进行克隆,以单链构象多态性(SSCP)和异质性双体(HD)分析对每份血清的30个克隆的C/E1区准种(quasispecies)进行筛选,挑选每例标本HCV的优势株与劣势株序列进行测定,并分析推导的氨基酸序列。结果各例患者血清中HCV的C/E1区扩增片段形成的SSCP条带间差异明显,而HD与同源双体之间差距不明显。HCV急性感染者和慢性感染者血清病毒C区无发生变异,后者E1区氨基酸替换率为1.32%, 但功能性氨基酸无改变。结论 HCV的E1区序列变异以准种形式存在,但与免疫逃避可能无关。