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免疫刺激DNA序列与过敏原联用对哮喘小鼠模型气道过敏性炎症的作用
目的观察免疫刺激DNA序列(ISS-DNA)单用和与过敏原卵白蛋白(OVA)合用,对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠模型气道过敏性炎症的作用及作用维持时间.方法 BALB/c小鼠36只,分ISS组(A组)12只、ISS+OVA组(B组)12只、OVA组(C组)6只和生理盐水(NS)组(D组)6只.A、B、C组用OVA致敏及激发.A组和B组根据注射次数再分A1、B1 1次注射组(1次腹腔注射ISS-DNA 100 μg或ISS-DNA 100 μg+OVA 10 μg)和A2、B2 2次注射组(2次腹腔注射ISS-DNA或ISS-DNA+OVA).各组在第1次激发后6周中,每周采血1次测特异性IgE,后处死小鼠测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数及分类,肺组织病理检查,检测脾细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)的水平.结果 BALF中嗜酸细胞(EOS)数A1组为(2.39±0.81)×104/ml;A2组为(2.62±0.77)×104/ml;B1组为(1.80±0.12)×104/ml;B2组为(1.84±0.67)×104/ml, 与C组[(12.43±2.13)×104/ml]比较差异有显著性(P<0.05).脾细胞分泌的IFN-γ A1组为(510±102) pg/ml;A2组为(492±98) pg/ml; B1组为(532±120) pg/ml;B2组为(469±132) pg/ml,与C组[(194±80) pg/ml]比较差异有显著性(P<0.05).血清IgE 前4周B组与C组比较差异有显著性(P<0.05),而A组与C组比较差异无显著性(P>0.05).上述各项指标1次注射组和2次注射组之间比较差异无显著性(P>0.05).结论 ISS-DNA对哮喘小鼠模型气道过敏性炎症有抑制作用. ISS-DNA与特异性致敏原OVA合用比单用ISS-DNA效果更好.
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人工合成免疫刺激DNA联合HBsAg DNA疫苗在HBV转基因鼠的免疫应答研究
目的:探讨免疫刺激DNA序列联合基因免疫在HBV转基因鼠的免疫应答.方法:用人工合成硫代修饰的免疫刺激DNA寡核苷酸(CpG ODN)与HBV S区基因真核表达载体(V-HBs)联合免疫HBsAg转基因鼠,通过ELISA观察小鼠血清HBsAg及抗-HBs抗体水平,并用免疫组化(SP法)及病理HE染色观察小鼠肝组织HBsAg表达量的改变及肝组织炎症活动度.结果:V-HBs联合CpG ODN组6只免疫鼠中有2只血清抗-HBs抗体阳性,其平均效价为(56.21±15.16)mU/ml,血清HBsAg浓度在免疫后第8周时有2只转阴,而单用V-HBs组及V-1012对照组小鼠血清抗-HBs抗体均阴性、HBsAg含量无明显降低.V-HBs+CpG ODN组肝组织HBsAg的表达量低于V-HBs组及对照组,并可见大量炎细胞浸润,炎症组织活动度积分明显高于V-HBs组及对照组.结论:CpG ODN联合V-HBs可增强其免疫应答及抗病毒效应.
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免疫刺激DNA序列对粉尘螨诱导的Th1和Th2细胞因子的调节作用
目的 研究免疫刺激DNA序列(ISS)对螨性过敏性哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)经粉尘螨变应原(Df)诱导的Th1和Th2细胞因子的调节效应。方法 分离螨性过敏性哮喘患者及正常人PBMC，加入ISS和Df刺激培养；以酶联免疫吸附试验检测培养上清中IFN-γ、IL-12及IL-5含量；用荧光免疫酶标法检测患者血清中Df特异性IgE，并作统计相关性分析。结果 无论正常人还是患者PBMC加人ISS和Df刺激培养后，其上清中IL-12、IFN-γ的含量较Df和对照序列刺激组明显增高，而IL-5却明显降低。正常对照组PBMC经ISS及Df刺激后产生的IFN-γ、IL-12水平明显高于患者组，而IL-5则相反。患者组PBMC经ISS及Df刺激后产生的IL-12与IFN-γ呈明显正相关。结论 ISS对正常人及螨性变态反应患者PBMC具有显著增强尘螨变应原诱导的Th1细胞因子表达，并抑制Th2细胞因子产生的作用，在尘螨变态反应疾病的治疗中具有潜在的临床价值。
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免疫刺激DNA序列与尘螨过敏原联用治疗变应性鼻炎的实验研究
目的:观察免疫刺激DNA序列(ISS)与尘螨过敏原(Df)合用,对Df致敏的变应性鼻炎(AR)大鼠模型鼻腔过敏性炎症的作用及其维持时间.方法:SD大鼠32只,分ISS组(A组)、ISS加Df组(B组)、Df组(C组)和正常对照组(D组),每组各8只.A、B、C组用Df致敏及激发.各组在第1次激发后6周中,每周采血1次测特异性IgE,后处死大鼠,组织病理学方法观察鼻黏膜改变,ELISA测血清IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-12水平.结果:A、B组IFN-γ和IL-12水平明显高于C组(P＜0.01),而A、B组IL-4和IL-5水平明显低于C组(P＜0.01).血清特异性IgE前5周B组与C组比较差异有统计学意义(P＜0.01),第6周B组Df特异性IgE水平有回升,但与C组比较差异仍有统计学意义(P＜0.05);而A组与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:ISS与Df合用对Df致敏的AR大鼠模型鼻腔过敏性炎症有很好的抑制作用,其抑制作用可维持6周.
