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人肝脏间质树突状细胞的分布与形态学观察
目的:观察人肝脏间质树突状细胞(DC)的形态、数量和分布特点,为进一步认识DC在肝脏免疫微环境中的构成特点提供依据.方法:运用光镜、电镜观察与免疫组化标记(CD11c、CD205、CD209)方法,观察研究人体肝脏间质DC的形态、数量和分布.结果:人肝脏间质DC超微形态具有特征性的胞质突起,细胞器不发达;CD11c标记DC的阳性率为(1.80±0.35)%,集中分布于肝汇管区、中央静脉旁和肝被膜下间质中;表达CD205和CD209的成熟DC含量较少,其阳性率分别为(1.33±0.21)%和(1.15±0.16)%,多位于肝汇管区血管周围.结论:间质DC是一种免疫前哨细胞,是肝脏免疫微环境的重要组成部分.
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树突细胞特异性非整合素与人免疫缺陷病毒
树突细胞特异性非整合素(DC-SIGN,dendritic-cell specific ICAM-3 grabbing non-intesrin),又称CD209,是一种主要由树突状细胞(dendritic-cell,DC)汾泌的细胞膜表面分子.DC-SIGN属Ⅱ类C-型凝集素膜受体(CRL)能与细胞间黏附分子(intercelluar adhesion molecule,ICAM)以及病毒、细菌、寄生虫等多种病原结合,如能与人免疫缺陷病毒表面蛋白gp120,并介导病毒感染靶细胞.研究表明DC-SIGN在HIV传播与致病中有重要作用.
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CD1a、CD209及MHCⅡ在新生儿指皮组织中的表达及意义
目的:探讨新生儿指尖皮肤及皮下组织中树突状细胞的形态、数量和分布情况.方法:5例尸检新生儿无名指指皮组织样本,行免疫组织化学染色(CD1a、CD209和MHC Ⅱ标记),光镜观察.结果:新生儿指皮组织中,阳性细胞呈棕褐色,大小不等、形态多样,有数量不等的突起,呈散在或灶带状分布.CD1a标记的细胞阳性率为(23± 11.9)％,多位于表皮乳头周围,血管外膜以及真皮疏松结缔组织中;CD209标记的细胞阳性率为(30±7.7)％,多位于真皮层内,血管神经分叉处,血管外膜,环层小体被囊结缔组织中;MHC Ⅱ的标记的细胞阳性率(8±1.9)％,多位于血管外膜及周围疏松结缔组织中.结论:稳态下,新生儿皮肤组织中存在多种分化发育程度不同的DCs(且以不成熟DCs为主),是皮肤免疫微环境的重要组成部分.
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疫区人群树突状细胞CD209启动子多态性及其与登革病毒感染的相关性分析
目的 以深圳疫区人群为研究对象,分析CD209启动子(-139、-336)多态性与登革病毒(DENV)感染之间的相关性.方法 收集疫区DENV感染者及健康对照者的抗凝血标本,提取血液基因组DNA,PCR扩增CD209启动子区基因判断,采用Spe I酶切 、错配PCR及DNA测序等方法对-139及-336位点的多态性进行分析,采用Fisher′s检验分别计算CD209-139位点及-336位点不同基因型及等位基因型与DENV感染的相关性.结果 以深圳市人群为对象,登革病毒感染者在CD209启动子-139位点出现A等位基因的频率为74.5％(76/102),显著高于健康人群(43.8％,89/203),差异有统计学意义(P<0.05),提示疫区人群CD209-139A与DENV感染明显相关(OR=1.659,95％CI:1.017～2.706,P<0.05);-336基因多态性则与DENV易感性没有显著相关性.结论 疫区人群CD209启动子-139A可能会增加DENV易感性.
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登革病毒感染人原代树突状细胞(CD209,-139A/-336A)模型的建立
目的 建立以人原代树突状细胞(dendritic cells,DCs)为宿主的登革病毒(dengue virus,DENV)感染模型.方法 采集基因型为CD209,-139A/-336A的人抗凝血标本,分离获得DCs前体细胞,利用rhGM-CSF及rhIL-4诱导,获得未成熟DCs.瑞氏染色鉴定DCs的形态,流式细胞术鉴定DCs的分化效率,淋巴细胞增殖实验鉴定DCs的生物学功能.以Ⅰ型登革病毒GZ2002株为模式病毒进行病毒感染实验,建立并评估以人原代DCs为宿主的登革病毒感染模型.结果 分离获得的DCs前体细胞经细胞因子刺激后成功分化为未成熟DCs,分化效率高达90％.获得的DCs具有典型的细胞形态及生物学功能,可有效刺激淋巴细胞增殖.登革病毒GZ2002株能成功感染诱导获得的原代DCs,促进DCs成熟,并复制产生感染性子代病毒,证明细胞感染模型成功建立.结论 成功建立以DCs为宿主的登革病毒感染模型.
