首页 > 文献资料
-
重组人甲状旁腺素1-34治疗绝经后骨质疏松症的临床研究
目的 观察重组人甲状旁腺素 1-34 ( recombinant human parathyroid hormone 1-34 )应用于绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者的临床疗效.方法 筛选出68例绝经后骨质疏松症患者,所有患者入组后均口服元素钙500 mg/d和维生素D 200 U/d,连续服用26周后加用皮下注射重组人甲状旁腺素1-34(特立帕肽)20 μg /d,再连续治疗26周,于应用特立帕肽治疗前及治疗后的13 和26 周测定腰椎(L1-4)和股骨近端骨密度(BMD),采静脉血测定血清骨钙素(OC)、碱性磷酸酶(AKP)水平,应用疼痛视觉模拟评分法(VAS 评分)评价患者的疼痛程度,并记录不良反应情况.结果 68位患者均完成全疗程治疗.应用特立帕肽治疗13周时,腰椎L1-4、股骨颈、大粗隆和股骨干骨密度改善不明显( P＞0. 05),血清骨钙素和碱性磷酸酶较治疗前升高(P＜0. 05),疼痛缓解明显(P＜0. 05);治疗26周时,腰椎L1-4和股骨颈骨密度较治疗前明显增高(P ＜0. 05),而大粗隆和股骨干骨密度改善不明显(P＞0. 05),血清骨钙素和碱性磷酸酶呈持续升高趋势(P＜0. 05),疼痛明显减轻(P＜0. 05).治疗期间不良反应的情况均较轻微,没有给予特殊处理即自行缓解.结论 连续26周使用重组人甲状旁腺素1-34能有效地促进患者骨形成,缓解骨质疏松症患者疼痛症状,提高患者腰椎、股骨骨密度.
关键词： 绝经后骨质疏松症 重组人甲状旁腺素1-34 骨代谢指标 骨密度 -
肽图分析在重组人甲状旁腺素1-34产品质量控制中的应用
目的通过肽图谱分析,鉴定重组人甲状旁腺素1-34产品一级结构的完整性和准确性.方法采用胰蛋白酶裂解-反相高效液相色谱法测定肽图;用LC-MS/MS和N端氨基酸测序鉴定产品氨基酸序列.结果建立重组人甲状旁腺素1-34产品肽图测定法,并鉴定出肽图异常产品的氨基酸序列.结论肽图分析能有效地控制重组人甲状旁腺素1-34产品一级结构的完整性和准确性,对该产品的质量控制具有重要意义.
-
重组人甲状旁腺素1-34对去卵巢大鼠骨质疏松的作用研究
目的：探讨重组人甲状旁腺素1-34(hPTH1-34)对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法50只7个月龄SD健康雌性大鼠，30只行双侧卵巢摘除术，20只做假手术(SHAM)，12周后各处死10只证实骨质疏松造模成功。余20只双侧卵巢摘除大鼠随机分为去卵巢(OVX)安慰剂组10只和hPTH1-34治疗组10只，10只SHAM组作对照。hPTH1-34治疗组剂量为20μg/kg，皮下注射，每周注射3次。OVX安慰剂和SHAM组皮下注射0.5 mL生理盐水，每周注射3次。治疗3个月后，测定并比较三组股骨、腰椎骨密度(BMD)、血清钙、磷、骨源性碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(Trap-5b)水平。结果 hPTH1-34治疗组股骨和腰椎BMD较OVX安慰剂组明显升高[(0.151±0.008)g/cm2比(0.135±0.013)g/cm2，(0.181±0.010)g/cm2比(0.159±0.008)g/cm2，P<0.01]，血清钙、磷、BALP、Trap-5b水平明显高于OVX安慰剂组(P<0.05或P<0.01)，与SHAM组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hPTH1-34通过刺激成骨细胞的活性，抑制破骨细胞，可显著增加BMD，对去卵巢大鼠骨质疏松有效。
关键词： 重组人甲状旁腺素1-34 骨质疏松症 骨密度 骨转换指标 -
重组人甲状旁腺素1-34分子量测定方法的研究
分别采用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)、Tricine-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(Tricine-SDS-PAGE)和分子排阻色谱法(SEC)测定重组人甲状旁腺素1-34的相对分子质量,为制定该品种的质量标准提供依据.MALDI-TOF/MS测定基质溶液为α-氰基-4-羟基肉桂酸(a-cyano-4-hydroxy-cmnamic acid,CCA);Tricine-SDS-PAGE电泳采用Tris-tricine电极缓冲系统;SEC测定色谱柱为TSK-GELG2 000 SWXL(300mm×7.8mm,5μm);流动相为三氟乙酸-乙腈-水(0.05:20:80);检测波长为215nm;流速为0.5 mL·min-1.结果:质谱法测定结果准确,实验值与理论值一致,误差±1;Tricine-SDS-PAGE测定结果与理论值基本一致,误差小于10%;但SEC法测定结果与理论值偏差较大.质谱法适用于产品的质量控制.
-
重组人甲状旁腺素1-34胰蛋白酶切肽图谱分析
目的:对重组人甲状旁腺素1-34进行肽图谱测定,以确证一级结构和比较不同批产品间一级结构的一致性.方法:运用梯度洗脱/反相高效液相色谱法对样品进行纯度检查和肽图谱测定.结果:建立了重组人甲状旁腺素1-34的胰蛋白酶水解肽图谱HPLC测定方法,3批样品的肽图谱均与对照品一致.结论:建立的肽图测定方法简便、准确、重现性好,适用于产品的质量控制.
关键词： 重组人甲状旁腺素1-34 肽图谱 胰蛋白酶切 高效液相色谱法 一级结构 -
重组人甲状旁腺素1-34联合钙尔奇D治疗绝经后女性骨质疏松疗效观察
目的 研究重组人甲状旁腺素1-34(recombinant human parathyroid hormone 1-34,rhPTH1-34)联合钙尔奇D治疗绝经后妇女骨质疏松的治疗效果.方法 84例绝经后骨质疏松妇女被随机分为实验组和对照组,每组均有患者42例.实验组采用rhPTH1 34)联合钙尔奇D治疗,对照组仅采用钙尔奇D治疗,疗程均为6个月.观察两组患者治疗前后骨密度变化、血清钙、磷和碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)、骨痛症状变化和治疗期间的骨折发生率.结果实验组治疗后的骨密度(T值)较治疗前增加,差异具有统计学意义(P<0.05);并且实验组治疗后的骨密度(T值)较对照组治疗后的骨密度(T值)增加,差异具有统计学意义(P<0.05).实验组和对照组治疗后ALP的浓度均高于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05),并且实验组治疗后ALP的浓度高于对照组治疗后,差异具有统计学意义(P<0.05).实验组的骨痛治疗有效率为66.67%;对照组为50%,实验组的有效率高于对照组,差异具有统计学意义(χ2=4.04,P<0.05).结论 rhPTH1 34联合钙尔奇D能够有效的提高绝经后女性的骨密度,减少骨质疏松的症状.
关键词： 重组人甲状旁腺素1-34 骨质疏松 绝经后女性 -
HPLC法测定重组人甲状旁腺素1-34肽含量及有关物质
目的:用高效液相色谱法测定重组人甲状旁腺素1-34原液和制剂的肽含量及有关物质.方法:采用Zorbax 300SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以流动相A:水-乙腈-三氟乙酸(990:10:1),流动相B:水-乙腈-三氟乙酸(10:990:1)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长215 nm,柱温37℃.结果:重组人甲状旁腺素1-34浓度在26.25～841.5μg·mL-1范围内,与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),低检测限为131 ng,高、中、低3种浓度的平均回收率范围为99.5%～100.6%,RSD为0.52%～0.72%(n=3).结论:方法简便,快速,准确,可靠,可作为本品的质量控制方法.
-
重组人甲状旁腺素1-34肽谱及一级结构的液相色谱/电喷雾离子化质谱法分析
目的:采用液相色谱/电喷雾质谱联用法(LC-ESI-MS/MS)对重组人甲状旁腺素1-34(rh-PTH 1-34)进行肽谱及一级结构分析.方法:用LC-ESI-MS法测定相对分子质量,并在线分析其胰蛋白酶和V8蛋白酶酶解质量肽谱;结合质谱源内碰撞诱导电离技术解析酶解肽段的氨基酸序列.结果:相对分子质量测定值与理论值一致;胰蛋白酶和V8蛋白酶酶解肽段氨基酸序列与理论值基本一致,序列覆盖率分别为97%和88%.结论:LC-ESI-MS/MS联用法为基因重组多肽类药物的一级结构分析和质量控制提供了新途径.
