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成骨蛋白-1对髓核抽吸术后兔腰椎间盘组织病理变化的影响
目的:观察成骨蛋白-1(osteogenic protein-1,OP-1)对髓核抽吸术后兔椎间盘组织病理变化的影响.方法:32只日本大耳白兔,用21号针头行L1/2、L3/4椎间盘后外侧穿刺,抽吸出部分髓核组织,L3/4用微量注射器注射OP-1 25μl作为实验椎间盘(OP-1组),L1/2注射25μl生理盐水作为对照椎间盘(Saline组),L2/3作为正常对照椎间盘(正常组),术后2周、4周、8周、12周分别随机处死8只兔,每只取L1/2、L2/3和L3/4椎间盘,切片,行Masson染色,观察椎间盘组织病理学变化情况.结果:正常对照组椎间盘髓核组织胶原稀疏、排列有序,细胞可呈岛状分布,纤维环胶原纤维排列整齐,无扭曲及无分层现象,术后2周、4周、8周、12周椎间盘组织病理变化不明显.Saline组椎间盘术后2周时髓核部分缺失,胶原排列紊乱,出现大量分布不均匀的无定型颗粒;术后4周髓核组织裂隙形成,出现较多的类软骨细胞,胶原纤维扭曲严重;术后8周髓核组织广泛裂隙,胶原排列极其紊乱,出现介于类软骨细胞及纤维细胞之间的细胞,较明显的分层裂隙,胶原纤维极度扭曲,部分断裂;术后12周凝胶状髓核组织呈现明显纤维化,髓核内出现较多纤维样细胞,类软骨细胞数量明显减少,纤维环出现巨大分层裂隙,伴有部分纤维环断裂.OP-1组椎间盘术后2周髓核胶原排列尚有序,髓核细胞仍较多,纤维环形态接近正常;术后4周髓核组织轻微裂隙,胶原排列紊乱,髓核细胞减少,出现类软骨细胞,内层纤维环胶原纤维轻度扭曲;术后8周髓核组织较多裂隙,胶原扭曲,类软骨细胞增多,内层纤维环胶原纤维明显扭曲,排列紊乱;术后12周时类软骨细胞仍较多,出现少量介于类软骨细胞与纤维细胞之间的细胞,全层纤维环胶原纤维扭曲,排列紊乱,但外层纤维环仍完整,纤维环无巨大裂隙出现.结论;OP-1能延缓后外侧纤维环穿刺髓核抽吸术后兔腰椎间盘髓核细胞及纤维环的退变.
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成骨蛋白-1对髓核抽吸术后兔腰椎间盘影像学改变的影响
目的:观察成骨蛋白-1(osteogenic protein-1,OP-1)对髓核抽吸术后椎间盘影像学改变的影响.方法:32只日本大耳白兔随机分成2周、4周、8周、12周4组,所有兔子用21号针头行L3/4椎间盘后外侧穿刺,抽吸出部分髓核组织,用微量注射器注射OP-1 25μl作为实验组(OP-1组),行L1/2椎间盘穿刺抽吸部分髓核组织并注射25μl生理盐水作为对照组(Saline组),术后2周、4周、8周、12周时按照分组取8只兔子行腰椎侧位X线摄片检查,测量施术椎间隙高度并计算椎间盘高度指数(DHI),行正中矢状位MRI检查,观察T2加权信号强度改变.结果:X线检查结果表明,OP-1组及Saline组术后2周、4周、8周、12周椎间盘高度呈降低趋势,但OP-1组较Saline组高度降低缓慢,各时间点两组DHI差异显著(P<0.05);MRI检查结果表明,OP-1组椎间盘术后2周、4周、8周、12周的髓核信号强度均较同期的Saline组椎间盘髓核信号强度高,二者Thompson评分结果差异显著(P<0.05).结论:OP-1能延缓后外侧纤维环穿刺髓核抽吸术后兔椎间盘X线高度的降低和MR1 T2加权信号强度的减低.
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成骨蛋白-1在腰椎融合术中应用的实验研究
目的:探讨成骨蛋白-1(OP-1)在脊柱融合术中的作用.方法:选用12只成年猕猴接受腰椎融合术,实验组、对照组分别采用OP-1加自体骨、单纯自体骨植骨.术后当日和术后4、8、12、16、20周分别拍腰椎正位片,观察植骨生长的情况.术后12周和20周分批处死动物,取脊柱标本进行生物力学和组织学研究.结果:术后第12周X线检查发现,OP-1组中,3只猕猴获双侧牢固融合,2只单侧牢固融合,1只部分融合;对照组只有1只获单侧牢固融合.实验组的植骨融合效果明显优于对照组,而且融合时间也明显提前,但两组的扭转刚度无显著性差异(P>0.05).组织形态学评估发现,实验组的总平均成骨值为0.87+0.10,对照组为0.45+0.20,两组的成骨值有显著性差异(P<0.01),实验组的成骨活性明显高于对照组.结论:在无脊柱内固定的条件下,OP-1对脊柱后外侧融合具有显著的促进作用,可提高融合效率,缩短融合时间.
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对成骨蛋白-1在骨科应用中的安全性评价
成骨蛋白-1(OP-1)具有很强的骨诱导活性,在许多动物模型中,现已将其用于骨缺损和骨折的治疗.FDA已经批准OP-1 putty作为脊柱融合术的载体材料,植入外源性rhOP-1及其载体后,机体可能产生的免疫反应及其他副作用对于成骨蛋白-1在临床应用起了一定的限制作用.本文就其在骨科应用中的安全性进行综述.
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成骨蛋白-1及其在髋关节重建术中应用的研究进展
成骨蛋白-1(OP-1)又称骨形态发生蛋白-7(BMP-7),具有高效的骨诱导作用.在髋关节重建术中,OP-1能诱导大量新骨的早期形成、促进移植骨与宿主骨的融合及加强固定植入物等作用.作者综述了OP-1的分子生物学特性及其在髋关节重建术中的应用.
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人成骨蛋白-1成熟肽在大肠杆菌中的克隆、表达和诱骨活性测定
目的:扩增、克隆人成骨蛋白-1(human osteogenic protein-1,hOP-1)成熟肽cDNA基因,并利用大肠杆菌表达hOP-1成熟肽.方法:PCR扩增hOP-1成熟肽cDNA基因,将其克隆入受控于含有PRPL启动子的温控型大肠杆菌表达载体pDH,构建成的重组质粒pDOPm以大肠杆菌DH5α为宿主菌进行温度诱导表达,表达产物纯化和复性后,以小鼠肌袋模型检测诱骨活性.结果:扩增得到hOP-1成熟肽基因;含重组质粒pDOPm的工程菌经42℃诱导后在SDS-PAGE上出现一条新蛋白条带,分子量约为16ku,表达量占菌体总蛋白的21%,以包涵体形式存在,经纯化和复性处理,得到纯度高于85%、具有良好异位诱导成骨活性的hOP-1成熟肽.结论:成功克隆出hOP-1成熟肽基因,并在大肠杆菌中得到高效表达,复性后具有诱骨活性.
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成骨蛋白-1在人牙髓组织中的表达研究
目的:探讨成骨蛋白-1在正常人牙髓组织中的免疫定位、分布规律.方法:采用免疫组织化学技术,检测正常人牙髓组织中成骨蛋白-1表达.结果:正常人牙髓组织中成牙本质细胞成骨蛋白-1呈强阳性染色,毛细血管内皮细胞呈阳性表达,邻近成牙本质细胞的少数牙髓细胞可见阳性染色.结论:成骨蛋白-1参与成牙本质细胞的合成和分泌,在诱导新生牙本质样细胞形成和分化过程中可能起重要作用.