首页 > 文献资料
-
人肝癌细胞株与正常肝细胞株MicroRNA差异表达谱研究
目的 建立SMMC-7721人肝癌细胞株与CCC-HEL-1人正常肝细胞株MicroRNA(miRNA)差异的表达谱,确定差异的miRNA,为进一步研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用和肝癌的治疗提供新的线索.方法 体外培养SMMC-7721人肝癌细胞株和CCC-HEL-1人正常肝细胞株.用TRIzol法提取细胞的总RNA.用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳对RNA进行质量检测.用miRNA芯片技术检测细胞株中miRNA表达.用实时PCR对感兴趣的miRNA进行验证.结果 芯片筛选结果显示肝癌细胞株中上调2倍以上的miRNA有154个,4倍以上的miRNA有64个,10倍以上的miRNA有26个;下调2倍以上的84个,下调的4倍以上的22个,下调5倍以上的有10个,下调10倍以上的一个.实时PCR验证结果提示hsa-miR-205和hsa-let-7f在肝癌中上调2.7和2.3倍.结论 SMMC-7721和CCC-HEL-1细胞株之间存在差异性表达的miRNA分子.在建立的两株细胞miRNA差异表达谱中,发现hsa-miR-205和has-let-7f在肝癌中明显上调.
-
用小鼠作小核糖核酸的实验研究
科学家经过多项研究发现,一些长度较短的核糖核酸,即所谓"小核糖核酸"能够对细胞和基因的很多行为进行控制,比如打开和关闭多种基因,删除一些不需要的DNA片段等.科学家们称这种现象为RNA干扰.这个名词是从英文RNA interference翻译过来的.这一重大发现表明,小核糖核酸分子掌管很多细胞中的遗传功能,因此,有望为科学家提供操作干细胞的新工具,还可以研制治疗癌症等由基因组错误所导致的疾病的新方法.下面举几个用RNA干扰技术治疗心血管疾病、遗传病和癌症等研究的实例.
-
microRNA概述及其研究进展
microRNA是一类长约20~22个核苷酸的非编码小RNA，能够在转录后水平调控基因表达，在细胞衰老、疾病发生发展等多种生命进程中具有重要的调控作用，在抗衰老和多种疾病治疗方面具有巨大的应用潜力。近年来， microRNA在组织工程等领域均成为研究热点。本文对microRNA的生物合成过程、作用机制，及其与衰老相关疾病的关系和临床应用进展进行综述。
-
高通量测序筛查特发性膜性肾病患者外周血细胞microRNA的差异性表达
目的:寻找特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者外周血单个核细胞小核糖核苷酸(microRNA)的差异性表达以及发生碱基突变的难易度.方法:运用高通量测序技术分别对IMN患者和健康对照者(NC)的microRNA进行测序,构建IMN与NC组之间microRNA差异性表达谱.并对两组的microRNA进行碱基编辑分析,寻找发生了碱基突变的microRNA,比较IMN与NC组microRNA碱基突变的难易程度.结果:通过构建表达谱,找到了has-miR-208b、has-miR-195-3p、has-miR-23b-5p、has-miR-95、has-miR-503、has-miR-449a、has-miR-486-3p与has-miR-27 8个microRNAs具有差异性表达.2组共同表达的41个microRNA中,IMN比NC更容易发生碱基编辑而引起碱基突变.结论:IMN患者与健康对照者的microRNA存在着差异性表达,差异性表达的microRNA特异性很高,可以作为深入研究IMN发病机制的靶点.IMN患者相比健康对照者更容易发生microRNA碱基编辑引起碱基突变,这些发生碱基突变的microRNA可能用于解释IMN的病因基础.
-
膜性肾病差异性表达microRNA的靶基因功能分析
目的：探讨膜性肾病（MN）差异性表达microRNA的靶基因主要参与的Gene Ontology（GO）富集与Kyo-to Encyclopedia Genes And Genomes（KEGG）通路．方法：100例MN患者与100例健康对照者（NC）作为实验对象．100例NC随机分成10组（NC1～10），每组10人．同样100例MN随机分成10组，每组10人（MN1～10）．分别从实验参与者静脉采取全血10 mL，来源于静脉血的单个核细胞用于提取RNA．总RNA以组为单位等量混合用于高通量技术测序（high-throughput sequencing），对RNA测序结果进行长度分布，基因比对，RNA分类注释，RNA特有序列及其公共序列分析后，获得小核糖核酸（microRNA）进行MN与NC差异性表达分析来寻找显著表达microRNA．应用相关的软件对差异性表达的microRNA进行靶基因预测，靶基因借助功能注释软件对其参与的生物过程进行GO富集及KE GG通路分析．结果：靶基因在GO富集分析中主要集中在细胞器官组成，细胞膜组成，离子结合，生物代谢过程，生物调节过程等．靶基因在KE GG通路分析中主要参与嘌呤代谢通路，代谢产物生物合成，癌症通路，蛋白激酶信号通路等．结论：MN与NC之间存在着显著差异性表达microRNA．差异性表达的microRNA的靶基因参与的GO富集与KE GG通路可能与MN的发病机制与临床症状有着密切的联系．
-
miRNA在早期心肌梗死表达新进展
心肌梗死(MI)是由冠状动脉被完全阻塞,该部分心肌因无血液供氧而坏死,是冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的表现类型之一.对MI的早期诊断可影响病情发展,甚至可逆转预后.近年研究发现,微小核糖核酸(miRN A)可作为一种特殊的生物分子标志物,在早期M I患者血液中检出.本文复习相关文献,对miRN A在早期M I表达的研究作一综述.
