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大肠癌p16蛋白和基因突变与临床病理因素关系的探讨
本实验应用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)和S-P免疫组织化学技术在基因水平和蛋白质水平分别检测同一病例p16的基因缺失及蛋白表达情况,以判定大肠癌p16基因的变异率、p16蛋白表达与临床病理的关系。
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子宫内膜癌组织与张力蛋白同源第10q染色体丢失的磷酸酶基因第5和第7外显子突变的测定
与张力蛋白同源第10q染色体丢失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)是近年来被证实的一种抑癌基因,其突变在多种肿瘤的形成和发展中起着重要作用[1],而与子宫内膜癌关系的研究,国外资料尚少.我们采用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)和序列分析,对34例原发性子宫内膜癌PTEN基因第5和第7外显子的突变进行检测,旨在探讨PTEN基因突变与子宫内膜癌发生的关系.
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PCR-SSCP在淋球菌氟喹诺酮耐药基因突变研究中的应用
目的探讨用PCR-SSCP方法检测淋球菌氟喹诺酮耐药基因突变的研究.方法自行设计gyrA基因特异性扩增引物,运用PCR-SSCP银染色方法检测基因突变.结果在30例淋球菌临床分离株中选取13例,对其gyrA基因342 bp扩增产物进行DNA序列测定,其91位和95位位点发生突变.结论通过本研究所使用PCR-SSCP的方法检测临床分离出的淋球菌是否对氟喹诺酮耐药,并通过序列分析了解到淋球菌耐药基因突变以gyrA基因编码91位及95位点的氨基酸的碱基突变为主.通过此方法可以早期、准确、快速地检测出从临床获得的淋球菌菌株是否对氟喹诺酮耐药,从而指导临床用药及治疗.
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妊娠期肝内胆汁淤积症MDR3基因突变的研究
目的:了解妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者MDR3基因外显子突变的分布,探讨此基因在ICP发病机制中的作用.方法:收集30例ICP孕妇,检测其肝功能、血清总胆汁酸(TBA)、γ-谷胺酰转肽酶(γ-GT)水平,同时用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析ICP患者MDR3基因5个外显子的突变情况.结果:4例ICP孕妇血清γ-GT升高.所有ICP患者及60例正常妊娠妇女PCR均扩增出目的片段,但SSCP分析没有发现异常迁移条带.结论:在MDR3基因突变频率较高的5个外显子中,本地区ICP孕妇未发现有突变.MDR3基因突变可能不是本地区ICP患者发病的主要原因.
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鼻咽癌P53基因突变的研究
目的:探讨鼻咽癌P53基因突变问题.方法:用聚合酶链反应--单链构象多态分析法对40例鼻咽癌患者的P53 基因突变进行了分析探讨.结果:检测5.6.7.8.四个外显子,发现3例突变,其中第6外显子1例,第7外显子1例,第8外显子1例,仅第5外显子无突变发生.结论:鼻咽癌P53基因突变在四个保守区均有可能发生.