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不同T细胞亚群T细胞受体删除环含量的评价
目的 评价脓毒症等疾病对胸腺输出功能的影响,建立 T细胞受体删除环(TREC)的检测方法.方法 构建TREC质粒标准品,应用实时定量PCR法绘制标准曲线.选择不同年龄健康人的血液样本,提取其外周血单个核细胞(PBMCs),通过流式细胞术分选出不同亚群的T细胞,检测TREC含量(拷贝/T cell).结果 10例健康人血液PBMCs分选的不同T细胞亚群均检出TREC.CD4+CD45RA+及CD8+CD45RA+初始T细胞亚群中TREC平均含量均高于相应CD45RO+记忆T细胞亚群的含量,差异具有统计学意义(P< 0.05),且均随着年龄增长呈逐步下降趋势.结论 建立实时定量PCR检测TREC的方法,用于评价胸腺T细胞的输出.
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中药复方提取物HNA-1对SIV慢性感染恒河猴胸腺输出及胸腺细胞发育的影响
目的：探讨中药复方提取物湘A-1号方（HNA-1,湖南省艾滋病防治小组推荐免费使用的两个中药复方之一的提取物）治疗HIV-1感染及艾滋病（Acquired Immune Deficiency Syndrome，AIDS）的疗效机制。方法用8只已感染猴免疫缺陷病毒SIVmac23916～21个月的中国恒河猴，治疗组采用2个月的HNA-1治疗；对照组给予等体积生理盐水灌胃。在预设时间点采集外周血提取DNA，采用定量PCR检测T细胞受体重排删除环（T cell receptor excision circles, TRECs）来评价胸腺输出功能；并用酶消化法分离胸腺细胞，利用流式细胞术检测胸腺内CD34+前体细胞、CD4+T细胞发育各阶段的比例改变。结果与模型对照组比较，HNA-1治疗组胸腺细胞输出明显增加（P<0.05）；且胸腺内CD34+Lin-细胞比例明显增加（P<0.05），胸腺双阳性T细胞（Double positive，DP）Ⅱ阶段比例减少，而DPⅢ和DPⅣ阶段比例均增加。结论 HNA-1对艾滋病的疗效可能与其能显著增加胸腺输出有关；其作用机制可能涉及增加胸腺内前体细胞数量、以及促进胸腺细胞细胞从DPⅡ阶段发育至DP Ⅲ等。
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胸腺输出及sjTRECs与移植后T细胞免疫重建
异基因造血干细胞移植后受者免疫功能的重建与T细胞功能重建关系密切,信号结合T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)反映胸腺输出功能,与T细胞免疫重建相关.分析移植的预处理方案及免疫抑制剂处理对sjTRECs的影响,有助于探讨移植后免疫重建的新策略.
关键词： 胸腺输出 T细胞受体删除DNA环 免疫重建 -
异基因造血干细胞移植后患者胸腺输出功能研究
目的 采用改良的信号连接T细胞受体重排删除环(sjTREC)定量方法检测异基因造血干细胞移植患者胸腺输出功能并分析其影响因素.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测26例异基因造血干细胞移植患者各时期(移植前及移植后14d、28 d、3个月、6个月、9个月、1年、1.5年、2年、2.5年、2.5年以上)外周血sjTREC水平,分析胸腺输出功能及影响因素.以24名健康体检者sjTREC作为对照.结果 健康体检者外周血Log(sjTREC copies/ml)为3.74±0.26,与年龄呈负相关(r=-0.65,P＜0.01),与性别无明显相关性；患者移植前外周血Log(sjTREC copies/ml)为3.09±0.52,移植后14d、28 d、6个月、1年外周血Log(sjTREC copies/ml)分别为1.18±0.22、2.16±0.31、1.31±0.20、1.83±0.31,1年后恢复到移植前水平,1.5年时为2.15±0.35,与健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；移植后sjTREC的恢复与年龄无明显相关性；合并有急性移植物抗宿主病(aGVHD)患者,移植1年内外周血sjTREC含量较低,1.5年后与无aGVHD者无明显区别.结论 改良的sjTREC定量方法,适用于研究异基因造血干细胞移植后胸腺输出功能；异基因造血干细胞移植后胸腺功能恢复缓慢,aGVHD影响移植后早期胸腺功能的恢复.
