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肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因与插入序列连锁检测分析
目的 调查肺炎克雷伯菌的耐药性以及插入序列与β-内酰胺酶基因可能存在的关系.方法 收集医院2011年1月-2012年3月19株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,采用16S rDNA扩增与测序后确认菌种,采用聚合酶链反应(PCR)法分析A～D类等4类共22种β－内酰胺酶基因与插入序列(ISKpn6、ISKpn7),并作了β-内酰胺酶基因与插入序列连锁检测.结果 19株肺炎克雷伯菌均检出bla TEM和blaKPC型β-内酰胺酶基因,并且blaKPC与ISKpn6连锁检测均呈阳性.结论 检出blaKPC型β-内酰胺酶基因并有可能高表达,是该组菌株对β-内酰胺类药物耐药的主要原因.
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耐药鲍氏不动杆菌 blaOXA 基因与插入序列连锁检测及菌株亲缘性研究
目的：探讨耐药鲍氏不动杆菌的抗菌药物耐药基因及可移动遗传元件遗传标记的携带、blaOX A基因与插入序列连锁与菌株间的亲缘性。方法收集2012年1月－2013年8月IC U患者痰液标本中分离到的25株耐药鲍氏不动杆菌，经看家基因测序作BLAST 比对确认菌种，采用聚合酶链反应（PCR）及序列分析的方法分析A～D类共34种β‐内酰胺酶基因、15种氨基糖苷类耐药基因、2种喹诺酮类耐药基因、6种可移动遗传元件遗传标记，再做 ISaba1与blaOXA‐2、blaOXA‐23、blaOXA‐66连锁检测，扩增有阳性条带者再进行DNA测序验证，测序结果用Chromas作BLAST比对，后对57种耐药基因测得结果作样本聚类分析。结果25株耐药鲍氏不动杆菌共检出7种β‐内酰胺类耐药基因、4种氨基糖苷类耐药基因、2种喹诺酮类耐药基因、4种可移动遗传元件遗传标记，且阳性率非常高；插入序列与 blaOXA 基因的连锁检测中，检测到 blaOXA‐23与 ISaba1连锁，但blaOXA‐2、blaOXA‐66与 ISaba1未连锁；样本聚类分析发现，1～18号株为同一克隆，20～25号株亦为同一克隆，19号株为孤立株。结论多药耐药鲍氏不动杆菌中携带的耐药基因导致本组菌对β‐内酰胺酶类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药，且耐药基因和耐药表型相对应，样本聚类分析提示1～18号株和20～25号株可能为医院感染菌株。
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泛耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶及膜孔蛋白编码基因与ISaba1-OXA23连锁检测
目的 了解一组泛耐药鲍氏不动杆菌中β-内酰胺类药物耐药机制.方法 收集南通大学附属医院2011年1-4月临床标本中分离的泛耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析A、B、C、D4类共33种β-内酰胺酶编码基因、膜孔蛋白carO编码基因、插入序列ISaba1与β-内酰胺酶OXA-23基因(ISaba1-OXA-23)连锁检测.结果 20株鲍氏不动杆菌均检出TEM-1、ADC-30、OXA-23等3种β-内酰胺酶基因,检出率均为100.0％,carO基因均存在有义突变,插入序列ISaba1与β-内酰胺酶OXA-23基因(ISaba1OXA-23)连锁检测均为阳性.结论 该组鲍氏不动杆菌耐β-内酰胺类药物与产TEM-1、ADC-30、OXA-23等3种β-内酰胺酶、膜孔蛋白CarO编码基因存在有义突变、插入序列ISaba1与β-内酰胺酶OXA-23基因(ISaba1-OXA-23)连锁检测阳性相关.
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泛耐药鲍氏不动杆菌中β-内酰胺酶基因的研究
目的 探讨泛耐药鲍氏不动杆菌(PDRAB)中β-内酰胺酶基因携带和变异状况,以了解PDRAB在医院的分布和流行.方法 收集2011年1-6月医院ICU患者痰液标本分离的20株PDRAB,菌种鉴定采用法国生物梅里埃公司全自动微生物鉴定仪作初筛,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析A～D类共34种β-内酰胺酶基因和ISaba1-ADC-57、ISaba 1-OXA-23、ISaba1-OXA-66连锁检测,药敏试验采用法国生物梅里埃公司仪器法.结果 20株PDRAB检出4种β-内酰胺酶基因:TEM-1、OXA-23、OXA-66、和ADC基因新的变异型ADC-57(美国GenBank登录号:JQ031635),并且20株PDRAB ISaba1-ADC-57、ISaba1-OXA-23连锁检测均为阳性;而ISaba 1-OXA-66连锁检测均为阴性;TEM-1、ADC-57、OXA-23、OXA-66基因在PDRAB中流行.结论 PDRAB对β-内酰胺类药物耐药主要与产β-内酰胺酶基因TEM-1、ADC-57、OXA-23、OXA-66相关,ADC-57和OXA-23均由插入序列ISaba1介导,PDRAB对三、四代头孢类药物和碳青霉烯类药物耐药.
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多重耐药鲍曼不动杆菌的β-内酰胺酶基因及插入序列ISAba1的检测
检测分析鲍曼不动杆菌的耐药性,了解多重耐药鲍曼不动杆菌的β-内酰胺酶基因的流行特征,探究插入序列ISAba1与其耐药性的关系.采用琼脂二倍稀释法检测83株多重耐药鲍曼不动杆菌的药物敏感性;采用PCR检测β-内酰胺酶基因及ISAba1-OXA-23-like、ISAba1-0XA-5 1-like、ISAba1-ADC的基因连锁.83株多重耐药鲍曼不动杆菌对常见抗菌药物的耐药率非常高.β-内酰胺酶基因TEM、SHV、NDM-1、ADC、DHA、OXA-23-1ike、OXA-51-like、OXA-58-1ike,检出率分别为83.1％(69株),91.6％(76株),2.4％(2株),100％(83株),1.2％(1株),95.2％(79株),100％(83株),4.8％(4株);ISAba1-OXA-23-1ike,ISAba1-OXA-51-like,ISAba1-ADC的连锁检出率分别为92.8％(77株),22.9％(19株),80.7％(67株).多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药十分严重,携带多种β-内酰胺酶及插入序列ISAba1是本组测试菌耐药的主要原因.
