首页 > 文献资料
-
脓毒症患儿白细胞Rab11的表达及其临床意义
目的 探讨Rab11在儿童脓毒症不同时期和严重脓毒症中的表达及其与儿童脓毒症发生发展的关系.方法 选取2015年9月至2017年4月我院PICU收治的脓毒症患儿(40例)、严重脓毒症患儿(20例)作为研究对象,选取同期健康体检的40例儿童作为健康对照组.采用Western blot技术测定血液中白细胞Rab11的表达水平;其中,脓毒症组分别于疾病的初期、极期以及恢复期3次抽取血液标本测定.将脓毒症患儿3个不同时期及严重脓毒症患儿血液中白细胞Rab11的表达水平进行比较,并将上述血液中白细胞Rab11的表达水平与健康对照组儿童血液中白细胞Rab11的表达水平进行比较.采用Spearman相关分析,评价脓毒症患儿极期Rab11表达水平与患儿同期检测的血液中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞计数及血清C-反应蛋白、降钙素原水平的相关性,并对原发病为重症肺炎、支气管扩张合并肺部感染、胆道感染、尿路感染、坏死性小肠结肠炎、重症肠道病毒感染所致的脓毒症患儿极期Rab11的表达水平进行比较.结果 脓毒症患儿在脓毒症初期、极期,严重脓毒症患儿血液中白细胞Rab11的表达水平明显低于健康对照组(分别为0.54倍、0.23倍和0.07倍),差异有统计学意义(P<0.05),而脓毒症恢复期血液中白细胞Rab11的表达水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);脓毒症患儿极期血液中白细胞Rab11的表达水平与外周血白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞计数不相关,而与血清C-反应蛋白(r=-0.58,P=0.014)和降钙素原(r=-0.63,P=0.003)水平呈负相关;原发病为重症肺炎、支气管扩张合并肺部感染、胆道感染、尿路感染、坏死性小肠结肠炎、重症肠道病毒感染所致的脓毒症患儿极期血液中,白细胞Rab11的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 血液中白细胞Rab11在儿童脓毒症不同时期的表达差异,可以作为儿童脓毒症病情严重程度的预测指标.
-
Rab11对子宫颈癌HeLa细胞生物学功能的影响
目的：通过调控Rab11在子宫颈癌HeLa细胞中的表达，观察Rab11对子宫颈癌HeLa细胞生物学功能的影响。方法将Rab11 siRNA转染至HeLa细胞，Western blot法检测Rab11蛋白表达变化，以转染阴性对照siRNA细胞为对照组，采用CCK8、克隆实验、EdU实验、Transwell小室法体外检测转染后的HeLa细胞增殖能力、侵袭能力的变化。结果与对照组比较，HeLa细胞转染Rab11 siRNA组Rab11蛋白表达明显下调（1.096±0.091比1.735±0.084，P＜0.01）。与对照组比较，转染Rab11 siRNA组HeLa细胞增殖受抑制（吸光度值48 h：0.721±0.092比1.090±0.099；72 h：0.956±0.105比1.482±0.096；96 h：1.231±0.099比1.720±0.174，P＜0.01），克隆形成数减少[（36±1）个比（75±8）个， P＜0.01]，增殖率降低[（33.880±1.902）%比（45.570±2.025）%，P＜0.05]。Rab11 siRNA转染组较对照组侵袭率降低[（38.6±0.8）%比（100.0±0.2）%，P＜0.01]。结论体外实验证实Rab11表达下调能够抑制HeLa细胞的生长。
-
Rab11过表达促进人膀胱癌细胞的增殖和侵袭
目的 探讨Rab11过表达对膀胱癌细胞增殖、侵袭的影响.方法 在BIU-87细胞系中转染Rab11过表达质粒,用CCK8、细胞周期检测及基质胶侵袭实验分析了Rab11对细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响,并用Western blot及RT-PCR方法检测了细胞周期相关因子cyclin D1、cyclin E及侵袭相关因子MMP9的蛋白和mRNA的表达变化.结果 Rab11过表达能促进膀胱癌细胞的增殖及侵袭,并能促进细胞周期相关因子cyclinD1、cyclin E及侵袭相关因子MMP9的蛋白和mRNA的表达.结论 Rab11可能作为癌蛋白参与了膀胱癌的发病机制,成为治疗膀胱癌的靶点.
-
Rab11在膀胱癌组织中的表达及临床意义
目的 检测Rab11在膀胱癌组织中的表达及其与临床分期病理分级的关系.方法 免疫组织化学方法检测Rab11在膀胱癌组织中的表达类型,并分析了Rab11的表达与临床病理因素的关联.结果 Rab11在膀胱癌组织标本中阳性表达率为39/96,并定位于细胞浆;Rab11在60岁以下的组织标本中阳性表达率为20/41,在60岁以上组织标本中阳性表达率为11/55(P=0.1601);Rab11在男性组织标本中的阳性表达率为30/68,在女性组织标本中的阳性表达率为9/28 (P=0.2775);Rab11在Ta-T1期组织标本中阳性表达率为14/51,在T2-T4期组织标本中阳性表达率为25/45(P=0.0051);Rab11在病理G1期的组织标本中阳性表达率为17/46,在病理G2和G3期的组织标本中阳性表达率为22/50(P=0.4827).结论 Rab11可能参与膀胱癌的发病机制并与临床进展密切相关,可能为膀胱癌的靶向治疗提供理论依据.
-
下调Rab11基因对宫颈癌HeLa/SiHa 细胞侵袭迁移的影响及机制探讨
背景与目的：Rab11基因在宫颈癌细胞中高表达，可能与细胞恶性转化相关。本研究采用RNA干扰技术下调Rab11基因表达，并探讨其对宫颈癌HeLa/SiHa细胞侵袭迁移的影响及可能的相关机制。方法：将HeLa/SiHa细胞分为2组：阴性对照组(转染阴性对照的小干扰RNA)和Rab11 siRNA干扰组(转染小干扰Rab11siR-NA)。蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Rab11干扰效果，检测转染Rab11 siRNA后，侵袭相关蛋白Rac1、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2，MMP2)和MMP9表达的变化；细胞划痕损伤实验检测细胞迁移；Transwell实验检测细胞侵袭；细胞免疫荧光实验从形态学角度探索在小干扰Rab11后Rac1蛋白在细胞膜上聚集位置的变化。结果：转染小干扰Rab11siRNA到HeLa/SiHa细胞后，Rab11蛋白表达受到高效抑制(P<0.01)；细胞迁移、侵袭能力受到抑制(P<0.05)，Rac1蛋白表达明显下调(P<0.01)，MMP2、MMP9蛋白表达下调(P<0.05)， Rab11 siRNA处理组细胞运动前端细胞膜下Rac1蛋白聚集量减少。结论：Rab11基因表达下调可以抑制HeLa/SiHa细胞的迁移和侵袭，其机制可能与Rac1、MMP2和MMP9蛋白表达量下降及Rac1定位的改变有关。
-
乏氧条件下Rab11对人宫颈癌HeLa细胞侵袭迁移能力的影响
目的：通过调控Rab11在HeLa细胞中的表达，观察乏氧条件下Rab11对宫颈癌HeLa细胞侵袭、迁移能力的影响。方法将 HeLa 细胞分为4组：常氧对照组、常氧 Rab11siRNA 转染组、乏氧对照组、乏氧Rab11siRNA转染组。 Western blot检测各组HeLa细胞Rab11、基质金属蛋白酶（ MMP）－2、MMP－9蛋白表达， Transwell小室试验检测各组HeLa细胞侵袭、迁移能力的变化。结果乏氧条件下HeLa细胞Rab11表达量高于常氧组（P＜0．01），细胞侵袭、迁移能力增高（P＜0．01）；常氧和乏氧条件下，Rab11siRNA转染组与对照组相比，细胞侵袭能力、迁移能力下降（P＜0．01），乏氧条件下的Rab11 siRNA转染组下降更明显。结论乏氧促进HeLa细胞的侵袭、迁移，常氧及乏氧条件下下调Rab11表达均能够抑制HeLa细胞的侵袭、迁移， HeLa细胞的侵袭能力、迁移能力的变化依赖于Rab11的表达。
-
miR-320靶向Rab11对宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响
目的 探讨miR-320对宫颈癌细胞SiHa增殖、侵袭及迁移的调控作用.方法 选取宫颈癌细胞系SiHa,将细胞分为miR-320模拟基因组、miR-320抑制剂组、对照模拟基因组、对照抑制剂组,各组分别转染miR-320模拟基因、miR-320抑制剂、对照模拟基因、对照抑制剂.采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组SiHa细胞中miR-320表达;Western blot检测各组SiHa细胞中Rab11蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶活性.结果 miR-320抑制剂组SiHa细胞中miR-320相对表达量低于对照抑制剂组(P＜0.05);miR-320模拟基因组SiHa细胞中miR-320相对表达量高于对照模拟基因组(P＜0.05).miR-320抑制剂组SiHa细胞的细胞活性、侵袭能力、迁移能力高于对照抑制剂组(P＜0.05);miR-320模拟基因组SiHa细胞的细胞活性、侵袭能力、迁移能力低于对照模拟基因组(P＜0.05).miR-320抑制剂组SiHa细胞中Rab11蛋白表达高于对照抑制剂组(P＜0.05);miR-320模拟基因组SiHa细胞中Rab11蛋白表达低于对照模拟基因组(P＜0.05).miR-320抑制剂组SiHa细胞的细胞荧光活性显著低于对照抑制剂组(P＜0.05);miR-320模拟基因组SiHa细胞的细胞荧光活性与对照模拟基因组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-320可通过靶向Rab11调控SiHa细胞增殖、侵袭及迁移.
-
Rab11通过NF-κB信号通路调控膀胱癌细胞的增殖和侵袭
目的:探讨Rab11调控膀胱癌细胞增殖和侵袭的分子机制.方法:用Western blot方法检测膀胱癌BIU-87、T24、RT4、5637细胞系中Rab11的内源表达量.在BIU-87(Rab11低表达)和T24(Rab11高表达)细胞系中分别转染Rab11过表达质粒和Rab11 siRNA.用荧光素酶报告实验检测转染后细胞内的NF-κB信号通路的活性,通过Western blot技术分析与NF-κB信号通路相关蛋白p-IκB的变化情况.用NF-κB抑制剂Bay 11-7082处理转染Rab11过表达质粒的BIU-87细胞系,通过Western blot检测细胞系中细胞周期相关因子cyclin D1和侵袭相关因子MMP9蛋白的变化.结果:转染Rab11过表达质粒的BIU-87细胞系中NF-κB活性水平提高,p-IκB表达量显著提高;而敲除Rab11后NF-κB活性受到抑制,p-IκB的表达受到抑制,而p-IκB与NF-κB信号通路的活性呈正相关.NF-κB抑制剂Bay 11-7082阻遏了Rab11诱导cyc-lin D1和MMP9表达上调的过程.结论:Rab11通过NF-κB信号通路调控膀胱癌细胞的增殖和侵袭.
