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FOXJ1调控AKT信号通路对结直肠癌细胞凋亡和侵袭能力的影响
目的 探讨叉头框转录因子J1(FOXJ1)对人结直肠癌细胞凋亡和侵袭能力的影响及机制.方法 应用Western Blot方法检测人结直肠癌细胞HCT116、HT29、SW480及人正常肠上皮细胞FHC中FOXJ1的表达水平.细胞中转染pEGFP-N1-FOXJ1和pEGFP-N1,Western Blot检测细胞中FOXJ1、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)的表达水平,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,Transwell小室检测细胞的侵袭能力.结果 人结直肠癌细胞HCT116、HT29、SW480中FOXJ1的表达水平均明显低于人正常肠上皮细胞FHC(P﹤0.01).人结直肠癌细胞HCT116中FOXJ1的表达水平下降多,后续选用HCT116细胞继续研究.转染pEGFP-N1后的细胞凋亡率、侵袭细胞数目及细胞中FOXJ1、Cleaved Caspase-3、MMP-2、AKT、p-AKT的表达水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05).转染pEGFP-N1-FOXJ1后的细胞凋亡率及细胞中FOXJ1、Cleaved Caspase-3的表达水平明显高于对照组(P﹤0.01);转染pEGFP-N1-FOXJ1后的侵袭细胞数目及细胞中MMP-2、p-AKT的表达水平明显低于对照组(P﹤0.01).结论 FOXJ1在人结直肠癌细胞中过表达.FOXJ1能够促进结直肠癌细胞凋亡,抑制结直肠癌细胞侵袭,其作用机制可能与AKT信号通路有关.
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TAP、FOXJ1基因多态性与自身免疫性疾病相关性的研究进展
自身免疫性疾病(AD)是指机体对自身抗原发生免疫反应导致自身组织损害所引起的疾病.AD发病机制尚未明确,近年来国内外学者越来越多地将目光投在遗传背景上,欲从分子水平上探讨其病因,特别是TAP、FOXJ1基因多态性与自身免疫性疾病的研究备受关注.
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人脐血干细胞分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞
背景:鼻黏膜纤毛上皮细胞受损后导致鼻黏膜生物功能严重创伤。相对于其他成体干细胞,人脐血干细胞具有更好的诱导分化潜能。
目的:观察人脐血干细胞通过体外培养、诱导分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞的可行性。
方法:收集正常健康人脐血,分离人脐血干细胞,通过体外培养,鉴定干细胞表面标记物后进行传代培养;取第3代脐血干细胞,用携带增强型绿色荧光蛋白重组腺相关病毒进行感染,采用气液界面培养法,分别于诱导感染1,2周后对干细胞进行MUC8基因PCR检测。在脐血干细胞培养3周后进行FOXJ1免疫荧光染色。
结果与结论:①培养鉴定结果:原代人脐血干细胞传代至第3代时,细胞形态较均一,折光性良好,可表达干细胞表面标记物;②转染鉴定结果:细胞转染3 h后,可见第3代干细胞呈现出绿色荧光,培养48 h后,流式细胞仪检测细胞阳性率达96.2%,说明干细胞转染效果很好;③RT-PCR检测:人脐血干细胞MUC8 mRNA无表达,而鼻黏膜上皮细胞MUC8 mRNA呈现出强表达,培养1周时 MUC8 mRNA呈现弱表达,培养2周后有一定的增强;④免疫荧光染色:在转染的绿色荧光蛋白背景下可观测到FOXJ1红色荧光呈现阳性表达结果;⑤结果说明:人脐血干细胞在适宜培养条件下可分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞。 -
Foxj1在脑外伤后的表达变化
目的:探讨脑外伤后Foxj1在脑组织中的表达变化及其意义.方法:建立大鼠脑外伤模型,利用Western blot和免疫组织化学方法检测脑外伤后Foxjl在脑组织中表达的变化.结果:Western blot显示大鼠脑外伤后,Foxjl的表达逐步增高,伤后3d升至高点,之后逐渐降低;免疫组织化学的结果与Westem blot一致.结论:脑外伤后Foxjl在脑组织中的表达增高,这种增高的表达参与了脑外伤后脑组织的病理生理和生化变化.
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Foxj1在大鼠脑损伤后的表达变化及意义
目的:探讨Foxj1在大鼠脑损伤后的表达变化及其意义.方法:建立大鼠脑外伤模型,利用免疫荧光方法检测Foxj1在脑损伤后脑皮质神经元、星形胶质细胞中的表达变化,以及与增殖细胞的关系.结果:Foxj1在外伤性脑损伤后的神经元和星形胶质细胞中表达增高,参与了细胞的增殖.结论:Foxj1在脑损伤后的脑皮质有增高的表达,参与了外伤性脑损伤的神经再生.
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FOXJ1及SATB-1在胃癌组织中的蛋白表达情况及其与肿瘤分期、转移的相关性
目的 探讨FOXJ1及SATB-1在胃癌组织中的蛋白表达情况及其与肿瘤分化、转移的相关性.方法 采用免疫组化方法,测定180例经外科手术切除并经病理确诊的胃癌组织标本及相应的癌旁正常组织中FOXJ1及SATB-1表达水平.结果 FOXJ1蛋白在胃癌组织中阳性表达率为48.33%,显著低于正常组织中的阳性表达率(94.44%,P<0.01);SATB-1蛋白在胃癌组织中阳性表达率为58.56%,显著高于正常组织中的阳性表达率(9.44%,P<0.01);不同性别、年龄及肿瘤位置患者的FOXJ1、SATB-1蛋白表达水平比较无统计学差异(P>0.05).肿瘤浸润深度大、发生淋巴结、远端转移、临床分期为Ⅲ、Ⅳ期患者的FOXJ1蛋白阳性表达率显著较低(P<0.05),SATB-1蛋白阳性表达率显著较高(P<0.05).结论 FOXJ1及SATB-1蛋白参与胃癌的发生发展过程中,且与肿瘤分期、转移等病理指标密切相关,可作为预测肿瘤恶性程度及转移倾向的临床指标.
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FOXJ1在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的相关性
目的 观察FOXJ1在胃癌组织中的表达水平,探讨其与患者的临床病理特征和预后的相关性,为胃癌的诊断和治疗提供参考.方法 选取2010年3月至2012年6月在我院就诊并进行手术切除的胃癌患者86例,采用免疫组织化学法检测FOXJ1在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平,并统计分析FOXJ1在胃癌组织中的表达水平与临床病理特征和预后的相关性.结果 胃癌组织免疫组化结果显示FOXJ1表达阳性率(48.84%)低于癌旁组织(94.19%),两者比较差异具有统计学意义(P<0.05);TNM分期(Ⅲ+Ⅳ)期、浸润深度(T3+T4)、有淋巴结转移、有远处转移的患者FOXJ1表达阳性率降低(P<0.05);FOXJ1表达阴性患者3年后病死率明显高于阳性患者,两者比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 胃癌组织中FOXJ1表达水平降低,TNM分期越高、浸润深度越深、有淋巴结转移、有远处转移的患者FOXJ1表达水平更低,FOXJ1表达阴阳性患者3年病死率高于阳性患者.