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腹水中exosomes的分离和鉴定
目的:从卵巢癌患者腹水中分离exosomes,鉴定其来源及分子表型.方法:用多步离心和超滤等方法从腹水中分离exosomes,分别用免疫电镜和Western blot检测Hsc73、MHC Ⅰ类和MHCⅡ类分子的表达.腹水中分离的卵巢癌细胞为阳性对照.结果:从卵巢癌患者腹水中分离的exosomes,其形态为圆形或椭圆形小囊泡,直径约30～90 nm;经免疫电镜检测,exosomes有Hsc73和MHC Ⅰ类分子的金颗粒附着,而MHC Ⅱ类分子为阴性表达.经Western blot证实,exosomes表达Hsc73和MHC Ⅰ类分子,但MHC Ⅱ类分子表达阴性.结论:经过多步离心、超滤等方法从卵巢癌患者腹水中分离的exosomes来源于卵巢癌细胞,为卵巢癌免疫治疗奠定了基础.
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卵巢癌抗独特型抗体/hGM-CSF融合蛋白质对体外免疫细胞的刺激作用
目的:探讨卵巢癌抗独特型单链抗体6B11 scFv/hGM-CSF融合蛋白质(6B11 GM)作为肿瘤疫苗的可能性.方法:采用体外T细胞增殖试验,对6B11 GM刺激T细胞的能力进行测定,并用流式细胞仪对T细胞表型及APC MHC Ⅱ表达情况进行测定,测定了外周血单个核细胞经6B11 GM激活后对卵巢癌细胞系的非MHC限制的杀伤活性.结果:6B11 GM及6B11均能引起特异的T细胞增殖,但6B11 GM组的增殖明显高于6B11组,以CD4+增殖为主.6B11 GM能明显增加抗原提呈细胞(antigen presenting cell, APC)的MHCⅡ表达,使APC更有效地摄取抗原,激活非MHC限制的杀伤活性.结论:6B11 GM能引起细胞免疫反应,作为疫苗具有良好的前景.
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卵巢上皮性癌患者白细胞介素-7测定的临床意义
目的探讨卵巢上皮性癌患者血清和腹腔液白细胞介素-7(interleukin-7,IL-7)测定的意义.方法ELISA检测32例卵巢上皮性癌患者外周血、腹腔液及3例原代培养细胞上清液IL-7水平,并将16例健康妇女血清和16例良性卵巢上皮性肿瘤患者血清、腹腔液作为对照组.结果原代培养卵巢癌细胞上清液不能测得IL-7;卵巢癌患者血清IL-7水平显著高于健康妇女及良性对照组(P＜0.05),卵巢癌患者腹腔液IL-7水平与良性对照组相比差异无显著性(P＞0.05).卵巢癌和良性对照组的血清和腹腔液IL-7水平之间均存在正相关(P＜0.05);卵巢癌患者血清和腹腔液IL-7水平与相应CA125值相关性不显著(p＞0.05).结论卵巢癌细胞不分泌IL-7,但可刺激宿主免疫细胞分泌IL-7;腹腔IL-7无显著升高可能与卵巢癌腹腔局部免疫抑制有关.
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细胞因子与卵巢上皮性癌的发生与发展
细胞因子(cytokine,CK)是一类由免疫细胞和相关细胞分泌,能调节细胞功能的高活性多功能低分子量的蛋白质.CK通过对肿瘤细胞直接作用,通过作用肿瘤血管生成和营养供应系统影响宿主与肿瘤关系,也可以激发宿主对肿瘤的免疫反应而影响肿瘤的转归.在卵巢肿瘤中,CK以自分泌和(或)旁分泌方式影响其生长.已发现一些CK可抑制卵巢癌细胞生长,一些CK可促进卵巢癌细胞生长,且一些CK对卵巢癌细胞具有协同作用,在不同环境下,同一CK可表现不同作用.而CK网络作用使CK对卵巢癌的影响更为复杂,现将有关CK与卵巢上皮性癌发生、发展有关进展作一综述.
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血清CA125化学发光免疫分析在卵巢癌诊断和预后评估中的应用
卵巢癌很难早期发现,且早期易发生转移扩散,往往在确诊时,就已发生扩散[1].
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生长抑素Ⅱ型受体在上皮性卵巢癌中的表达
目的:探讨生长抑素Ⅱ型受体在上皮性卵巢癌中的表达及意义.方法:采用免疫组化SP法检测48例上皮性卵巢肿瘤中生长抑素受体蛋白的表达水平.结果:卵巢癌组中晚期生长抑素Ⅱ型受体的阳性表达率为71.4%(10/14),早期生长抑素受体的阳性表达率为23.5%(4/17),两组的阳性表达率间有显著性差异.组织学分化1级阳性表达率为18.2%(2/11),分化2级阳性表达率为50%(7/14),分化3级阳性表达率为83.3%(5/6),三者间有显著性差异.生长抑素Ⅱ型受体表达有腹水组明显高于无腹水组.结论:随着卵巢癌病变进展,肿瘤细胞表面生长抑素Ⅱ型受体表达增强,相应的生长抑素类似物可望为生长抑素受体阳性表达的上皮性卵巢癌的诊治提供新的方向.
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顺铂作用下卵巢癌细胞株CP70中Eps8表达变化研究
目的：观察肿瘤相关抗原Eps8在卵巢癌细胞株A2780、CP70、SKOV3、SKOV3／DDP中的表达情况，筛查出Eps8高表达细胞株CP70。观察顺铂（DDP）作用下CP70细胞中Eps8在蛋白水平表达的变化，探讨Eps8在卵巢癌化疗耐药中的作用。方法：用实时荧光定量PCR法检测Eps8在卵巢癌细胞株中mRNA的表达水平，用Westernblot法检测Eps8蛋白表达水平，筛选出高表达株CP70。用不同浓度DDP作用于CP70细胞24h、48h，用Westernblot法检测Eps8在蛋白水平的变化。结果：随着药物浓度的增加及作用时间的延长，Eps8在蛋白水平的表达明显升高。结论：顺铂处理CP70细胞后，Eps8的蛋白表达量升高，且和DDP作用的时间及剂量有依赖性，即DDP可诱导CP70细胞中Eps8表达的上调。因此推测，Eps8在卵巢癌顺铂耐药形成机制中发挥重要作用。
