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DADS抑制SW480细胞系生长增殖及CK19蛋白质分子鉴定
目的:观察不同浓度和作用时间二烯丙基二硫(DADS)对SW480细胞的生长抑制作用,应用前期蛋白质组学筛出的部分差异表达蛋白质分子,进行进一步分析与鉴定.方法:采用MTT、细胞计数法;施用流式细胞仪、RT-PCR和Western blotting方法,检测50 靏/mL DADS对SW480细胞的凋亡率、CK19 mRNA和蛋白的表达水平.结果:MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞生长增殖,呈浓度和时间依赖性,细胞生长增殖速度明显减慢.细胞计数表明,当DADS浓度增加时,SW480细胞群体倍增时间延长,与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.05.流式细胞仪分析显示,50 靏/mL DADS使SW480细胞凋亡率增加.RT-PCR和Western blotting结果证实,50 靏/mL DADS处理SW480细胞后,CK19 mRNA和蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义,P<0.05.结论:DADS抑制SW480细胞系生长增殖,可能与CK19表达下调,促进细胞凋亡有关.
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大蒜新素对变应性鼻炎大鼠转录因子T-bet和GATA-3表达的影响
目的 探讨大蒜新素对大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型血淋巴细胞中转录因子T-bet和GATA-3表达的影响.方法 健康SD大鼠30只,雌雄各半,以随机数字表法分为3组,即药物组、对照组和空白组,每组10只.药物组用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)辅以氢氧化铝和灭活百日咳杆菌佐剂建立AR模型,成功后每日腹腔注射大蒜新素0.4 ml,剂量为25 mg/(kg·d),连用10 d.对照组造模方法同药物组,成功后每日腹腔注射生理盐水0.4 ml,连用10 d.空白组除无OVA致敏和激发外,其他处置方法同对照组.采集心脏血2 ml,分离出血浆和淋巴细胞,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血浆中白细胞介素(interleukin,IL)4和γ干扰素(interferon,IFN)的含量,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测淋巴细胞中转录因子T-bet和GATA-3的表达,并应用半定量方法计算二者的相对表达量.结果 药物组、对照组和空白组大鼠血浆中IL-4的水平(X±s,以下同)分别是(6.292±1.734)、(14.252±1.971)、(4.916±0.600)pg/ml;IFN-γ的水平分别是(24.338±2.375)、(12.364±1.749)、(16.136±2.012)pg/ml.药物组血浆中IL-4的水平低于对照组,差异有统计学意义(t=4.23,P<0.05),与空白组比较,差异无统计学意义(t=1.01,P>0.05).药物组血浆中IFN-γ的水平高于对照组和空白组,差异有统计学意义(t值分别为4.61、5.79,P值均<0.05).对照组血浆中IFN-γ的水平和空白组比较,差异无统计学意义(t=1.17,P>0.05).药物组、对照组和空白组血淋巴细胞中转录因子GATA-3相对表达量的中位数(M)分别是0.826、1.029和0.474,3组间差异有统计学意义(x~2=6.599,P=0.019);转录因子T-bet的相对表达量中位数(M)分别为1.245、0.280和0.544,3组间差异有统计学意义(x~2=9.884,P=0.007).对照组GATA-3相对表达量高于空白组和药物组,差异有统计学意义(x~2值分别为10.113、2.384,P值均<0.05).药物组GATA-3相对表达量高于空白组,T-bet相对表达量明显高于对照组和空白组,差异均有统计学意义(x~2值分别为3.784、16.021和14.103,P值均<0.05).结论 大蒜新素能明显增强大鼠AR模型血淋巴细胞中转录因子T-bet的表达并减弱GATA-3的表达.
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二烯丙基二硫抑制人胃癌MGC803细胞增殖和对G2/M期的阻滞作用
目的 研究二烯丙基二硫(DADS)抑制人胃癌MGC803细胞增殖和对G2/M期的阻滞作用.方法 采用MTT法测定DADS对MGC803细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测DADS对MGC803细胞周期的影响.结果 30mg/L、60mg/L、90mg/L的DADS对MGC803细胞的抑制率分别为31.58%±2.20%、53.87%±4.50%、81.58±1.70%,随浓度增高呈上升趋势;对MGC803细胞周期的影响为G0/G1期细胞比率下降,G2/M期逐渐上升.结论 DADS对人胃癌MGC803细胞增殖的抑制作用是通过G2/M期阻滞,抑制细胞分裂来完成的.
