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鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因表达的研究
目的:探讨鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因的表达情况.方法:在鼻咽癌高发区广东省中山市,选择鼻咽癌高癌家系成员为研究对象,以鼻咽炎及鼻咽癌患者为对照,抽提鼻咽组织RNA,合成cRNA,以基因组稳定和修复功能分类基因芯片杂交及化学发光法检查其基因的表达情况,并实时荧光定量PCR技术进行验证.结果:鼻咽癌高癌家系成员DNA损伤修复基因主要以上调表达为主,且上调幅度高,上调100倍以上的基因包括TEP1、MSH4和PMS2L1;下调的基因少且幅度低,泛素类基因多表现为下调,实时荧光定量PCR检验结果基本一致.结论:鼻咽癌高癌家系成员存在着特定的DNA损伤修复基因变化规律.
关键词： 鼻咽肿瘤 高癌家系 基因组稳定与修复基因 基因芯片 荧光定量聚合酶链式反应 泛素 -
气虚体质之鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因表达
目的:研究气虚质鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因的表达情况.方法:在鼻咽癌高发区广东中山市,选择气虚质鼻咽癌高癌家系成员为研究对象,以正常质鼻咽癌高癌家系成员、鼻咽癌患者为对照,以基因组稳定和修复之功能分类基因芯片及实时荧光定量PCR技术进行研究.结果:鼻咽癌高癌家系成员DNA损伤修复基因主要以上调表达为主,且上调幅度高,下调的基因少且幅度低,气虚质较正常质鼻咽癌高癌家系成员的基因亦以上调表达为主,荧光定量PCR检测结果与芯片检测结果基本一致.结论:鼻咽癌高癌家系成员存在着特定的DNA损伤修复基因变化规律,气虚状态亦可影响DNA损伤修复基因变化.
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鼻咽癌高癌家系癌患者不同体质证型的蛋白质组学研究
目的 比较鼻咽癌高癌家系不同体质证型癌患者鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织蛋白质组差异,筛选体质证型相关性差异蛋白质.方法 鼻咽癌高癌家系初诊鼻咽癌患者14例,包括气虚体质组7例和湿热体质组7例,取鼻咽原发灶癌组织,应用双向凝胶电泳技术分离标本组织总蛋白后,自动识别差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS分析得到肽质量指纹图谱PMF,生物信息学技术鉴定部分差异蛋白质点及其病理意义.结果 建立了鼻咽癌高癌家系癌患者气虚体质组和湿热体质组鼻咽原发灶癌组织的双向凝胶电泳图谱,发现该系气虚体质组鼻咽癌患者和湿热体质组患者之间差异表达大于3倍的蛋白质点10个,并鉴定出了F-肌动蛋白戴帽蛋白亚基(F-actin-capping protein)等5个蛋白质.这些差异表达蛋白质的功能涉及遗传与转录、物质代谢、能量的产生、物质转运等现象.结论 鼻咽癌高癌家系气虚体质鼻咽癌患者组和湿热体质鼻咽癌患者鼻咽病灶组织存在不同的蛋白质表达谱,已经筛选鉴定的5个差异表达蛋白质,可能为揭示鼻咽癌高癌家系不同体质患者鼻咽癌发病机制研究提供有用信息.
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鼻咽癌高癌家系不同体质证型鼻咽癌患者鼻咽病灶组织蛋白双向凝胶电泳分析
目的 建立鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质证犁及湿热体质证型高分辨率双向凝胶电泳特征图谱,探讨其证本质相关性蛋白质组学特征.方法 设鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组、湿热体质组、其他体质证型组,散发性鼻咽癌患者组,鼻明癌高癌家系健康成员对照组,共计5组.分别获取鼻咽组织标本,提取总蛋白质,固相pH梯度双向凝胶电冰分离,经考马斯亮蓝显色后,Image Master 2D Elite4.01图像分析软件进行电泳结果分析.结果 各组标本均获得分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为860±20,854±25,842±30,867±20及857±15.比较分析,发现鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组与湿热体质组,差异蛋白质点10个.结论 鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者不同体质证型蛋白质谱发生了明显变化,提示同病异证存在不同的本质内涵,为进一步研究鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者中医体质证型的本质内涵提供了实验依据.
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鼻咽癌高癌家系成员中医体质特征调查
目的:观察鼻咽癌高癌家系成员中医体质特征.方法:建立中医体质证候分类标准,分别调查鼻咽癌高癌家系核心成员、鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者的中医体质类型,并以散发性鼻咽癌患者(外对照组)及高癌家系已婚核心成员配偶(内对照组)进行中医病理体质的对照研究.结果:鼻咽癌高癌家系核心成员中医体质证候类型主要表现为正常质和气虚质,而内对照组成员则多表现为正常质,高癌家系鼻咽癌患者多表现为气虚质、失调热质和复合质,散发性鼻咽癌患者多表现为气虚质和复合质,后三者各组间比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01).而将高癌家系核心成员中医体质类型与外对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05).51例高癌家系核心成员中,共有复合质7例,其中虚热质4例,虚湿质、湿热质、虚热瘀质各1例;而内对照组成员则未见复合质者.高癌家系鼻咽癌患者17例中,共有复合质7例,其中虚热质1例,虚湿质2例,湿热质3例,虚热瘀质1例,与高癌家系核心成员比较,差异无显著性意义(P>0.05).外对照组成员34例中,有复合质6例,其中虚湿质3例,虚寒质1例,湿热质2例,与高癌家系核心成员及高癌家系鼻咽癌患者比较,差异无显著性意义(P>0.05).体质证候积分高癌家系核心成员与内对照组成员比较,气虚质积分差异有非常显著性意义(P<0.01),失调瘀质积分差异有显著性意义(P<0.05).高癌家系核心成员与高癌家系鼻咽癌患者比较,气虚质积分、失调瘀质积分差异有非常显著性意义(P<0.01).失调寒质积分比较,差异有显著性意义(P<0.05).高癌家系核心成员与外对照组成员比较,失调寒质积分及失调瘀质积分,差异有非常显著性意义(P<0.01),失调湿质积分,差异有显著性意义(P<0.05).结论:鼻咽癌高癌家系核心成员的中医体质类型中,除正常质外,病理体质主要表现为气虚质和复合质,而高癌家系鼻咽癌患者的中医体质类型主要表现为气虚质、失调热质和复合质.中医体质特征与鼻咽癌发病关系密切.
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鼻咽癌高癌家系外周单个核细胞蛋白质组学研究
目的：寻找鼻咽癌高癌家系鼻咽癌的癌变机制、早期诊断、治疗和预后监测的外周血特异性分子标志物。方法利用双向凝胶电泳技术(2-DE)分别分离鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的总蛋白，经蓝银染色后进行图像分析，并对差异表达的蛋白质点进行识别，利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到肽质量指纹图谱，搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果建立了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的2-DE图谱；发现并鉴定了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组之间的差异表达大于2倍的蛋白质点19个，这些差异蛋白质点主要为蛋白质合成与分解、抗氧化应激、分子伴侣、细胞结构相关蛋白质、三大代谢相关酶类以及信号传导相关蛋白质等。结论通过对鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的比较蛋白质学研究，筛选并鉴定到19个与鼻咽癌高癌家系鼻咽癌发生相关的蛋白质，其中HSP27、Protein S100-A9、Prohibitin可能成为鼻咽癌高癌家系鼻咽癌癌变机制、早期诊断、治疗及预后监测的外周血特异性分子标志物。
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鼻咽癌高发家系新发病例及EB病毒感染指标的追踪调查
目的:追踪调查鼻咽癌(NPC)高发家系成员中新病例的发生情况,监测家系成员的EB病毒感染指标的动态变化,并分析其与发病危险性之联系,以提高NPC早期发现、早期诊断和早期治疗的几率.方法:对16个鼻咽癌高发家系(其三代成员中至少出现过2例鼻咽癌病例)成员共416人进行连续36个月的追踪随访,并用ELISA法检测其血清EBV-VCA-IgA、EBV-EA-IgA.结果:高发家系成员EBV-VCA_IgA阳性率(滴度≥1:10为阳性)为26.44%(109/416),EBV-EA阳性率(滴度≥1:5为阳性)3.67%(15/416),均高于当地体检人群的相应数据,差异有显著性.在追踪调查的36个月中,共出现NPC新病例9例(Ⅰ期5例,Ⅱ期4例).结论:NPC高发家系成员中发生新病例的频率非常高;其发病危险性与其EBV-VCA-IgA和EBV-EA-IgA抗体的高阳性表达有密切关系;对NPC高发家系进行定期追踪监控,可提高三早率,终可能提高NPC的治疗效果.
