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中性鞘糖脂在KBv200细胞的表达及其与多药耐药性的关系
目的研究肿瘤细胞mdr1与其细胞表面中性鞘糖脂（N-GSLs）表达的关系。方法利用特异性切割mdr1的核酶（ribozyme）为工具，以表达mdr1的耐药细胞株KBv200为靶细胞，采用脂质体转染技术，将含核酶的质粒pH β Apr-1neo/5mR3及空载体pH β Apr-1neo导入KBv200及其亲本KB细胞内，运用Northern-blotting、免疫组化方法观察核酶对mdr1 mRNA及P-gp的影响，用改良的Hakamori方法提取、纯化耐药逆转前后及KB细胞的N-GSLs，以高效薄层层析（HPTLC）分析不同细胞亚株N-GSLs的表达。采用MTT法分析糖脂合成抑制剂DL-PPMP对肿瘤细胞多药耐药性（MDR）的逆转作用。结果 pH β Apr-1neo/5mR3及pH β Apr-1neo可以在KB、KBv200细胞中稳定表达，mdr1-核酶可以特异性地切割mdr1，导致KBv200/5mR3的mdr1 mRNA含量下降，P-gp表达减低。KB和KBv200的N-GSLs表达有差异，KBv200的单乙糖神经鞘氨醇(monohexosy lceramide, CMH)、二乙糖神经鞘氨醇(dihexosylceramide,CDH)表达较KB强，核酶逆转MDR后，KBv200/5mR3的CMH、CDH表达降低，以CMH为著。DL-PPMP可通过抑制CMH的合成，逆转KBv200对长春新碱（VCR）的耐药。结论肿瘤细胞mdr1与其细胞表面N-GSLs表达相关，CMH为耐药相关N-GSLs，抑制耐药细胞CMH的合成可能是逆转肿瘤多药耐药的一种新方法。
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CMH为KBv200耐药相关中性鞘糖脂
为了研究耐药细胞株KBv200中性鞘糖脂表达的规律，采用改良的Hakomori法提取、纯化了KB及其耐药细胞株KBv200的中性鞘糖脂，行高效薄层层析，分析其含量的异同；并以糖脂合成抑制剂PPMP抑制KBv200中性鞘糖脂的合成，观察了其对KBv200耐药性的逆转作用。结果发现，KBv200的CMH和CDH表达较KB强，尤以CMH为著，PPMP能抑制KBv200细胞CMH的合成，并能逆转KBv200对长春新碱(VCR)的耐药性。说明CMH为KBv200耐药相关中性鞘糖脂，抑制耐药细胞CMH的合成可能是逆转肿瘤多药耐药的一种新方法。
