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RNA 结合蛋白38通过增加人表皮生长因子受体2的表达诱导乳腺癌BT474细胞对曲妥珠单抗的敏感性
目的：探讨敲除和过表达外源性RNA结合蛋白38（RNPC1）基因后，人表皮生长因子受体2（ HER-2）阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗敏感性的变化。方法采用慢病毒转染法敲除和过表达RNPC1基因，采用实时荧光定量PCR法检测各组BT474细胞中RNPC1和HER-2 mRNA的表达， Western blot法检测RNPC1和HER-2蛋白以及PI3K／AKT蛋白的表达。以不同浓度的曲妥珠单抗处理各组BT474细胞，采用流式细胞术检测各组BT474细胞的凋亡率，细胞计数试剂盒8（ CCK-8）法检测生长抑制率。以20μg／ml曲妥珠单抗处理各组BT474细胞，采用Western blot法检测各组BT474细胞中凋亡相关蛋白的表达。结果实时荧光定量PCR和Western blot法检测结果均显示，RNPC1过表达后， RNPC1和HER2 mRNA及蛋白的表达均增高；而敲除RNPC1基因后， RNPC1和HER2 mRNA及蛋白的表达均降低。 RNPC1的过表达能减少BT474细胞中p-PI3K和p-AKT蛋白的表达；RNPC1的敲除能增加p-PI3K和p-AKT蛋白的表达。5、10、15、20和25μg／ml曲妥珠单抗处理敲除实验组BT474细胞48 h后的生长抑制率分别为（9．67±1．18）％、（21．67±1．23）％、（30．33±1．25）％、（40．33±1．69）％和（53．00±1．63）％，均明显低于相应浓度曲妥珠单抗处理的敲除对照组[分别为（14．00±0．82）％、（27．67±1．25）％、（39．67±1．79）％、（53．67±1．50）％和（63．33±1．52）％，均P＜0．05]。5、10、15、20和25μg／ml曲妥珠单抗处理过表达实验组BT474细胞48 h后的生长抑制率分别为（20．33±1．25）％、（35．38±2．05）％、（50．43±2．12）％、（65．35±2．08）％和（76．00±2．16）％，均明显高于相应浓度曲妥珠单抗处理的过表达对照组[分别为（13．67±1．24）％、（27．86±2．05）％、（39．72±1．69）％、（53．33±1．70）％和（62．68±2．07）％，均P＜0．05]。10、20和30μg／ml曲妥珠单抗处理敲除实验组BT474细胞48 h后的凋亡率分别为（11．64±0．68）％、（16．60±1．01）％和（25．14±3．12）％，均明显低于相应浓度曲妥珠单抗处理的敲除对照组[分别为（14．71±0．61）％、（22．65±0．96）％和（39．03±0．85）％，均P＜0．05]。10、20和30μg／ml 曲妥珠单抗处理过表达实验组 BT474细胞48 h 后的凋亡率分别为（19．46±1．06）％、（30．87±0．98）％和（50．45±1．13）％，均明显高于相应浓度曲妥珠单抗处理的过表达对照组[分别为（14．38±0．64）％、（21．65±1．24）％和（38．03±0．85），均P＜0．05]。 RNPC1的过表达能增加BT474细胞中促凋亡蛋白Bim和Bad的表达，降低抑凋亡蛋白Bcl-xl的表达；RNPC1的敲除能减少Bim和Bad蛋白的表达，增加Bcl-xl蛋白的表达。结论 RNPC1可以通过增加BT474乳腺癌细胞中HER-2的表达，诱导乳腺癌细胞对曲妥珠单抗的敏感性。
关键词： 乳腺肿瘤 RNA结合蛋白38 人表皮生长因子受体2 增殖 凋亡 -
人乳腺癌ZR-75-1细胞中RNA结合蛋白38对孕激素受体表达的调节作用及其机制
目的明确乳腺癌细胞株ZR?75?1中RNA结合蛋白38（ RNPC1）的表达对孕激素受体（PR）表达的调节作用。方法采用慢病毒转染法过表达RNPC1基因，以实时荧光定量PCR（qRT?PCR）和Western blot法检测RNPC1调节PR表达的情况；以放线菌素实验研究RNPC1调控 PR表达的机制。采用免疫组化法检测80例乳腺癌组织中RNPC1蛋白和PR蛋白的表达。结果免疫组化检测结果显示，在PR蛋白表达阳性的29例乳腺癌组织中，RNPC1蛋白高表达16例；在PR蛋白表达阴性的51例乳腺癌组织中，RNPC1蛋白低表达41例。 qRT?PCR检测结果显示，过表达RNPC1组和过表达对照组乳腺癌ZR?75?1细胞中，PR mRNA的相对表达量分别为1．764±0．028和1．001±0．037，差异有统计学意义（ P＜0．01）；而干扰RNPC1组和干扰对照组乳腺癌ZR?75?1细胞中PR mRNA的相对表达量分别为0．579±0．007和1．000±0．002，差异有统计学意义（P＜0．01）。 Western blot法检测结果显示，在乳腺癌ZR?75?1细胞中，过表达RNPC1可使PR蛋白的表达增加；而敲除RNPC1的表达后， PR蛋白的表达减少。放线菌素实验结果显示，乳腺癌ZR?75?1细胞过表达RNCP1后，PR mRNA的稳定性增加，其半衰期由过表达对照组的4．0 h增加为6．5 h；而敲除RNPC1的表达后，PR mRNA的稳定性降低，其半衰期由干扰对照组的4．1 h降为3．0 h。结论 RNPC1在调节乳腺癌ZR?75?1细胞PR mRNA和蛋白的表达中发挥重要作用。
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乳腺癌组织中RBM38基因表达的临床意义
探讨RNA结合蛋白38(RBM38)基因表达的改变在乳腺癌发生、发展中的临床意义.收集上海中医药大学附属曙光医院2015年2月-2018年8月普外科治疗的乳腺癌患者78例,另取因良性病变手术切除的乳腺标本40例作为对照.RT-PCR检测RBM38基因的相对表达.乳腺癌组织中RBM38基因的表达量为0.27±0.08,显著低于对照组的0.48±0.16(P＜0.01).乳腺癌组织中RBM38基因的表达量在Ⅲ、Ⅳ期患者为0.21±0.05,显著低于Ⅰ、Ⅱ期患者的0.32±0.12(P＜0.01),中、低分化患者为0.25±0.06,显著低于高分化患者的0.39±0.14(P＜0.01),淋巴结有转移患者为0.19±0.04,显著低于无转移患者的0.31±0.11(P＜0.01).乳腺癌组织中RBM38低表达,低表达的RBM38可能参与了乳腺癌的发生、分化和转移过程.
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肺腺癌组织中 RNA 结合蛋白38的表达及意义
目的：观察肺腺癌组织中RNA结合蛋白38（RNPC1）mRNA和蛋白的表达，探讨其在肺腺癌发生发展中的作用。方法取50例肺腺癌患者的癌组织（观察组）和对应的癌旁组织（对照组）。采用RT-PCR法检测两组RNPC1 mRNA相对表达量，Western blot法检测两组RNPC1蛋白相对表达量。结果观察组RNPC1 mRNA及蛋白的相对表达量分别为0．357±0．170、0．294±0．149；对照组分别为0．271±0．128、0．206±0．099；观察组RNPC1 mRNA及蛋白表达量均高于对照组（P均＜0．01）。 RNPC1 mRNA表达与肺腺癌患者TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关（P均＜0．05），RNPC1蛋白表达与肺腺癌患者浸润深度、TNM分期有关（P均＜0．05）。结论 RNPC1在肺腺癌组织中呈高表达，在肺腺癌的发生发展过程中起重要作用。
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RNA结合蛋白38基因对人乳腺癌BT474细胞生物学特性的影响
目的 观察RNA结合蛋白38(RNPC1)基因过表达对人乳腺癌细胞BT474的生物学特性的影响.方法 细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组,采用慢病毒转染法,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、平板克隆形成实验、Transwell小室实验观察其对BT474细胞生物学特性的影响.结果 CCK-8实验显示,空白对照组、阴性对照组和实验组6d时吸光度(A)值分别为0.7147 ±0.0189、0.770 8±0.016 0、0.5568 ±0.043 6(P ＜0.05).克隆形成实验显示,14 d时细胞克隆形成数分别为(113.300 ±3.528)、(118.700 ±2.404)、(47.330±2.906)个(P＜0.01).Transwell小室实验显示,实验组细胞24h迁移、侵袭实验中滤过膜细胞数分别为(61.670 ±4.842)、(14.670±1.856)个,均比空白对照组和阴性对照组降低(P＜0.01).Western blot法显示,过表达RNPC1a下调基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的蛋白表达(P＜0.01).结论 RNPC1a基因可以抑制BT474细胞的生物学特性.RNPC1a与MMP-2的相互作用关系在乳腺癌的侵袭和转移中起调节作用.
