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放射线诱导的K562细胞增殖抑制的初步研究
目的 研究60Coγ射线诱导K562细胞增殖抑制的剂量效应关系以及受照过程中的K562细胞形态学变化和Egr-1基因表达的变化.方法 通过3H-TdR竞争性地掺入K562细胞的DNA合成,使用低本底液体闪烁计数器测定掺入细胞的放射性活度,分析K562细胞在受到60Co γ射线照射后的增殖抑制情况.采用吉姆萨染色法在显微镜下观察K562细胞的形态学改变.采用反转录PCR方法分析K562细胞在受照射后发生增殖抑制的过程中Egr-1基因的表达变化.结果 细胞增殖抑制表现出明显的剂量依赖性；照射前后K562细胞的形态和染色特点发生了明显的变化,具备了某些较高分化程度的红细胞才有的特点；在接受照射后的早期,与细胞分化、凋亡密切相关的基因Egr-1有一过性的表达上调,表现为在照射后的0.5h和1h,早期生长反应基因Egr-1的转录水平迅速升至高,此后迅速下降,到8h下降到低于正常水平.结论 K562细胞的增殖抑制表现显著的剂量依赖性；受照后的K562细胞在形态学上向更成熟的阶段分化.Egr-1基因在受60Coγ射线照射后可被一过性激活表达.
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人类乳头状瘤病毒E6蛋白及人类端粒酶反转录酶在子宫颈癌组织中的表达及其意义
目的 研究人类乳头状瘤病毒( HPV) E6蛋白、人类端粒酶反转录酶(hTERT)在子宫颈上皮内瘤变(CIN)及子宫颈癌中的表达,探讨二者之间的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法检测16例慢性子宫颈炎、14例CIN Ⅰ、44例CINⅡ～Ⅲ及38例子宫颈癌组织中HPV E6蛋白、hTERT的表达.结果 HPV E6蛋白在慢性子宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ和子宫颈癌组的阳性率分别为12.50％(2/16)、42.86％(6/14)、70.45％(31/44)和86.84％(33/38),差异有统计学意义(H=6.857,P=0.032)；各组之间两两比较,除慢性子宫颈炎与CIN Ⅰ组比较差异无统计学意义外(Z=-1.935,P=0.142),其余各组之间差异均有统计学意义(分别为Z=-3.929、-4.903、-1.968、-3.294、-2.336,均P＜0.05).hTERT在慢性子宫颈炎、CIN Ⅰ、CINⅡ～Ⅲ和子宫颈癌组的阳性率分别为6.67％(1/16)、28.57％(4/14)、59.09％(26/44)和84.21％( 32/38),差异有统计学意义(H=7.500,P=0.024)；各组之间两两比较,除慢性子宫颈炎与CINⅠ组差异无统计学意义外(Z=-1.637、P=0.294),其余各组之间差异均有统计学意义(分别为Z=-3.559、-4.893、-2.134、-3.776、-2.707,均P＜0.05).HPV E6蛋白表达与hTERT呈正相关(r=0.494,P=0.013).结论 HPV E6和hTERT的阳性表达率均随着子宫颈病变的加重而呈增高的趋势,二者之间呈正相关.HPV E6与hTERT之间可能存在相互作用而导致子宫颈癌的发生,二者的研究可能对子宫颈癌的早期诊断及治疗具有一定意义.
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反义端锚聚合酶1逆转录病毒载体的构建及其对舌癌细胞增殖的抑制作用
目的 探讨以端锚聚合酶1(TRF1-interacting,ankyrin-related ADP-ribose polymerase 1,tankyrase-1)为靶点的舌癌基因治疗的可能性.方法 将tankyrase-1的cDNA反向插入逆转录病毒载体pLXRN中,转染包装细胞PT67后获得反义重组病毒,感染舌癌TCCA-8113细胞.采用RT-PCR法检测tankyrase-1表达,端粒酶重复扩增法检测端粒酶活性,绘制生长曲线,了解细胞生长状态,倒置显微镜观察和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 反义tankyrase-1逆转录病毒载体作用后的舌癌细胞tankyrase-1表达下降,端粒酶活性及细胞生长受到明显抑制,细胞出现凋亡.结论 反义tankyrase-1对TCCA-8113细胞的生长和端粒酶活性具有明显的抑制作用,有可能以tankyrase-1为靶点对舌癌进行基因治疗.
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LINE-1在肿瘤研究中的新进展
长散布核元件-1(LINE-1)序列的异常与肿瘤的发生发展有着密切关系.LINE-1过表达可以促进细胞增殖,对肿瘤的预后及转移产生影响.LINE-1反转录转座和甲基化状态在临床诊断、预后、疾病监测以及治疗等方面有着潜在的应用价值.
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血液系统恶性肿瘤病毒基因治疗的载体选择
基因治疗是一种带有生物学标志的靶向治疗,可以作为难治复发性血液系统恶性肿瘤的另一种选择.合理的选择病毒载体是治疗的关键,现就载体的特性、基因插入突变、机体的免疫屏障、提高载体的靶向性、转基因的维持和表达几个方面的研究进展作一综述.
