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钙网膜蛋白在成釉细胞型颅咽管瘤钙化形成中的作用和机制研究
目的 探索钙网膜蛋白在成釉细胞型颅咽管瘤的表达情况及其在肿瘤钙化形成中的作用及机制.方法 回顾性分析77例成釉细胞型颅咽管瘤患者的资料.依据肿瘤术前钙化程度将其分组.对各组标本进行钙网膜蛋白免疫组织化学检测和蛋白免疫印迹检测.同时将颅咽管瘤原代细胞进行培养后,用钙网膜蛋白siRNA转染细胞,比较转染前后培养基钙质沉积情况.结果 16例肿瘤提示无钙化,22例(29％)肿瘤轻度钙化,24例(31％)呈中度钙化,15例(20％)呈重度钙化.63例标本免疫组织化学阳性.钙网膜蛋白和钙化程度成正相关水平(r=0.853,P ＜0.001).蛋白免疫印迹结果和免疫组织化学检测结果保持一致.对原代细胞转染钙网膜蛋白siRNA后,培养基内钙质沉积较对照组明显下降.结论 钙网膜蛋白在钙化的成釉细胞型颅咽管瘤间质中表达,其表达和颅咽管瘤钙化程度成正相关.钙网膜蛋白在成釉细胞型颅咽管瘤钙化中机制需要更多的研究.
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脊髓薄片器官型培养及组织化学鉴定方法研究
目的探讨脊髓薄片器官型培养的方法及其腹角α运动神经元、背角中间神经元的鉴别.方法利用出生8d乳鼠的腰段脊髓组织切片建立脊髓器官型培养模型,并用神经元的特异性SMI-32和Calretinin单克隆抗体进行免疫组化染色,对脊髓腹角α运动神经元和背角中间神经元加以鉴定,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量.结果脊髓片在体外生长良好,形态完整,α运动神经元和背角中间神经元的数目及各时点培养液中LDH含量恒定,脊髓片可存活2个月以上.结论脊髓的器官培养技术为研究脊髓生理、病理改变及神经保护提供了有效的方法.
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谷氨酸转运抑制剂诱导脊髓运动神经元选择性损伤
目的:观察谷氨酸转运体抑制剂苏-羟天冬氨酸(THA)对器官型培养的脊髓片的影响.方法:取出生后8 d乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养,在培养液中加入THA,免疫组化染色进行神经元计数,测定培养液中谷氨酸的含量,电镜观察超微结构改变.结果:THA组随培养时间的延长谷氨酸含量增高,α运动神经元数目减少,超微结构损伤明显,而脊髓背角的中间神经元的数目无显著变化,超微结构损伤相对较轻.结论:谷氨酸转运异常可以诱导选择性运动神经元损伤.
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母子分离对大鼠探索性行为和海马中钙网膜蛋白表达的影响
目的 观察母子分离对SD大鼠探索性行为和海马中钙网膜蛋白(Calretinin,CR)表达的影响.方法 在出生后第2～14 d对大鼠实施母子分离,第21 d观察大鼠在开场实验中的行为学表现,用免疫组织化学漂片法对PND34的大鼠海马进行染色.结果 在雄性大鼠中,母子分离组的总运动距离和总运动时间均显著低于对照组(P＜0.05).而在雌性大鼠中,两组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).且雄性大鼠的总运动距离和总运动时间均显著高于雌性大鼠(P＜0.05).雄性大鼠和雌性大鼠中,MS组和CON组的齿状回单位面积上表达CR的神经元的数量均未见明显差异.结论 在出生后经历母子分离(每天3h,出生后第2～14天),会降低雄性大鼠在第21天的探索能力.
