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抗心绞痛及血管扩张类药物的应用
1单硝酸异山梨酯单硝酸异山梨酯是在研究硝酸异山梨酯在体内代谢过程开发的第三代硝酯类血管扩张药,是用于抗心绞痛、心肌梗塞、慢性心功能不全的首选药物,由于其疗效确切、毒副作用小、无首过效应等许多优点而被广泛应用.
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提取与分离天然产物中有效成分的新方法——双水相萃取技术
双水相萃取技术是为适应生物工程的迅猛发展,于六十年代首先由瑞典的P.A.Albertsson等提出的,在近三十年得到广泛重视,已涉及到酶、核酸、生长激素、病毒等各种活性有效成分的分离及提纯.由于它具有活性损失小、分离步骤少、操作条件温和,且不存在有机溶剂残留的问题等优点,无疑在天然产物中有效成分的提取方面颇有前途.本文将介绍这种方法的概念、原理、过程开发及在天然产物有效成分提取中的初步应用.
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基于实验设计法针对抗VEGFR2-MICA融合蛋白进行发酵工艺优化
中国仓鼠卵巢细胞(CHO)是目前生产治疗性抗体的主要表达系统,该细胞的培养和抗体表达与培养条件密切相关.本实验室构建出了一种靶向VEGFR2单抗融合MICA的融合蛋白,具有良好的抗肿瘤活性,但是抗体产量较低,限制了该抗体的进一步研发和应用.为了探究适合该抗体的佳发酵体系,本研究通过Minitab16.0正交法设计多种流加培养方式,探索了4种培养基、流加物以及培养条件对发酵细胞密度和抗体产量的影响,并优化出佳的发酵方式,即以1×106 cells/mL接种密度将细胞接种于商业培养基CDM4PerMAb,每2d加入12％ (V/V)的流加物Boost2+ Boost5.为保持抗体的稳定性和质量一致性,将此发酵方式扩大至3L发酵罐以提高抗体的批次产量.终抗体产量可达54.45 mg/L,并且Western blot实验结果验证了融合抗体装配的正确性.MTT实验结果表明JZB01能有效抑制HUVEC、MDA-MB-231和K562的细胞增殖,具有显著的抗血管生成作用以及比母体单抗更有效的抗肿瘤活性.综上,本研究开发出了一种有利于抗体生产的发酵工艺,能够满足实验室抗体研发需求.本实验室将进一步扩大该工艺适用的发酵规模,以满足抗体的临床前研究以及后续工业化生产.
