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152 鼻粘膜纤毛功能评价方法研究进展
本文回顾了近年来鼻粘膜纤毛清除功能、纤毛摆动频率的体内体外检测方法的进展。
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纤毛研究进展
纤毛广泛分布于人体多种类型细胞表面,是一种结构复杂、功能精细的细胞器,其基本结构包括轴丝和外被的纤毛膜.纤毛在机体各组织器官中发挥着重要的生理功能,其结构和功能异常会导致多种纤毛相关疾病的发生.根据微管的组成及排列方式不同,哺乳动物的轴丝主要表现为9+2和9+0两种类型.9+2纤毛多具有运动功能,而9+0纤毛则多呈静止状态,主要功能是感知环境中信号变化并协助信号转导至细胞内部.纤毛运动受Ca2+,胞内pH以及cAMP、cGMP、PKC等激酶依赖性蛋白磷酸化等多因素调控.深入了解纤毛的结构、功能及运动调控机制,对相关疾病的诊疗具有指导意义.
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ATP对人鼻腔纤毛摆动频率的影响
目的 观察不同浓度三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)对体外培养人鼻腔纤毛运动的影响.方法 采用组织块培养法,应用高速数字化显微成像系统观察1 μmol/L、10 μmol/L和100 μmol/L ATP对人鼻腔纤毛摆动频率(ciliary beat frequency,CBF)的影响.结果 ① Hanks平衡盐溶液(Hanks balanced salts solution,HBSS)对CBF无明显影响.② 1 μmol/L ATP使CBF由(9.2±1.8)Hz升至(10.3±2.0)Hz(n=10)(P＜0.05).10 μmol/L ATP使CBF由(9.5±1.7)Hz升至(11.5±2.0)Hz(n=10)(P＜0.05).③ 100 μmol/L ATP使CBF由(8.7±1.1)Hz升至(11.5±1.4)Hz(n=10)(P＜0.05).结论 ATP可刺激体外培养人鼻腔纤毛摆动频率升高,在1～100 μmol/L范围内,ATP对CBF的刺激呈浓度依赖性.
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阿片类镇痛药对离体兔气管上皮纤毛摆动频率的影响
目的 观察阿片类麻醉性镇痛药对离体兔气管上皮纤毛摆动频率(CBF)的影响.方法新西兰白兔30只,用剥离法获得气管黏膜上皮组织4块/只(0.5 mm2)进行体外培养,将每只白兔的4块组织随机分为A、B、C、D 4组:0.9%氯化钠溶液、阿片药物临床用药浓度×1/10、临床用药浓度、临床用药浓度×10,120块组织随机加入以上浓度的4种溶液中,分别测量用药前,用药后20、40、60 min纤毛摆动频率(CBF).利用相差显微镜观测标本,测量纤毛摆动频率(CBF).结果与0.9%氯化钠溶液组比较,只有临床用药浓度及10倍临床用药浓度的瑞芬太尼在用药后20 min时,CBF降低( P＜0.05 ).芬太尼、舒芬太尼的3种浓度的4个时点及瑞芬太尼用药后60 min CBF的变化差异无统计学意义(P＞0.05).应用瑞芬太尼20 min时,临床用药浓度×10 较临床用药浓度的CBF变化差异有统计学意义(P＜0.05).结论瑞芬太尼临床用药浓度可以降低离体兔气管上皮纤毛摆动频率,其作用随瑞芬太尼浓度的增加而加大.舒芬太尼、芬太尼对离体兔气管纤毛摆动频率无影响.
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呼吸道上皮细胞培养模式与纤毛摆动频率的研究进展
呼吸道上皮细胞在呼吸疾病的发生发展中占有重要的地位,哺乳动物呼吸道上皮表面覆盖有纤毛,纤毛的摆动可以保护呼吸系统免于细菌、病毒以及其他致病因素的损害.因此纤毛摆动频率(CBF)的调控成为许多呼吸疾病发生发展的关键因素,可以用来研究呼吸道炎症、吸烟、感染、呼吸系统肿瘤等多种疾病.体外研究CBF的方法多是采用借助呼吸道上皮细胞培养以及活体呼吸道上皮分离等手段,但呼吸道上皮细胞的原代培养具有杂细胞多、不易分化纤毛等诸多问题.呼吸道上皮细胞的培养模式不断发展,本文简述了呼吸道上皮细胞主要的两种原代培养模式及各自的主要培养方法及改进发展情况,同时介绍并总结了呼吸道上皮细胞纤毛分化的鉴定及其摆动频率的检测,明确了各类培养模式对操作流程、培养周期、尤其是纤毛分化及摆动频率的影响,为在现有培养模式下改进技术得到能够诱导纤毛分化的有效培养方法奠定了基础.
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瑞芬太尼、舒芬太尼和芬太尼对蟾蜍上腭纤毛摆动频率的影响
目的:对比瑞芬太尼、舒芬太尼和芬太尼对蟾蜍上腭纤毛摆动频率(CBF)的影响.方法:取30只中华大蟾蜍,每只在显微镜下从上腭黏膜分离出一个约2 mm×2 mm的黏膜块,随机分为瑞芬太尼组、舒芬太尼组和芬太尼组.生理盐水稀释瑞芬太尼、舒芬太尼和芬太尼,终浓度分别为4,0.5,2 μg/L,每个黏膜块在浸入药液前及浸入后5,30和60 min时,使用相差显微镜及成像分析技术测量纤毛上皮的CBF.结果:舒芬太尼组和芬太尼组CBF在各时间点与基础值比较均无显著差异(P＞0.05);瑞芬太尼组CBF在各时间点与基础值比较明显降低(P＜0.05).各组CBF基础值无显著差异(P＞0.05);在其他时间点,瑞芬太尼组CBF较舒芬太尼和芬太尼组明显降低(P＜0.05).结论:瑞芬太尼降低蟾蜍上腭纤毛摆动频率,舒芬太尼和芬太尼则没有影响.
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米非司酮对人输卵管上皮纤毛摆动频率及雌、孕激素受体的影响
目的·探讨米非司酮在体外对人输卵管上皮纤毛摆动(CBF)及雌、孕激素受体表达的影响.方法·将25例人输卵管上皮组织在体外经米非司酮(0.1、1、10μmol/L)、孕酮10μmol/L、米非司酮(0.1、1、10μmol/L)+孕酮10μmol/L分别培养24 h后(另设空白对照组),测得CBF值;应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学技术分析经米非司酮处理后人输卵管上雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)的变化;透射电子显微镜观察10μmol/L米非司酮对人输卵管上皮超微结构的影响.结果·与空白对照组相比,米非司酮在0.1、1、10μmol/L浓度时对输卵管CBF无显著影响(P=0.728,P=0.405,P=0.941);孕酮10μmol/L组CBF明显下降(P=0.000),米非司酮在0.1、1、10μmol/L浓度时,呈剂量-反应拮抗孕酮下调CBF的效应(P=0.484,P=0.000,P=0.000).经米非司酮培养24 h后,输卵管上的ERα、PR表达上调;输卵管上皮纤毛超微结构与空白对照组比较,无明显差异.结论·米非司酮在人输卵管上发挥孕酮拮抗效应,这可能是这类常用口服紧急避孕药的输卵管避孕机制.
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丙泊酚对蟾蜍上腭纤毛摆动频率的影响
目的了解丙泊酚对蟾蜍上腭纤毛摆动频率(CBF)的影响.方法取30只中华大蟾蜍,每只在显微镜下将上腭粘膜分离成多个约2mm×2mm大小粘膜块,并分为四组,生理盐水稀释丙泊酚,终浓度分别为0.01、1、10和20μg/ml,每组粘膜块随机加入一种浓度丙泊酚.在加入前、及加入后5、30和60min,使用相差显微镜及成像分析技术测量纤毛上皮的CBF.结果0.01μg/ml组及1μg/ml组,BF在各时间点与基础值比均无显著差异(P＞0.05),μg/ml组和20μg/ml组,BF在各时间点与基础值比,有显著差异(P＜0.05).各组间的CBF基础值无显著差异(P＞0.05),在其他时间点比较,丙泊酚浓度增加,BF也增加,组间有显著差异(P＜0.05).结论丙泊酚增加蟾蜍上腭纤毛摆动频率.
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功能性内镜鼻窦手术后鼻黏膜纤毛转归的研究
功能性内窥镜鼻窦外科手术(FESS)已经成为治疗慢性鼻窦炎的主要手术方法,但仍需要客观的、特别是量化的证据来证明FESS后鼻黏膜纤毛功能得到恢复.我们对近年来有关FESS后鼻黏膜组织形态学、鼻黏膜纤毛功能转归的研究报道作一综述.
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慢性鼻窦炎鼻窦黏膜纤毛的活性与功能
慢性鼻窦炎是耳鼻喉科的一种常见疾病。随着鼻窦黏膜生理和病理学研究的深入，人们开始重新认识鼻窦的特异性和非特异性保护功能。鼻窦黏膜通过纤毛输送的方式将吸入的尘埃、细菌等有害物质排出窦外，从而保护了其正常的生理功能。1 慢性鼻窦炎对鼻窦纤毛的影响 黏膜纤毛系统功能包括两个方面：①纤毛活性；②纤毛传输速率，二者缺一不可。纤毛活性是指纤毛自身摆动的特性，纤毛传输速率是指纤毛系统运送物质和液体的速度。二者从不同角度反映纤毛系统的功能。纤毛摆动频率(CBF)为(9.5±1.7) Hz，主要反映纤毛活性。正常人鼻窦纤毛传输时间( 14.9±8.4)min，主要反映纤毛传输速率。一些研究发现，并不是纤毛摆动频率越快，传输速率就越高。
