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免疫治疗对变应性鼻炎患者鼻分泌物中螨变应原特异性IgG1和IgG4抗体水平的影响
目的检测变应性鼻炎患者和健康人群鼻分泌物中螨变应原特异性IgG1和IgG4抗体水平,以了解变应原特异性IgG亚型抗体在人群鼻分泌物中的分布和免疫治疗对抗体浓度的影响.方法利用负压吸引法收集健康人群、变应性鼻炎未治疗组和免疫治疗组患者的鼻分泌物,采用间接非竞争生物素-链亲和素酶联免疫法检测鼻分泌物中粗制螨变应原、螨纯化变应原Der fⅠ和Der fⅡ各变应原特异性IgG1和IgG4亚型抗体浓度.结果变应性鼻炎患者鼻分泌物中螨粗制变应原特异性IgG1和IgG4抗体浓度均高于健康人(Z=-3.623、-3.061,P均<0.01);免疫治疗组患者IgG1和IgG4抗体浓度均高于非治疗组(Z=-2.453、-3.408,P均<0.01).免疫治疗组变应性鼻炎患者鼻分泌物中螨纯化变应原Der fⅠ特异性IgG4抗体水平较健康人群增高(Z=-3.518,P<0.01);而免疫治疗组Der f Ⅱ特异性IgG1和IgG4抗体水平均高于健康人(Z=-2.366、-2.936,P均<0.01)和未治疗组(Z=-2.366、-2.937,P均<0.01).IgG1和IgG4亚群抗体中,螨粗制抗原、Der fⅠ和Der f Ⅱ特异性抗体水平相互间具有相关性;三类变应原特异性IgG1和IgG4抗体间存在相关性;免疫治疗组患者鼻分泌物中螨粗制变应原IgG1和IgG4抗体与血清中特异性IgE抗体间具有相关性. 结论健康人群和变应性鼻炎患者均具有对其环境变应原产生特异性IgG1和IgG4抗体的能力,而变应性鼻炎患者具有更高的反应性,能产生高于健康人的特异性IgG亚型抗体,而变应原特异性免疫治疗能显著增加鼻分泌物中IgG1和IgG4抗体的水平.鼻分泌物中IgG1和IgG4抗体的增加可能是免疫治疗有效的机制之一.
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PLGA为佐剂的螨变应原纳米疫苗治疗小鼠过敏性鼻炎研究
目的 探讨螨变应原Der p2经聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包载合成的纳米疫苗特异性免疫治疗小鼠过敏性鼻炎的疗效及机制.方法 取雄性SPF级BALB/c小鼠30只,4～6周龄.随机分为5组,即正常组、模型组、空白PLGA治疗组、螨抗原纳米疫苗治疗组(PLGA-DP2治疗组)及螨重组蛋白Der p2治疗组,每组6只.按常规方法建立尘螨过敏性鼻炎小鼠动物模型.建模成功后,空白PLGA治疗组、PLGA-DP2治疗组和螨重组蛋白Der p2治疗组分别使用空PLGA、PLGA-Der p2纳米疫苗(含50 μg Der p2蛋白)和50μg螨重组蛋白Der p2经小鼠腹部皮下注射进行免疫治疗,每隔3d注射1次,共治疗5次.治疗结束后,取螨变应原粗浸液200 μg分别滴鼻激发小鼠,激发结束后处死小鼠.在小鼠激发后的30 min内,观察并记录各组小鼠鼻部症状(喷嚏次数、搔鼻及鼻分泌物量)评分情况;检测血清中过敏原特异性抗体(IgE)及细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10和γ干扰素(INF-γ)]水平;观察鼻黏膜组织形态学变化.结果 螨抗原纳米疫苗PLGA-DP2载药量13.6％,包封率88.4％;纳米粒直径为200～ 400 nm.治疗后小鼠鼻部症状评分,PLGA-DP2治疗组鼻痒(0.67±0.52)分,喷嚏(1.00±0.63)分,清涕(1.67±0.41)分;螨重组蛋白Der p2治疗组分别为(0.83±0.41)分、(1.50±0.55)分、(0.83±0.75)分.明显低于模型组,且PLGA-DP2治疗组降低更明显(P＜0.05).PLGA-DP2治疗组和螨重组蛋白Der p2治疗组与模型组比较,血清特异性IgE及IL-4水平方面均明显降低,PLGA-DP2治疗组降低更显著(P＜0.05);而IL-2、IL-10和INF-γ水平显著增加,PLGA-DP2治疗组增加更显著(P＜0.05).PLGA-DP2治疗组小鼠鼻黏膜病理表现,上皮细胞基本排列整齐,组织结构清晰,相对模型组黏膜下层嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等炎性细胞减少,鼻黏膜纤毛结构相对比较完整,黏膜基层肿大程度减轻;基本与正常组一致.结论 尘螨变应原纳米疫苗加以PLGA为佐剂可有效地抑制小鼠过敏性鼻炎的炎症反应,极大地提高了过敏原疫苗的疗效.
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螨变应原点刺制品生物活性测定方法
目的 探讨以荧光酶联免疫竞争抑制法(简称UniCAP法)代替放射性吸附抑制试验(radioallergosorbent test,RAST)测定螨变应原点刺制品生物活性的可行性.方法 分别将螨变应原皮肤点刺制品中屋尘螨、粉尘螨点刺液及相应参考品进行系列稀释后,分别与等体积尘螨阳性血清混合,并设阴性对照及100％抑制对照.分别采用γ放射免疫计数器(RAST法)和ImmunoCAP 100E全自动过敏原分析仪(UniCAP法)测定特异性IgE(sIgE)浓度,计算点刺样品的生物活性.结果 采用UniCAP法测定结果的RSD值均低于20％.粉尘螨点刺液用两种方法测定的结果基本一致,而屋尘螨点刺液的结果相差较大,但均在标准范围内.结论 以UniCAP法替代RAST法测定点刺液活性具有可行性,可缩短制品的检验时限,并减少了对操作人员及环境的危害.
关键词： 螨变应原 生物活性 荧光酶联免疫竞争抑制 放射性吸附抑制试验 -
金华哮喘患儿的尘螨过敏测定
2005年10月～2006年9月,采用皮肤点刺试验测定并比较金华地区哮喘患儿对户尘螨、粉尘螨及热带剥爪螨(热尘螨)等3种尘螨变应原的反应性.结果显示哮喘患儿对户尘螨、粉尘螨变应原的阳性率分别为80.6%、77.8%,其中强阳性分别占65.5%和64.3%;热尘螨的阳性率为61.1%,低于户尘螨和粉尘螨(χ=21.39,P＜0.05),且几乎无强阳性者.热尘螨阳性者对户尘螨、粉尘螨变应原的阳性率分别高达100%(44/44)和95.9%(42/44);热尘螨阴性者对户尘螨、粉尘螨变应原的阳性率均为28.6%(8/28).结果表明户尘螨、粉尘螨是金华地区儿童哮喘的重要变应原,该组患儿对热尘螨的阳性率61.1%不能排除户尘螨、粉尘螨变应原交叉反应的干扰.
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海南儿童哮喘常见吸入性变应原的调查
目的 了解海南地区儿童哮喘常见吸入性变应原,探讨有效实施变应原避免的措施,为成功开展特异性免疫治疗提供依据.方法 对2 361例哮喘儿童进行13种常见过敏原皮肤点刺试验,对其中450例患儿进行10种过敏原体外特异性IgE检测.结果 2 361例哮喘患儿皮肤点刺阳性率为86.0%,其中,屋尘螨及粉尘螨阳性率分别为91.2%及89.3%,热带螨为86.3%,且阳性级别高.对三种螨呈三级以上皮肤点刺阳性反应的患者分别占65.7%、65.4%和58.2%.动物皮毛中,狗毛阳性率为22.4%,猫毛14.4%;德国小蠊及美洲大蠊分别为28.7%及21.9%,但其阳性级别通常很低.450例体外过敏原检测阳性率为72.4%,其中仍以螨虫阳性率高,屋尘螨66.2%,粉尘螨59.6%.结论 屋尘螨、粉尘螨和热带螨是海南地区重要的过敏原,其阳性率和阳性级别均比国内其他地区高.狗毛、猫毛、蟑螂等过敏原在海南也占一定比例.
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东北地区近10年间螨变应原诱发的过敏性疾病现状调查
目的：调查东北地区近10年间螨变应原诱发的过敏性疾病谱及其临床特征。方法据我科已建立的信息数据库，以皮肤点刺试验螨变应原阳性为纳入标准，统计分析2004年1月~2014年12月10年间该人群相关过敏性疾病患病情况及其影响因素。结果纳入研究人数157100人，螨变应原相关性过敏性疾病多见的是过敏性哮喘，其次为变应性鼻炎、荨麻疹、皮炎。结论加强居室环境螨类控制，是减轻螨变应原相关性过敏性疾病症状并减少其发作的重要预防措施。
