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  • 碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子对人牙周膜干细胞体外增殖、迁移和黏附的影响

    作者:张戎;张勉;李成华;王鹏程;陈芳;王勤涛

    目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,FGF-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对体外培养的人牙周膜于细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)增殖、迁移和黏附能力的影响,探讨两种生长因子促牙周再生的相关机制.方法 体外培养人PDLSC,分为A组:2%胎牛血清+α-低必需培养基(α-minimum essential medium,α-MEM)(对照1组);B组:20 μg/L FGF-2+A组;C组:10 μg/L VEGF+A组;D组:20 μg/L FGF-2+10 μg/L VEGF+A组;E组:10%胎牛血清+α-MEM(对照2组);F组:20 μg/L FGF-2+E组;G组:10 μg/L VEGF+E组;H组:20 μg/L FGF-2+ 10 μg/L VEGF +E组,按分组要求施加刺激,第1、3、5、7天用可溶性噻唑盐法观察两种生长因子在不同体积分数的胎牛血清中对PDLSC增殖能力的影响;根据增殖实验结果重新分组:对照组:10%胎牛血清+ α-MEM;FGF-2组:20 μg/L FGF-2+对照组;VEGF组:10 μg/L VEGF+对照组;FGF-2+ VEGF组:20 μg/L FGF-2+ 10 μg/L VEGF+对照组,流式细胞仪、细胞黏附实验、划痕损伤愈合迁移实验观察细胞周期、迁移、黏附能力的变化.结果 在2%胎牛血清中,FGF-2和VEGF促增殖效果均不明显;在10%胎牛血清中,刺激第3、5、7天FGF-2组A值(分别为1.22±0.17、2.15±0.19、2.72 ±0.11)均显著高于对照组(分别为0.76 ±0.16、1.25±0.06、1.64 ±0.09) (P <0.01),但第5、7天A值均显著低于FGF-2+VEGF组(分别为2.46±0.17、3.18±0.27)(P<0.05),第5、7天VEGF组A值(分别为1.66±0.05、2.13±0.13)显著高于对照组,但显著低于FGF-2组(P<0.05);流式细胞仪结果示VEGF组增殖指数[(34.3±2.0)%]显著低于FGF-2[(46.8±3.2)%]和FGF-2+VEGF组[(45.0±4.0)%],但显著高于对照组[(14.5±1.7)%](P<0.01).细胞迁移实验结果示FGF-2组与对照组迁移至创伤区的细胞数比值差异无统计学意义(P>0.05);细胞黏附实验结果示FGF-2组黏附细胞数比值(79±4)显著高于VEGF组(62±4)(P<0.05).光镜下观察示FGF-2组细胞在材料表面形态好于未加FGF-2组.结论 FGF-2和VEGF均可呈时间依赖性促进PDLSC增殖,二者联合应用有一定协同作用;FGF-2促PDLSC黏附能力较VEGF强;VEGF可促进细胞向创伤部位迁移.

  • 体外诱导人骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化

    作者:梁峰;王韫芳;岳慧敏;南雪;施双双;闫舫;李荣;裴雪涛

    目的:研究人骨髓间充质干细胞向肝细胞的诱导分化,为肝组织工程提供理想的细胞来源.方法:以肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4对种植于基底膜基质中的人骨髓间充质干细胞进行三维立体诱导培养,在培养后不同时间,分别进行形态观察、AFP、Alb的免疫组化荧光染色及靛青绿的摄取与排泌试验.结果:该条件下诱导后的人骨髓间充质干细胞生成肝细胞样细胞,阳性表达肝细胞特有表面标志AFP、Alb,并具备肝细胞特有的摄取与排泌靛青绿的活性功能.结论:肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4及基底膜基质可能在体外人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的过程中提供适宜的微环境并起重要作用,这为间充质干细胞在肝组织工程中的应用提供了理论与技术上的支持.

  • 复方多黏菌素B软膏联合bFGF治疗儿童深Ⅱ度烫伤创面疗效分析

    作者:杨晓津;方涛;高秀清

    目的:观察复方多黏菌素B软膏联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对儿童深Ⅱ度烫伤创面的治疗效果,为临床治疗提供参考。方法选取天津市第四中心医院2015年3月—2016年3月期间收治的80例深Ⅱ度烫伤患儿为研究对象,按照治疗方式分为对照组(40例)及联合治疗组(40例)。对照组给予bFGF治疗,联合治疗组采用复方多黏菌素B软膏及bFGF联合治疗。比较2组患者烫伤创面感染率、创面愈合时间及愈合后瘢痕生成情况。结果伤后7、10、15和20 d,联合治疗组创面感染率均较对照组降低(P<0.05)。联合治疗组创面愈合时间较对照组缩短[(21.53±1.33)d vs.(25.76±1.50)d,t=13.345,P<0.01)];瘢痕发生情况优于对照组(U=5.077,P<0.05)。结论复方多黏菌素B软膏联合bFGF治疗儿童深Ⅱ度烫伤创面具有抗感染、加速创面愈合及预防瘢痕生成等优点,临床疗效显著。

  • 和颜坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠性激素水平和VEGF、bFGF mRNA表达的影响

    作者:徐文君;高慧;李杨;梁策

    目的 探讨中成药坤泰胶囊治疗不同阶段卵巢早衰的效果.方法 采用雷公藤多苷片75mg/kg制作卵巢早衰大鼠模型;将60只SD雌性大鼠分别为空白组,模型组,造模前坤泰胶嚢组(造模前组),造模中坤泰胶囊组(造模中组),造模后坤泰胶囊组(造模后组),西药组(结合雌激素治疗).观察大鼠行为学的改变,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、血清雌二醇(E2)及抗缪勒管激素(AMH)的水平.RT-PCR法检测卵巢组织中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) mRNA的表达.结果 空白组和各给药组血清FSH及LH水平明显低于模型组(P<0.05),E2、AMH水平明显高于模型组(P<0.05).空白组及各给药组卵巢组织中VEGF、bFGF mRNA的表达明显高于模型组(P<0.05),其中造模前组VEGF、bFGF mRNA水平高于造模中组、造模后组(P<0.05),造模前组VEGF mRNA的表达与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 坤泰胶囊对卵巢性激素水平具有调节作用,能提高血清E2及AMH的水平,降低血清FSH、LH的水平,提高卵巢对性激素水平的敏感性;修复受损的卵巢组织,促进卵泡的生长发育,从而抑制卵泡过早耗竭.

  • 富血小板血浆在促进兔烫伤创面愈合中bFGF VEGF的表达及意义

    作者:胡以信;袁杰;邹勇;郭力;刘兵

    目的:探讨富血小板血浆(PRP)在促进兔烫伤创面愈合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法将24只大白兔分为对照组和实验组,对照组用磺胺嘧啶银(SD-Ag ),实验组用PRP。在7、10、14 d ,两组分别随机选取4只大白兔麻醉处死后取材,行创面愈合率比较、H E染色及免疫组织化学检测。结果7、10、14 d实验组创面愈合率均较对照组高( P<0.05)。7 d时,实验组肉芽组织灶显著,细胞及血管数量密集。10 d时,实验组可见毛细血管量及成纤维细胞较对照组更为丰富。14 d时,实验组显示大部分成纤维细胞转化为纤维细胞而毛细血管数减少。7、10 d bFGF及VEGF阳性细胞数两组均增高,实验组明显高于对照组(P<0.05),而14 d bFGF及 VEGF阳性细胞数两组均逐步下降(P>0.05)。结论 PRP可以促进大白兔烫伤创面愈合,主要机制是明显增加早期创面中bFGF及VEGF表达。

  • 红景天对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用及对碱性成纤维细胞生长因子的影响

    作者:陆明峰;黄荫浩;陆齐;吴翔

    目的 探讨中药红景天对急性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌血管新生作用及其对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响.方法 采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,4周后处死动物.Ⅷ因子免疫组织化学染色后对各组大鼠梗死边缘区微血管进行计数.免疫组织化学技术及Western blot技术检测各组缺血心肌bFGF蛋白质水平表达.结果 术后给药组和提前给药组血管计数均较单纯手术组增多(P<0.01),且提前给药组明显多于术后给药组(P<0.01);术后给药组和提前给药组缺血心肌bFGF表达较单纯手术组增加(P<0.01),提前给药组缺血心肌bFGF表达明显高于术后给药组(P<0.01). 结论红景天能够促进心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生,其作用机制与上调局部心肌bFGF蛋白表达有关.预给红景天可能增强对心肌梗死大鼠的上述作用.

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