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  • SARS冠状病毒多聚酶区抗原在感染诊断中的作用探讨

    作者:沈成利;王弋嘉;石英;闫惠平;吴昊;赵春惠;周育森

    目的原核表达严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)非结构蛋白RNA多聚酶表位区,了解其在SARS-CoV感染诊断及作为病毒复制指标方面的意义.方法通过PCR扩增获得RNA多聚酶表位区基因,与原核表达载体pET32a+连接,转化大肠杆菌BL-21表达获得重组融合蛋白.经切胶透析纯化后,应用ELISA检测SARS患者及动物模型血清标本的IgG抗体.结果获得原核表达的RNA多聚酶表位区.ELISA检测正常人血清均阴性,SARS患者血清阳性率为95%;检测SARS病毒感染实验动物血清阳性率100%,灭活纯化病毒接种恒河猴均为阴性.结论 RNA多聚酶表位区具有很好的免疫原性,可用于感染诊断的检测及作为病毒复制的指标.

  • 高三尖杉酯碱对Jurkat细胞端粒酶活性的影响及机制研究

    作者:王蕾;金洁

    目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞端粒酶活性的影响及其机制.方法采用改良的Krupp荧光素标记的端粒重复扩增(TRAP)方法检测HHT对Jurkat细胞端粒酶活性的影响.半定量RT-PCR方法检测HHT作用后Jurkat细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)及c-myc原癌基因mRNA的表达水平.结果 HHT对Jurkat细胞端粒酶活性及hTERTmRNA、c-myc基因mRNA表达有明显抑制作用.结论 HHT可通过下调hTERT基因转录抑制淋巴细胞的端粒酶活性.c-myc可能参与调控淋巴细胞hTERT基因转录.

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