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饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸对肺癌细胞增殖与自噬的影响
目的 研究饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸对肺癌细胞增殖与自噬的影响.方法 用0、30、60、120、240μmol/L硬脂酸(饱和脂肪酸)和DHA(不饱和脂肪酸)分别处理肺癌细胞A549,绘制细胞生长曲线并计算克隆形成率以检测细胞增殖.采用硬脂酸和DHA分别处理A549细胞24h后,采用激光共聚焦显微镜从形态学方面观察细胞自噬情况.采用硬脂酸和DHA分别处理A549细胞12、24、36h后,用Western blotting检测细胞自噬相关蛋白的表达.结果 30~240μmol/L硬脂酸和DHA均有抑制A549细胞增殖的作用(P<0.05),硬脂酸、DHA处理A549细胞24h后均检测到细胞出现明显的自噬;Western blotting结果 显示,硬脂酸、DHA分别处理A549细胞12、24、36h后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P<0.05),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(ser2481)磷酸化水平降低(P<0.05).结论 饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸均有抑制肺癌细胞增殖、诱导肺癌细胞自噬的作用,其机制可能与p-mTOR(ser2481)信号通路有关.
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软脂酸和硬脂酸诱导INS-1细胞凋亡的对比研究
目的 对比研究软脂酸(palmitic acid,PA)与硬脂酸(stearic acid,SA)对大鼠胰岛素瘤(INS-1)细胞凋亡的影响.方法 将INS-1细胞分为对照组、PA组和SA组,干预细胞24h后,通过四甲基偶氮唑蓝(thiazoly blue tetrazolium bromide,MTT)实验检测细胞的存活率,吖啶橙/溴化乙锭(acridine orange/ethidium bromide,AO/EB)染色观察细胞的凋亡情况,Western Blot检测多聚(ADP-核糖)聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell leukemia 2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)的表达情况.结果 通过MTT实验,选择400μmol/L作为后续实验的干预浓度.细胞存活率:对照组＞SA组＞PA组(P＜0.05)；细胞凋亡率:PA组＞SA组＞对照组(P＜0.05)；PA组和SA组都发生了PARP蛋白的裂解,SA组的裂解程度弱于PA组；Bcl-2和Bax蛋白的表达量比值:对照组＞SA组＞PA组(P＜0.05).结论 SA诱导INS-1细胞凋亡的作用明显弱于PA,其机制与PARP的裂解减弱、Bcl-2和Bax蛋白的表达量比值(Bcl-2/Bax)上调有关.
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不同工艺生产的硬脂酸镁质量对比及其生产工艺评价
目的 对目前生产硬脂酸镁产品的2种不同生产工艺进行对比分析,根据对质量的影响评价生产工艺的优劣.方法 通过多种调研方式了解硬脂酸镁生产工艺并进行分类和检测,将实验结果按2种不同生产工艺进行统计分析并进行评价.结果 合成工艺的硬脂酸相对含量略高于精制工艺,而2种生产工艺硬脂酸与棕榈酸相对含量的总和则相当.2种生产工艺无机杂质和含量测定结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05).整体而言,2种生产工艺质量控制水平基本相当.结论 精制工艺需选择质量稳定的原料供应商;合成工艺中影响硬脂酸镁质量的主要因素为合成反应化学试剂的质量,相比于精制工艺具有较高的自主控制能力.
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通过外周血细胞变化鉴别骨髓增生异常综合征难治性贫血与巨幼细胞性贫血
骨髓增生异常综合征难治性贫血(Myelodsplastic syndrome Refractory anemia,MDS-RA)与巨幼细胞性贫血(Megalobastic anemia,MA)的临床表现和骨髓象有很大的相似性,对于MDS-RA与MA的鉴别诊断,Anil KJ[1]以及王浩军等[2]利用计算机图像处理技术来识别各种形态的单核细胞与中性粒细胞,曹志红等[3]和张泓等[4]的研究都要求比较高的免疫学和分子生物学实验条件.这些鉴别诊断方法由于技术要求高要进入临床应用还有一定的距离.1996年7月～2003年12月通过对患者外周血的单核细胞和中性粒细胞分类计数与形态学检查方法,有助于对两种疾病进行鉴别诊断.
