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阿曼托双黄酮对辐射损伤小鼠骨髓细胞的保护作用
目的：探讨阿曼托双黄酮（amentoflavone，AF）对辐射小鼠骨髓细胞的防护作用及可能机制。方法培养C57BL/6小鼠骨髓原代细胞，分为正常对照组、照射对照组、AF 2.5和5μmol/L组，每组3复孔，给药12 h后换成普通培养基，给予12 Gy 60Coγ射线一次性照射，于照后6和12 h分别用Hoechst染色法检测细胞的凋亡，用PI染色和流式细胞仪检测细胞周期，用酶联免疫吸附法检测细胞培养基中TNF-α的浓度。结果 AF对辐射后小鼠骨髓细胞凋亡及细胞周期变化无明显影响，但能显著降低辐射后细胞上清中TNF-α的浓度，且对照后6 h细胞作用明显（2.5μmol/L组P＜0.05，5μmol/L组P＜0.01）；照后12 h也具有同样趋势，与照射对照组相比，5μmol/L组细胞上清中TNF-α表达明显降低（P＜0.05）。结论 AF对C57BL/6小鼠骨髓细胞具有一定的辐射防护作用，它可能是通过抑制辐射后骨髓细胞TNF-α的表达来发挥辐射防护作用。
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反相高效液相色谱法测定不同产地卷柏中阿曼托双黄酮的含量
目的 建立测定不同产地卷柏中阿曼托双黄酮含量的高效液相色谱法.方法 色谱柱为Agilent ZORBOX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸(40:60),柱温30 ℃;流速为0.8 ml·min-1;检测波长337 nm.结果 阿曼托双黄酮含量为1.197%,平均回收率为99.30%,RSD=0.98%(n = 9),线性范围0.1～0.6 μg·ml-1(r=0.999 8).结论 该法快捷、灵敏、准确,可作为评价卷柏药材质量的参考依据.
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不同产地卷柏药材中总黄酮的含量测定
目的 研究不同产地卷柏中总黄酮的含量测定方法.方法 以阿曼托双黄酮为对照品,绘制标准曲线,将卷柏95%乙醇回流提取液,在337 nm波长下测定吸收度.结果 总黄酮含量为1.52%,平均回收率为99.90 %,RSD=1.35%(n=6),线性范围1.92～11.52 μg·ml-1,r=0.999 8.结论 该法测定卷柏总黄酮含量,简单、迅速、准确,可用于卷柏的质量控制.
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阿曼托双黄酮对癫痫大鼠记忆损害的改善作用
目的 观察阿曼托双黄酮(AF)对匹罗卡品致痫大鼠学习记忆功能影响,探讨其作用机制.方法 SD大鼠随机分为癫痫组、AF干预组、空白对照组.建立锂-匹罗卡品致痫大鼠模型,Morris水迷宫评价大鼠空间学习记忆能力,酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法检测海马组织内氧化应激及胆碱能功能.结果 与癫痫组比较,AF干预组空间学习记忆能力明显提高[(17.7±5.2)s,P＜0.01],海马乙酰胆碱酯酶(AchE)活性增强[(30.66±5.79) U/L,P＜0.01],抗氧化酶谷胱甘肽(GSH)水平提高[(6.08±0.54) mg/g蛋白,P＜0.01].结论 AF可提高海马乙酰胆碱酯酶的活性,抑制氧化应激反应,改善致痫大鼠学习记忆功能.
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阿曼托双黄酮对癫痫小鼠海马神经元的保护作用
目的 观察阿曼托双黄酮(AF)对匹罗卡品点燃小鼠癫痫发作、海马神经元的影响,并探讨其机制.方法 建立匹罗卡品小鼠点燃模型,并给予AF进行干预.综合应用神经电生理、病理学、分子生物学等技术,观察AF对点燃小鼠癫痫发作以及海马神经元的影响.结果 与癫痫组比较,AF组小鼠行为学和局部场电位信号(LFP)表现均相对稳定,海马CA1区存活神经元数目显著增加[(121.40 ±8.72)个,P＜0.05],原位末端转移酶标记(TUNEL)染色结果显示凋亡神经元数目减少[(1.70±0.98)个,P＜0.01],免疫组织化学(4 894.25±771.18)和Western blot结果(0.49±0.13)显示核因子-κB(NF-κB) p65表达明显降低(P＜0.01).结论 AF对小鼠癫痫模型具有明显的预防惊厥发生和神经保护作用,其作用机制与AF抑制癫痫发生时的脑内炎性反应有关.
