首页 > 文献资料
-
卷柏提取物对去势大鼠股骨中羟脯氨酸含量的影响
目的:采用柱前衍生化法对去势大鼠股骨中羟脯氨酸(HyP)的含量进行测定,观察卷柏提取物对去势大鼠股骨中HyP含量的影响.方法:Wistar雌性大鼠摘除卵巢后1周开始ip卷柏总提物665 mg·kg-1,卷柏正丁醇部位85 mg·kg-1,卷柏水部位490 mg·kg-1,持续11周后处死,取其股骨,采用2,4-二硝基氯苯柱前衍生化反相高效液相色谱法,观察卷柏提取物对去势大鼠股骨中HyP含量的影响.结果:HyP 0.125～2.00 g·L-1线性关系良好(r=0.999 4),精密度试验RSD<1%,24 h内稳定性试验RSD<5%.加样回收率均在90%～110%;卷柏水部位和正丁醇部位均能增加去势大鼠股骨中HyP含量.结论:卷柏提取物能增加去势大鼠股骨中HyP含量,其中卷柏水部位和正丁醇部位,对去势大鼠骨质疏松具有一定的干预作用.
-
卷柏中雌激素类成分的提取
目的:对不同提取方法所得的卷柏提取物进行雌激素活性筛选,探索卷柏发挥雌激素作用的活性部位.方法:采用小鼠子宫增重试验,将卷柏分别以70%乙醇回流所得总部位经聚酰胺柱分离;95%乙醇回流药渣经水提取;药渣水提物去除多糖等所得的卷柏各组分进行雌激素活性筛选.运用HPLC指纹图谱技术对卷柏95%醇提物、药渣水提物进行分析.结果:70%乙醇回流所得的卷柏总部位、药渣水提物高剂量、药渣水提物去多糖组与空白组比较,均能显著性增加小鼠子宫系数(P＜0.01),卷柏其余各组与空白组相比无明显作用;HPLC指纹图谱显示卷柏95%醇提物中穗花杉双黄酮为其主要成分,而药渣水提物中基本不含穗花杉双黄酮.结论:95%乙醇回流药渣水提法与聚酰胺柱分离法相比,前者更适合于卷柏雌激素活性物质的提取分离;水溶性除多糖物质为卷柏中发挥雌激素样作用的有效部位;HPLC指纹图谱结果提示,穗花杉双黄酮不是卷柏发挥雌激素作用的成分.
-
卷柏各部位对糖尿病大鼠胰岛组织形态及骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4表达的影响
目的:观察卷柏醇提物所得各部位对糖尿病大鼠胰岛组织形态及骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)表达的影响.方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ,65mg/kg)诱导糖尿病大鼠模型,观察卷柏各部位给药7d后,空腹血糖、餐后4h血糖变化,观察胰岛组织HE染色切片,并通过免疫组化的方法观察GLUT-4的表达情况.结果:卷柏80％乙醇部位组大鼠空腹血糖及餐后4h血糖与模型组比较均显著降低(P＜0.05),GLUT-4的表达量比模型组显著增加(P＜0.01),胰岛组织形态与模型组比较也有所改善.结论:卷柏80％乙醇部位可能是卷柏降糖的活性部位,其降糖作用机制可能与修复受损的胰岛组织,增强骨骼肌GLUT-4表达,进而增强机体胰岛素敏感性有关.
-
不同产地10种卷柏雌激素样活性筛选的实验研究
目的:研究不同产地的10种卷柏雌激素样活性.方法:采用MCF-7细胞增殖实验与小鼠子宫增重实验结合,进行不同产地卷柏雌激素样活性筛选;结合血清药理学实验综合评价雌激素样活性;以pERE-TAL-luc、p β gal-Control、pCXN2-hER α或pCXN2-hER β转染HEK293细胞,雌激素应答元件(ERE)调控的报告基因瞬时表达检测,探讨卷柏发挥雌激素样作用的途径.结果:卷柏属植物卷柏(JB6)和江南卷柏(JB7)能明显升高小鼠的子宫系数,与空白组相比有显著性差异(P＜0.01);JB6和JB7可显著促进MCF-7细胞增殖;JB6和JB7不论由雌激素受体(ER)α或ERβ介导均具有雌激素活性,与ERα的亲和力高于ERβ.结论:JB6和JB7具有雌激素样活性,其中JB6的雌激素样作用强于JB7.卷柏激活基因转录发挥雌激素样作用主要是通过ERα介导的.
-
HPLC同时测定卷柏药材中炔多酚和双黄酮的含量
目的:采用HPLC-DAD,同时测定不同产地的10批卷柏和12批垫状卷柏中2种炔多酚(selaginellin,selaginellin B)和4种双黄酮(穗花杉双黄酮,穗花杉双黄酮-7-甲醚,扁柏双黄酮,异柳杉双黄酮)的含量.方法:采用Agilent 1100高效液相色谱系统,Waters Cosmosil C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0mL·min -,检测波长280,337 nm,柱温30℃.结果:所测样品中6种活性成分的量差异较大,穗花杉双黄酮在卷柏中的质量分数(5.628～9.184 ag·g-1)普遍高于垫状卷柏(0.823 ～7.131 mg·g-1),而selaginellin在垫状卷柏中的质量分数(0.123～0.593 ag· g-1)普遍高于卷柏(0.067 ～0.133 mg· g-1).此方法加样同收率和线性范围均符合要求.结论:该方法简便快速、分离效果好、灵敏度高、重现性好,可为全面控制卷柏药材的质量提供参考.
-
卷柏StTPS基因克隆及其在复苏过程中的表达分析
卷柏为典型极端耐旱的复苏药用植物,海藻糖在植物复苏过程中发挥重要作用,海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)是植物体内合成海藻糖的关键酶.该研究根据卷柏转录组数据拼接获得海藻糖-6-磷酸合成酶基因序列,以卷柏总RNA为模板合成cDNA,采用RT-PCR法克隆验证该序列,并进行生物信息学分析,结果显示该序列编码区长2 799 bp(St TPS,GenBank号MH155231),编码932个氨基酸,无信号肽,StTPS可能定位于叶绿体上且无跨膜结构,包含2个糖原磷酸化酶糖基转移酶(GPGTF)家族的保守结构域.在此基础上,模拟卷柏复苏(脱水和复水)过程,应用qRT-PCR进行其在复苏过程中的表达量分析,并同步采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定卷柏复苏过程中海藻糖含量变化.结果显示StTPS基因相对表达量及海藻糖含量均随着脱水时间的延长而增加,随着复水时间的延长而下降,且二者之间呈正相关,初步说明StTPS在卷柏复苏过程中发挥重要作用.
关键词： 卷柏 海藻糖 海藻糖-6-磷酸合成酶 qRT-PCR 基因表达 -
卷柏多糖对肠道病毒71型复制的体外抑制作用
目的 研究卷柏多糖对EV71病毒复制的体外抑制活性.方法 将卷柏多糖不同提取物设置不同剂量作用于人恶性横纹肌肉瘤细胞(RD),采用细胞病变效应(CPE)及细胞计数试剂盒(CCK8法)检测细胞存活率,并计算药物的半数中毒浓度(CC50)；培养EV71感染的RD细胞,建立体外病毒感染模型,并设立正常细胞对照组和阳性药物对照组(利巴韦林3.2mg/L),将卷柏多糖不同提取物设置不同剂量作用于EV71感染后的RD细胞,应用CCK8法检测药物抗病毒抑制率,并计算药物的半数抑制浓度(IC50)；收集药物作用于感染后RD细胞的培养液上清,进行荧光定量PCR检测,观察药物对EV71病毒RNA表达的影响.结果 卷柏30％醇沉多糖和50％醇沉多糖对RD细胞的CC50值分别为396和142 mg/L,抑制EV71病毒致CPE的IC50值分别为40.8和26.2 mg/L.与病毒感染对照组相比较,卷柏30％和50％醇沉多糖作用后,经EV71感染的RD细胞培养液中病毒RNA拷贝数显著降低(P＜0.05).结论 卷柏及其30％和50％醇沉多糖可以作为新的抗EV71的潜在药物.
-
卷柏中化学成分的分离与结构鉴定
目的研究中药卷柏(Selaginella tamariscina (Beauv.) Spring)水提物中的化学成分.方法用Sephadex LH-20及硅胶等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质、光谱数据进行结构鉴定.结果得到9个化合物,分别鉴定为(2R,3S)-二氢-2-(3′,5′-二甲氧基-4′-羟基苯基)-3-羟甲基-7-甲氧基-5-乙酰基苯骈呋喃(1),3-羟基-苯丙酸-(2′-甲氧基-4′-羧基苯酚)酯(卷柏酯A,2),丁香脂素(3),1-(4′-羟基-3′-甲氧基苯基)丙三醇(4),阿魏酸(5),咖啡酸(6),香荚兰酸(7),丁香酸(8),7-羟基香豆素(9).结论化合物1,2为新化合物,其余化合物均为首次从卷柏属植物中分离得到.
-
卷柏化学成分研究
目的研究中药卷柏(Selaginella tamariscina (Beauv.) Spring)水提物中的化学成分.方法利用Sephadex LH-20及硅胶等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质、光谱数据进行结构鉴定.结果得到4个化合物,分别鉴定为1-羟基-2-[2-羟基-3-甲氧基-5-(1-羟基乙基)-苯基]-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-丙烷-1-O-β-D-葡糖苷(卷柏苷B,I),腺苷(II),鸟苷(III),熊果苷(IV).结论卷柏苷B为新化合物,腺苷、熊果苷、鸟苷为首次从卷柏属植物中分离得到.
-
卷柏中一个新木脂素苷的分离与鉴定
目的研究卷柏的化学成分.方法利用大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、硅胶柱色谱进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构.结果从卷柏中分离得到4个化合物,分别鉴定为(7S,8R)-7,8-二氢-7-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-8-羟甲基-[1′-(7′-羟基)乙基-5′-甲氧基]苯骈呋喃-4-O-β-D-葡糖苷(命名为卷柏苷C,化合物Ⅰ)、D-甘露醇(化合物Ⅱ)、酪氨酸(化合物Ⅲ)、莽草酸(化合物Ⅳ).结论化合物Ⅰ为新化合物,化合物Ⅱ和Ⅲ为首次从卷柏属植物中分离得到,Ⅳ为首次从卷柏中分离得到.
-
卷柏总黄酮提取工艺研究
目的:通过比较实验室和工业化生产车间制备的卷柏总黄酮提取物中总黄酮及穗花杉双黄酮含量,探讨实验室和工业生产制备的卷柏总黄酮的质量差异.方法:采用紫外分光光度法测定卷柏提取物中总黄酮的含量；采用HPLC法测定穗花杉双黄酮的含量,并分析卷柏总黄酮部位中的总黄酮的成分组成.结果:工业化生产车间制备的卷柏总黄酮提取物中各含量指标与实验室制备样品无显著差异.结论:工业化生产车间大生产条件下制备的卷柏总黄酮部位与实验室制备的卷柏总黄酮部位无显著差异,为进一步的新药研究和工业化生产提供了保障.
关键词： 卷柏 总黄酮 工业化生产 实验室制备 高效液相色谱法( HPLC) -
卷柏总黄酮及穗花杉双黄酮对人脐静脉内皮细胞增殖及VEGF蛋白表达的影响
目的 观察卷柏总黄酮、穗花杉双黄酮对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度卷柏总黄酮及穗花杉双黄酮对HUVEC细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测VEGF蛋白的表达.结果 不同质量浓度的卷柏总黄酮(1、5、10、15、μg·mL-1)和穗花杉双黄酮(0.3,1,2,4,5 μg·mL-1)可以剂量依赖地促进HUVEC细胞增殖,其中卷柏总黄酮10 μg·mL-1、穗花杉双黄酮1μg·mL-1在36 h时显著促进细胞增殖,提高S期细胞比例,VEGF蛋白表达明显升高.结论 细胞实验结果提示卷柏中黄酮类物质可能具有促血管新生的作用.
-
4种卷柏类药材中2种特征性成分研究
目的 在对4种卷柏类药材中2种特征性成分selaginellin和穗花杉双黄酮进行结构确证的基础上,首次建立同时测定此2种成分含量的HPLC 方法 .方法 采用岛津VP-ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%醋酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.2 mL·min-1,检测波长为432和338 nm,柱温为30℃.结果 在此色谱条件下,selaginellin和穗花杉双黄酮得到完全分离,分别在0.025～1.016和0.221～8.853 μg内线性良好(r均为1.000 0),平均回收率分别为98.64%和99.34%,RSD分别为0.86%和0.94%(n=6).结论 Selaginellin为首次从垫状卷柏中分离得到.含量分析方法 操作简单、快速、准确,灵敏度高,重现性好,可为卷柏类药材质量评价和控制提供参考;对4种卷柏类药材进行了测定,所测样品含量差异较大.
-
HPLC测定千柏鼻炎片中穗花杉黄酮的含量
千柏鼻炎片载于中国药典[1],是由千里光、卷柏、决明子等七味药材组成的中药复方制剂.清热解毒、活血祛风、宣肺通窍,为治疗各类鼻炎、鼻窦炎的常用中成药.原质量检验标准仅有千里光的薄层色谱鉴别,对处方中的主药卷柏缺定性、定量检验.穗花杉黄酮是卷柏药材的特征性化学成分,可作为控制卷柏质量的指标性成分[2].本实验利用HPLC对千柏鼻炎片中穗花杉黄酮进行了定量分析,为千柏鼻炎片的内在质量评价提供了可靠的方法.
-
卷柏药材质量标准研究
建立卷柏HPLC含量测定方法.采用Angilent C18色谱柱;流动相:甲醇-0.05mol·L-1 磷酸二氢钠溶液(65∶35);检测波长:330nm;柱温:35 ℃;流速:1mL·min-1;穗花杉双黄酮的进样量在0.3-1.97μg范围内线性良好(r=0.9999),平均加样回收率98.2%,RSD=0.5%.本方法简便,准确,可靠,可为卷柏药材的质量标准的修订提供科学依据.
-
卷柏药材质量标准研究
目的：完善卷柏的质量标准。方法：依据《中国药典》2010年版附录相关方法，对卷柏药材进行显微鉴别，对灰分、酸不溶性灰分进行检查。采用HPLC检测selaginellin和穗花杉双黄酮的含量，选用Waters Cosmosil C18柱（250 mm×4.6 mm id，5μm）；检测波长：300、337 nm；流速：1 mL·min-1；柱温：30℃；流动相：乙腈-0.1％甲酸水梯度洗脱。结果：确定了卷柏药材的显微特征；酸不溶性灰分限度≤11.0％，总灰分限度≤15.0％；建立同时测定卷柏药材中穗花杉双黄酮和selaginellin的HPLC含量检测方法。结论：卷柏药材的显微鉴别，以及同时测定穗花杉双黄酮和selaginellin的HPLC含量测定等方法简便、准确、重现性好，可有效控制卷柏药材的质量。
关键词： 卷柏 穗花杉双黄酮 selaginellin HPLC含量测定 显微鉴别 -
卷柏药材的HPLC指纹图谱研究
目的 利用RP-HPLC法研究和建立卷柏药材的指纹图谱,为科学评价及有效控制卷柏药材的质量提供可靠的依据.方法 利用RP-HPLC法,采用Zorbax C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长330 nm.结果 建立了卷柏药材的指纹图谱检测标准.结论 该实验方法简便、准确、重复性好,为卷柏药材质量控制标准的制定提供了依据.
-
卷柏调血脂活性部位化学成分研究
目的 对卷柏属植物卷柏Selaginella tamariscina调血脂有效成分进行分离和鉴定.方法 利用Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、硅胶柱等柱色谱技术进行分离纯化.根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构.结果 聚酰胺柱80%乙醇部位分离得到12个化合物,目前鉴定出10个,分别为罗汉松双黄酮A(Ⅰ)、2,3-去氢阿曼托双黄酮(Ⅱ)、槲皮素(Ⅲ)、阿曼托双黄酮(Ⅳ)、β-谷甾醇(Ⅴ)、十六烷酸(Ⅵ)、扁柏双黄酮(Ⅶ)、新柳杉双黄酮(Ⅷ)、芹菜素(Ⅸ)、木犀草素(Ⅹ).结论 化合物Ⅰ～Ⅲ、Ⅹ为首次从该种植物中分离得到.
-
卷柏提取物对去卵巢大鼠骨代谢的影响
目的 研究卷柏提取部位(A,B,C,D)对去卵巢大鼠血清雌二醇水平及骨代谢生化指标的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用6月龄雌性Wistar大鼠70只,按体质量随机分为假手术组、模型组、阳性对照组和4个卷柏不同提取部位用药组,每组10只.除假手术组外,其余各组切除双侧卵巢建立模型.手术1周后开始给药,连续给药26周后处死大鼠.用放射免疫法检测雌二醇(E2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清骨钙素(BGP)、降钙素(CT)水平,用常规生化法检测血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)括性.结果 大鼠去除卵巢以后,E2,CT水平明显降低,ALP,TRAP,BGP,TNF-α水平明显升高.给药26周后,用药组ALP,TRAP,BGP,TNF-α水平比模型组明显降低(P<0.01);E2,CT水平明显升高(P<0.01),结论 卷柏提取物对去卵巢大鼠骨代谢有一定的调节作用,能够提高血清雌激素水平,提示卷柏提取物对骨质疏松症有一定预防和治疗作用.
-
正交设计优选卷柏中总黄酮的提取工艺研究
目的 优选卷柏中总黄酮的提取工艺.方法 采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定总黄酮和阿曼托双黄酮.以提取量为考察指标,用正交设计方法 优选佳提取工艺.结果 以总黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1B2C2D2;以阿曼托双黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1～3 B1～3 C2D2.综合考察采用A1B2C2D2为佳提取工艺,即药材加10倍量的95%乙醇,回流提取2次,每次2h.结论 优选得到的工艺稳定可行,可作为卷柏的提取工艺.
