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Survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞株HEPG2的抑制作用
目的 观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对肝癌细胞的增殖、凋亡的影响.方法 人工合成survivin硫代ASODN,通过脂质体转染肝癌细胞株HEPG2后,用M1T法检测细胞毒作用,流式细胞术检测细胞的凋亡;RT-PCR、Western blot检测survivin mRNA及蛋白的表达.结果 survivin ASODN抑制 HEPG2增殖,呈剂量依赖性;各survivin ASODN处理组HEPG2细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01);survivin ASODN处理组HEPG2细胞survivin蛋白及mRNA的表达水平显著下降(P<0.01).结论 survivin ASODN能够抑制HEPG2细胞增殖、诱导凋亡.
关键词： survivin 反叉寡核苷酸 肝癌细胞株HEPG2 -
MMP-9反义寡核苷酸对肺腺癌细胞及其裸鼠移植瘤治疗的实验研究
目的 探讨基质金属蛋白酶-9反史寡核苷酸(MMP-9ASODN)对人肺腺癌(A549)细胞及其裸鼠移植瘤治疗的实验研究.方法 MTT法检测MMP-9ASODN转染对A549细胞生长的影响;流式细胞术检测MMP-9ASODN对A549细胞增殖和凋亡比率;采用皮下注射法建立移植瘤裸鼠动物模型,以脂质体包裹的MMP-9ASODN直接移植瘤内注射.观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率和生长指数,利用光镜观察对重要脏器的形态学改变. 结果 在一定范围内,MMP-9 ASODN对A549细胞存活率抑制呈浓度和时间依赖性(反义寡核苷酸浓度为600 nmol/L作用48 h时抑制作用明显);与对照组相比转染MMP-9ASODN的A549细胞凋亡百分比明显升高(P<0.01);MMP-9ASODN能使A549细胞周期阻滞在G_1/G_0期,MMP-9ASODN组肿瘤生长指数为(3.20±0.14).明显低于对照组(6.40±0.33)(P<0.01).MMP-9ASODN组的肿瘤重量为(1.25±0.03).明显低于对照组(2.43±0.04)(P<0.01),MMP-9ASODN组的抑瘤率为(33.41±1.18)%,而且心肝肾组织观察,结构均基本正常,未见有明显的组织损伤改变.结论 MMP-9ASODN能够有效地抑制肺癌A549细-胞的增殖和促进其凋亡;在体内可以显著抑制裸鼠移植瘤的生长,且无明显毒副作用.
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血管内皮生长因子反义核苷酸对口腔鳞癌细胞的影响
目的 探讨VEGF反义核酸对口腔鳞癌细胞的影响.方法 利用脂质体将VEGF反义核酸导入口腔鳞癌KB细胞,采用ELISA法检测其培养上清液中的VEGF表达水平,用MTT检测肿瘤细胞生长状况,过氧化物酶的抗荧光素抗体法检测肿瘤细胞凋亡指数.结果 经VEGF反义核酸处理后,肿瘤细胞的VEGF蛋白表达水平和细胞生长受到明显抑制,肿瘤细胞凋亡率显著增加.结论 VEGF反义核酸通过阻止VEGF蛋白表达和促进细胞凋亡,对口腔鳞癌细胞有明显的抑制作用.
