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白花蛇舌草多糖诱导人胃癌细胞凋亡作用的研究
目的 研究白花蛇舌草多糖对体外培养人胃癌7901细胞增殖抑制的影响及其作用机理.方法 采用MTT法测定不同浓度白花蛇舌草多糖对人胃癌7901细胞增殖的影响;流式细胞技术检测药物作用后的细胞周期和凋亡率;RT-PCR方法检测药物对人胃癌7901细胞P53和Bcl-2基因表达的影响.结果 白花蛇舌草多糖能明显抑制人胃癌7901细胞的增殖,其作用48 h的IC50约为116.52 mg·L-1;流式细胞检测显示40 mg·L-1白花蛇舌草多糖联合5.0 mg ·L-1顺铂组总凋亡率为69.42％,明显优于顺铂组的50.85％(P＜0.01)和40 mg ·L-1白花蛇舌草多糖组的26.41％(P＜0.01);PCR结果显示高、中浓度白花蛇舌草多糖可使人胃癌7901细胞的bcl-2 mRNA表达量降低,P53 mRNA表达量增加.结论 白花蛇舌草多糖能明显诱导人胃癌7901细胞的凋亡,与顺铂联合可产生协同作用,其作用机制可能与降低细胞bcl-2和增加P53基因表达量有关.
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白花蛇舌草多糖诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及其机制研究
目的 研究白花蛇舌草多糖(PEHD)对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖的影响,为其应用于临床治疗MM提供实验依据.方法 以MM细胞株RPMI 8226为研究对象.MTT法检测PEHD对RPMI 8226细胞增殖的影响.Annexin V-FITC/碘化丙锭(PI)双染法(Annexin V/PI)标记的流式细胞术检测PEHD诱导RPMI 8226细胞凋亡情况.Hoechst 33258染色法观察PEHD诱导RPMI 8226细胞凋亡的形态学改变.用Western blot检测PEHD处理后有关凋亡信号传导通路蛋白caspase-3、-8、-9和PARP蛋白的表达以及PEHD作用前后NF-κB蛋白以及其他通路蛋白的变化情况.结果 PEHD在一定浓度范围内对RPMI 8226细胞有明显的增殖抑制作用,高抑制率达到了92.3％,在1～4 mg/ml浓度范围内呈时间-剂量依赖性.不同浓度PEHD分别作用24 h,RPMI 8226细胞均可见凋亡小体,且凋亡小体数量随PEHD浓度增加而增加.1、2、3 mg/ml PEHD诱导的细胞早期凋亡率分别为22.52％、62.31％、69.94％,高于空白对照组8.93％.1、2、3 mg/ml PEHD作用24 h,RPMI 8226细胞caspase 8、9、3和PARP蛋白表达上升,Mcl-1、Bcl-xl、Bid、Bim的表达随着PEHD浓度的增加而下降,而Bax、Bak、Bad表达上升,但p-AKT蛋白(相对分子质量60 000)的表达明显下降,NF-κB蛋白表达水平明显下调.结论 在一定浓度范围内的PEHD(1 ～4 mg/ml)可明显抑制RPMI 8226细胞增殖,呈时间和浓度依赖性；其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关；诱导细胞凋亡机制与其激活caspase-8、-9、-3及PARP蛋白表达,下调p-AKT及NF-κB蛋白表达有关.
关键词： 白花蛇舌草多糖 RPMI 8226细胞 细胞凋亡 半胱天冬酶 -
柱前衍生化HPLC分析白花蛇舌草多糖中单糖组成
目的:采用微波提取法提取不同产地白花蛇舌草水溶性多糖,并对多糖的含量及组成进行研究.方法:以苯酚-硫酸法测定总糖含量,柱前衍生化高效液相色谱法鉴别和测定其多糖的单糖组成.结果:不同产地药材中多糖含量以广东高,白花蛇舌草多糖是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及甘露糖组成的杂多糖.结论:柱前衍生化高效液相色谱法分析白花蛇舌草多糖中单糖组成方法简便,快速,准确.
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白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞生长的影响
目的 研究白花蛇舌草多糖对体外培养的人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞生长的影响.方法 常规法体外培养人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞,设空白时照组、阳性对照组和供试药物组(大、中、小剂量),分别采用MTT法和流式细胞仪检测白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制率和凋亡率;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化.结果 白花蛇舌草多糖可抑制人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞的生长,并促进其凋亡,其作用效果与其浓度正相关,与空白对照组相比具均有显著性差异(P<0.01).结论 本研究结果提示,白花蛇舌草多糖具有较好的抗肿瘤活性.
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白花蛇舌草多糖诱导鼻咽癌细胞凋亡及其机制研究
目的:研究白花蛇舌草多糖(PEHD)体外抑制鼻咽癌CNE2细胞株增殖,诱导细胞凋亡及其凋亡机制.方法:用不同剂量PEHD(2、4、6 mg/ml)处理CNE2细胞24 h、48 h、72 h,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测CNE2细胞的增殖情况,计算抑制率.在不同药物浓度(2、4、6 mg/ml) PEHD作用48 h后,用Annexin V-FITC/碘化丙锭双染法(Annexin V/PI)标记的流式细胞术检测CNE2细胞的凋亡率.采用Western blot检测用药前后细胞中Bax蛋白、Bel-2蛋白和easpase-3蛋白的表达水平.结果:MTT结果显示,2、4、6 mg/ml PEHD可以明显抑制CNE2细胞增殖(均P＜0.05),高抑制率可达76.5％,在2～6 mg/ml浓度内随着浓度的增加、时间的延长抑制作用逐渐增强,呈时间-剂量依赖性.流式细胞术检测到4、6 mg/ml PEHD作用48 h后,CNE2凋亡细胞比例显著增加,凋亡率分别为31.32％、46.28％,高于空白对照组4.86％ (P＜0.01).Western blot显示PEHD处理48 h后,CNE2细胞Bax蛋白和caspase-3蛋白表达上升,Bcl-2的表达下降.结论:在一定浓度范围内PE-HD(2、4、6 mg/ml)能够明显抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,呈时间-剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞凋亡有关;PEHD可通过上调Bax、caspase-3蛋白表达、下调Bel-2蛋白表达,诱导CNE2细胞凋亡.
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白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究
目的 研究白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘸作用及对免疫器官的影响.方法 应用肉瘤S180、肝癌H22荷瘤小鼠作为动物模型,连续灌胃给药10 d后脱颈椎处死,剥离肿瘤、胸腺、脾脏,称质量,计算抑瘤率及胸腺、脾脏指数.结果 分别以30,20和10 mg·kg-1剂量的白花蛇舌草多糖灌胃,对肉瘤S180的抑制率分别为36.09%,28.66%和17.54%,对肝癌H22的抑制率分别为49.68%,40.47%和27.19%,相比模型组有显著性差异(P<0.05),对荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数无明显影响.结论 白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠均有抗肿瘤作用,并呈现一定的量效关系.
