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NCp7文献资料
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HIV-1核壳体蛋白NCp7抑制剂研究新进展
艾滋病主要是由人免疫缺陷病毒Ⅰ型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)感染引起的全身性免疫功能丧失综合征.HIV-1核壳体蛋白7(nucleocapsid protein 7,NCp7)在病毒的逆转录过程和整合过程都发挥着重要作用.由于NCp7的保守性,基于此靶点的抑制剂不易产生耐药性.本综述介绍了近10年来所报道的HIV-1 NCp7抑制剂的研究新进展.
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HIV-1核衣壳蛋白NCp7抑制剂体外筛选方法的建立
目的 表达HIV-1核衣壳蛋白(nucleocapside protein p7,NCp7),并建立抑制剂筛选方法.方法 从pBRU2/ADP202质粒经PCR得到HIV-1 NCp7编码序列,克隆到pet28a 质粒中构建HIV-1 NCp7表达载体.阳性克隆转染E.coli BL21 DE3,以IPTG诱导,细胞裂解液经Q Sepharose H.P和SP Sepharose H.P纯化后纯度达到90%以上.将具有锌离子逐出活性的H2O2和2,2'-联硫基二吡啶(2,2'-dithiodipyridine,AT-2)与NCp7作用,用锌离子特异的荧光染料检测.用该方法检测KIZ-CM系列化合物.结果 可以检测H2O2和AT-2的锌离子逐出活性,经该方法筛选,KIZ-CM 10,18,19等化合物具有一定的锌离子逐出活性.结论 在国内首次建立了HIV-1 NCp7锌离子逐出方法,该方法可以用于NCp7抑制剂的筛选.
