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嗜麦芽窄食单胞菌L1、L2基因克隆及耐药性转移
目的 观察临床分离嗜麦芽窄食单胞菌产L1、L2 β内酰胺酶情况,以及是否伴有耐药性转移.方法 PCR法扩增、克隆2种β内酰胺酶基因,并行接合转移试验.结果 在30株嗜麦芽窄食单胞菌中,L2基因均为阳性;除3株外,27株菌的L1基因为阳性.接合子能够在含氨苄西林、利福平、萘啶酸的麦康凯培养基上生长并传代;而在含利福平、萘啶酸和亚胺培南(美洛培南、头孢他啶、头孢噻肟)的培养基上未见菌落生长.将接合子增菌后,抽提质粒发现12 kb的质粒.结论 嗜麦芽窄食单胞菌产生2种β内酰胺酶,氨苄西林的耐药性可从供体菌转移到受体菌,同时伴随12 kb质粒的移动.
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oqxAB 基因在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的流行及传播
目的：了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中 oqxAB 基因的流行情况和传播。方法收集72株大肠埃希菌和49株肺炎克雷伯菌。用 PCR 扩增 oqxAB 基因，接合试验验证 oqxAB 是否存在于质粒上。琼脂稀释法测定环丙沙星对含 oqxAB 基因接合子 MIC 和防耐药突变浓度（MPC）。结果72株大肠埃希菌 oqxA、oqxB 和 oqxAB 基因阳性分别为15株（15/72）、4株（4/72）和7株（7/72），49株肺炎克雷伯菌分别为4株（4/49）、1株（1/49）和34株（34/49）。大肠埃希菌环丙沙星敏感和耐药株中 oqxAB 基因阳性分别为2株（2/16）和5株（5/56），肺炎克雷伯菌分别为8株（8/14）和26株（26/35）。含与不含 oqx-AB 基因大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对喹诺酮类抗菌药物敏感率差异无统计学意义。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 PCR 扩增产物序列与 GenBank 中 oqxAB 基因登录号 AB601773．1和 FJ975561．1符合率均为99％。大肠埃希菌质粒接合试验中有4株接合成功，环丙沙星对接合子 MIC 为0．25～0．5 mg/L，较受体菌提高31～62倍。环丙沙星对接合子 MPC 为8～16 mg/L，较受体菌 J53高32倍。肺炎克雷伯菌质粒接合没有成功。环丙沙星对肺炎克雷伯菌 MIC≤0．0625 mg/L，无论是否含 oqxAB 基因，MPC 为0．25～0．5 mg/L；但 MIC 为0．25～0．5 mg/L 时，无论是否含 oqxAB 基因，MPC 为2～16 mg/L。结论oqxAB 基因存在于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中，该基因在大肠埃希菌通过质粒传播，oqxAB 基因在环丙沙星耐药和敏感株中检出率差异无统计学意义，表明其介导细菌对环丙沙星是低水平耐药。含 oqxAB 基因的接合子在喹诺酮类压力选择下能产生高水平耐药。肺炎克雷伯菌在环丙沙星压力下产生高水平耐药与 oqxAB 基因无关，而与其 MIC 有关。
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假单胞菌属细菌中整合子的分布及其可转移耐药性研究
目的 研究临床分离假单胞菌属细菌中Ⅰ、Ⅱ类整合子分布及其可转移耐药情况.方法 将Ⅰ、Ⅱ类整合酶基因通用引物置于同一反应体系,对假单胞菌属细菌以多重PCR法检测其整合子的分布,并对整合酶基因阳性菌进行接合转移,后对接合转移成功菌以平板稀释法测其临床株和接合子MIC值.结果 Ⅰ类和Ⅱ类整合酶基因在临床分离假单胞菌属细菌中检出率分别为38.1%和2.2%,含整合酶基因的接合子在转移成功接合子中所占比率为13.6%.结论 Ⅰ.类整合子在假单胞菌感染的临床分离株中所占比例已相当高,但水平传播率还较低.
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大肠埃希菌Ⅰ类整合子携带率及可转移耐药率研究
目的 研究大肠埃希菌Ⅰ类整合子携带率及可转移耐药的发生率.方法 用Ⅰ类整合酶基因通用引物对临床分离大肠埃希菌进行PCR检测,并对阳性菌株进行接合转移实验.结果 大肠埃希菌Ⅰ类整合酶基因阳性率为70.8%;质粒的转移接合率为51.4%.Ⅰ类整合子的接合成功菌株仅占接合子的3.1%.结论 大肠埃希菌中Ⅰ类整合子的存在非常普遍,耐药性的质粒传播也时有发生,整合子的质粒传播概率相对较低.
