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新型抗溃疡及促进伤口愈合药--重组人角质细胞生长因子-2
重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)能与人体上皮细胞内的成纤维细胞生长因子受体(FGFR)结合而发挥生理作用.研究显示,rhKGF-2可特异性地刺激上皮细胞增殖,促进表皮细胞生长和肉芽组织形成,可用于治疗因上皮细胞损伤引起的溃疡,加速伤口的愈合,耐受性好,值得临床推广.
关键词： 重组人角质细胞生长因子-2 上皮细胞 溃疡 伤口愈合 -
不同物理和化学因素对重组人角质细胞生长因子2稳定性的影响
目的:研究重组人角质细胞生长因子2 (rhKGF-2)在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液及反复冻融因素对rhKGF-2稳定性的影响作用.方法: rhKGF-2在不同温度(-20℃、4℃、25℃、40℃)、pH值(pH 4～9)、缓冲溶液(柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、吉斐氏缓冲溶液)及反复冻融条件下分别保存,采用RP-HPLC法检测rhKGF-2纯度,同时观察外观性状.结果:-20℃、4℃分别保存时,rhKGF-2的各项性质在观察期内都无明显变化;25℃时,rhKGF-2存放28 d纯度较0 h(100.00%)下降至(68.20±0.14)%;40℃时,rhKGF-2存放9 h纯度较0 h(100.00%)下降至(4.80±0.39)%.rhKGF-2(pH 6.0)在25℃条件下保存90 d纯度较0 h(100.00%)下降至(79.20±0.12)%,与对照组(0 h)比较差异有显著性(P<0.05);pH值为4.0、9.0的rhKGF-2液体在25℃条件下分别保存120 h纯度较0 h(100.00%)下降至(15.60±0.30)%和(67.30±0.10)%,与对照组(0 h)比较差异有显著性(P<0.01).rhKGF-2在柠檬酸缓冲液中25℃条件下保存60 d纯度较0 h(100.00%)下降至(79.20±0.15)%,与对照组(0 h)比较差异有显著性(P<0.01).rhKGF-2原液反复冻融后其纯度变化差异无显著性(P>0.05).结论:rhKGF-2在低温和pH 6.0～7.0中性条件下稳定.高温、偏酸性和偏碱性条件下均不利于rhKGF-2稳定.柠檬酸缓冲液有利于rhKGF-2稳定.反复冻融对rhKGF-2稳定性影响不明显.
关键词： 重组人角质细胞生长因子-2 纯度 稳定性 -
角质细胞生长因子-2的发酵及纯化工艺研究
目的研究重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)工程菌的高密度发酵和提纯工艺.方法通过增加培养基营养成分,发酵过程补加葡萄糖,获得高产率菌体.细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化,电泳分析结果.结果每1 L发酵液可获得菌体12.2 g,表达率达28.7%.纯化后rhKGF-2纯度达97%.结论 rhKGF-2工程菌可获得高密度发酵.纯化工艺适用于rhKGF-2的大量制备.
关键词： 重组人角质细胞生长因子-2 发酵 纯化 -
重组人角质细胞生长因子-2对实验秃毛大鼠的毛发再生作用
目的 建立实验秃毛大鼠模型,研究重组人角质细胞生长因子-2(recombinant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对实验秃毛大鼠的毛发再生作用.方法 对大鼠背部以脱毛膏拔毛,随机分为7个组,即正常对照组、5%米诺地尔组、aFGF组、rhKGF2高、中、低剂量组、0.9%生理盐水组.造模次日皮肤涂抹给药,以给药第1、5、9、14天为观察时间点,记录实验大鼠的体重、实验区毛长、实验区毛发生长状况.于第14天处死实验大鼠,取实验区皮肤进行组织病理学检查.结果 体重方面:在第1、5、9、14天,与正常对照组相比,各组差异无显著性(P>0.05);毛长方面:与0.9%生理盐水组相比,在第5、9天,rhKGF2高、中剂量组存在显著性差异(P<0.05,P<0.01).在第14天,高、中、低剂量组差异有显著性(P<0.05,P<0.01,P<0.05);毛重方面:在第14天,与0.9%生理盐水组相比,各组(正常对照组除外)差异有显著性(P<0.01);病理检查结果显示:rhKGF2具有促进实验秃毛大鼠毛囊新生与成熟的作用.结论 rhKGF2具有促进实验秃毛大鼠毛发再生的作用.rhKGF2具有很好的临床应用前景.
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流体膜中重组人角质细胞生长因子-2含量测定
目的 以甲壳素为主要基质制成以重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)为主要活性成分的新型制剂流体膜用于治疗烧烫伤促愈合,为该新制剂的质量标准制定可行的活性成分定量测定方法.方法 利用rhKGF-2的特异性抗体性质,采用酶联免疫法(间接ELISA法)测定其在该制剂中的含量,并进行了方法学验证.结果 制剂中其它成分不干扰rhKGF-2的测定;线性范围为0～9μg·mL-1,回归系数为0.97,检测限度为0.56μg·mL-1;批内和批间精密度均较高,CV%分别为2.0%,1.01%;回收率为99.1%.测定了3批试制品,平均含量为1.62μg·mL-1.结论 本方法简便,准确,可用于该制剂中rhKGF-2的含量测定.
关键词： 酶联免疫法 重组人角质细胞生长因子-2 含量测定
