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氨磷汀对人巨核细胞白血病Dami细胞增殖及分化的影响
目的:探讨氨磷汀(依硫磷酸,Amf)对人巨核细胞白血病Dami细胞分化的影响。方法 Amf 0.01~5.0 mmol·L-1分别处理Dami细胞12 d,每天光镜下观察细胞形态,计数Dami细胞数量,绘制增殖曲线;第12天,计数直径>20μm细胞数量,透射电镜观察Dami细胞血小板分界膜系统的形成,流式细胞仪检测细胞DNA倍体化及细胞表面抗原CD33,CD34和CD41a的变化。结果 Amf 0.1~1.0 mmol·L-1促进Dami细胞分化;Amf>1.0 mmol·L-1时抑制Dami细胞增殖,Amf 1.0 mmol·L-1作用12 d后光镜下观察到细胞体积增大,直径>20μm细胞比例增加24.6%(P<0.01);透射电镜观察可见细胞出现血小板分界膜系统;流式细胞仪发现,髓系细胞分化抗原CD33表达减少13.6%;巨核细胞相关分化抗原CD41a表达增加11.9%(P<0.05);DNA倍体分析发现,实验组4N和8N细胞分别增至31.56%和8.83%(P<0.01),并出现16N的超多倍体细胞(3.43%)。结论 Amf>1.0 mmol·L-1时抑制Dami细胞增殖,0.1~1.0 mmol·L-1时诱导Dami细胞向成熟巨核细胞分化。
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建立流式细胞术分析小巨核细胞方法的初步研究
目的:建立流式细胞术(fcM)分析骨髓巨核细胞 dna 倍体的方法,为小巨核细胞的检测提供更可靠的实验依据。方法对42例 Mds 患者进行骨髓巨核细胞绝对计数并在显微镜下对巨核细胞阶段进行分类;采用 Percoll 密度梯度分离液分离富集骨髓巨核细胞,用异硫氰酸荧光素标记的单克隆抗体标记巨核细胞糖蛋白 iib/iiia(cd41a),用 Pi 标记巨核细胞 dna,利用流式细胞仪分析巨核细胞倍体并进行统计学分析。结果建立了基于 cd41a 和 Pi 双标记的流式细胞术鉴别分析小巨核细胞的方法。结论 cd41a 和 Pi 双标记的流式细胞术检测小巨核细胞的方法比瑞氏-姬姆萨染色方法检出率高。
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流式细胞术分析小巨核细胞方法的初步研究
目的:建立流式细胞术(FCM)分析骨髓小巨核细胞DNA倍体的方法。方法①对42例MDS患者进行骨髓巨核细胞绝对计数并对巨核细胞阶段进行分类;②采用Percoll密度梯度分离液分离富集骨髓巨核细胞,用异硫氰酸荧光素标记的单克隆抗体标记巨核细胞糖蛋白IIb/IIIa(CD41a),用PI标记巨核细胞DNA,利用流式细胞仪(Flow cytometry,FCM)分析巨核细胞倍体并进行统计学分析。结果建立了基于CD41a和PI双标记的流式细胞术鉴别分析小巨核细胞的方法。结论 CD41a和PI双标记的流式细胞术检测小巨核细胞的方法比瑞氏-姬姆萨染色方法检出率高。
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流式细胞术分析骨髓增生异常综合征小巨核细胞的初步研究
目的:建立基于巨核细胞糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(CD41a)和碘化丙啶(PI)双标记的流式细胞术(FCM )分析骨髓小巨核细胞的方法,并研究其在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中的意义。方法采用异硫氰酸荧光素标记的单克隆抗体标记CD41a ,PI标记巨核细胞DNA ,用FCM分析巨核细胞倍体分布。结果42例MDS患者,FCM 检测小巨核细胞阳性率为90.5%,瑞氏‐姬姆萨染色和免疫组织化学方法检测阳性率分别为54.8%和64.3%,三者比较差异有统计学意义(χ2=13.640,P=0.001);FCM检测MDS低危组和高危组小巨核细胞阳性率分别为81.8%和100%,差异有统计学意义(χ2=4.019,P=0.045)。结论 FCM检测M DS小巨核细胞检出率高,且高危患者小巨核细胞检出率更高,有助于M DS的早期诊断和预后评估。