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吗啡对大鼠催乳素基因表达的影响
目的:研究吗啡依赖及戒断对大鼠垂体催乳素(PRL)基因表达的影响.方法:核酸分子杂交及放射免疫分析.结果:吗啡依赖组及戒断组大鼠垂体的PRLmRNA含量降低,戒断2组与对照组之间差异有显著性(P＜0.05);吗啡依赖组及戒断组血清PRL水平均高于对照组,后者与对照组之间差异有显著性(P＜0.05).结论:吗啡依赖及戒断显著影响大鼠垂体PRL的基因表达,表现为转录功能的下降和可能直接刺激催乳素的合成及分泌.
关键词： 吗啡依赖 吗啡戒断 催乳素mRNA 斑点印迹 Northern印迹 -
硒和维生素E对白血病细胞凋亡及c-Myc基因表达的影响*
目的:研究Se和VE对白血病细胞凋亡及c-Myc基因表达的影响.方法:体外培养白血病细胞株HL-60、K562,培养时分别添加Se(8μmol/L)和VE(100μmol/L).利用DNA凝胶电泳技术及Northern杂交技术检测细胞凋亡和癌基因表达.结果:Se和VE均能诱导白血病细胞HL-60和K562细胞凋亡.VE(100μmol/L)能够抑制HL-60细胞中c-Myc基因的表达,结果有显著性;VE却不能抑制K562细胞内c-Myc基因的表达.相反,Se(8μmol/L)不能够抑制HL-60细胞中c-Myc基因的表达,却能抑制K562细胞内c-Myc基因的表达,结果有显著性.结论:抑制c-Myc基因的表达,诱导白血病细胞凋亡是Se、VE抑制白血病细胞增殖的重要途径之一.对于髓系和非髓系白血病细胞,Se与VE对c-Myc基因的表达的影响迥然不同,提示二者的作用机制是不同的.
关键词： 白血病 细胞凋亡 Northern印迹 硒 维生素E -
VitE和硒对白血病细胞凋亡及c-myc基因表达的影响
目的研究VitE和硒对人髓系白血病细胞株HL-60细胞凋亡和c-myc基因表达的影响.方法应用体外细胞培养法,DNA凝胶电泳技术、Northern印迹杂交技术.结果 VitE(100μmol/L) 和Se(8μmol/L)作用24h后,HL-60细胞出现细胞凋亡现象.VitE(100μmol/L)可以抑制c-myc基因的表达,作用有显著性(P＜0.05).Se(8μmol/L)无此作用.结论抑制c-myc基因的表达,诱导白血病细胞凋亡是VitE抑制白血病细胞增殖的重要途径之一.硒与VitE同样具有抗氧化作用,可诱导HL-60细胞凋亡.但对c-myc基因的表达却无影响,提示二者的作用机制是不同的.
关键词： 白血病 细胞凋亡 Northern印迹 维生素E 硒 -
8种不同转移潜能人癌细胞系中nm23基因的表达
目的:探讨肿瘤转移抑制基因nm23在人前列腺癌细胞、肺癌细胞和人黑色素瘤细胞系中的转移抑制作用.方法:应用Northern blot杂交法检测8种不同转移潜能人癌细胞中(PC3,PC3M,PAa,PG,WM35,WM1341b,WM983a和WM451) nm23基因的表达.结果:nm23 mRNA在8种不同转移潜能的人癌细胞中都有表达,且nm23表达水平也未见差异.结论:nm23基因可能与这些细胞系(前列腺癌细胞、肺癌细胞及黑色素瘤) 的转移抑制无关.
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microRNA定量检测方法研究现状
MicroRNA(miRNA)是一类由18～24 nt核酸构成的非编码内源性小分子RNA,主要参与真核生物的细胞分化、增殖与凋亡等转录后水平的基因表达调控.研究发现,miRNA与肿瘤、代谢调控、疾病发生及诊断等方面有密切的联系,因此准确且灵敏地进行miRNA的定量检测是深入研究miRNA功能的前提.目前,miRNA定量检测原理主要基于核酸杂交或扩增,包括Northern印迹、微阵列芯片、实时定量PCR、滚环扩增等.本文通过对传统miRNA检测方法、高灵敏度新型miRNA检测方法进行阐述与分析,为筛选合适的miRNA定量检测方法提供参考.
关键词： microRNA 实时定量PCR 滚环扩增 Northern印迹 -
MRP-1/CD9基因在胃癌及其癌前病变中的差异表达
目的筛选和鉴定与胃癌发生、发展相关的基因片段,探讨胃癌的癌变分子机理.方法应用荧光mRNA差异显示技术对胃正常黏膜、癌前病变及癌组织的基因差异表达情况进行了分析.对其中的运动相关蛋白(motility-related protein-1, MRP-1/CD9)基因,用Northern印迹及逆转录-聚合酶链反应技术分析在正常及不同病理状态下该基因表达的情况.结果 Northern印迹结果与mRNA差异显示的结果相符合,逆转录-聚合酶链反应显示 MRP-1/CD9在胃癌组织中的表达(0.31±0.18)低于相应的正常胃黏膜(0.49±0.24)及癌前病变组织(0.47±0.18),差异有显著性(P<0.05);在胃癌中, MRP-1/CD9在弥漫型胃癌中的表达(0.22±0.17)明显低于肠型胃癌(0.38±0.16)(P<0.05).结论与正常胃黏膜及癌前病变组织相比, MRP-1/CD9基因在胃癌组织中表达明显降低,提示 MRP-1/CD9基因的表达情况可能与胃癌的发病及其组织学分型有关.
